摘要：目的:观测骨桥蛋白靶向干扰RNA对体外人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖和凋亡的影响。方法:体外化学合成骨桥蛋白序列特异性的短发夹RNA(shRNA)质粒载体与阳离子脂质体结合介导转染HUVEC,同时设计空白载体转染对照和空白对照,用MTT法等方法检测各组HUVEC生长增殖情况的变化,并用流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果:OPN-shRNA载体转染HUVEC后明显抑制细胞增殖(P<0.05)和使细胞分裂周期出现阻滞,凋亡二倍体数量增加,凋亡率显著升高(P<0.05)。结论:骨桥蛋白靶向干扰RNA在体外能够抑制HUVEC的增殖,升高细胞凋亡率。

摘要：髌骨骨折是常见的关节内骨折,其发生率据报道约占全身各部骨折的1.65%[1].其治疗的主要目的在于恢复伸膝装置的连续性,恢复及维持关节面的解剖复位,以便于早期活动,避免继发性创伤性关节炎的发生.经典的几种张力带固定法对于髌骨横形骨折来说是首选的治疗方法[2],有许多医师对其进行了系统的研究,并作了各种有益的改进,也取得了不错的临床效果.随着科技的发展微创技术已经成为外科技术的发展主流,基于张力带技术的各种新技术应用而生.李健等[3,4]将微创技术与张力带固定法相结合,设计了经皮穿刺髌骨骨折克式针张力带固定法,这是微创外科技术在髌骨骨折治疗中的具体应用.该技术既保留了张力带固定的优点,而又将其损伤减少至最低,同时还满足了患者对美观的要求.随着材料学的发展,用各种生物降解材料制作的内固定器械在临床应用中取得了良好的效果;由于生物降解材料具有无需二次手术取出固定物的优点,在有些情况下已经取代了传统的金属材料制作的内固定器械.

摘要：目的探讨不同途径应用罂粟碱对新西兰兔下腹壁皮瓣成活的影响。方法将24只体质量相近的雄性新西兰兔采用随机区组设计分成3组,每组8只;并采用双盲法,建立新西兰兔左侧下腹壁浅动脉皮瓣模型,通过不同部位注射罂粟碱(实验组为皮瓣蒂部皮下组织,对照1组为静脉注射,对照2组臀部肌肉注射),采用彩色多普勒观察在术前、术后1周内(注药前、注药后10、60min)皮瓣的血管分布、血流和手术后1周皮瓣的成活情况。结果皮瓣蒂部注射与静脉注射对皮瓣的血管显像无差异(P>0.05)。皮瓣蒂部皮下注射较肌肉注射效果好,有统计学意义(P<0.05)。结论新西兰兔腹部移植皮瓣在皮瓣蒂部注射罂粟碱较肌肉注射效果有明显优势,可改善皮瓣的血运,提高皮瓣的存活率。

摘要：随着人口老龄化的加剧,退行性膝关节炎的发病率越来越高,绝对数越来越多。目前全膝关节置换术(total knee arthroplasty,TKA)是治疗终末期退行性膝关节炎最安全有效的方法。为提高手术质量,不少术者尝试将计算机辅助设计的3D打印导板技术运用于TKA,因其自动、快速、直接、个性化的特点而取得了良好的效果。笔者综述其方法原理、优势、不足及发展近况如下。

摘要：背景:超声评价肾脏功能主要通过测量较粗大的肾脏各级动脉的血流参数或肾切面内动脉彩色血流面积所占的比例来推断,误差较大。目的:应用超声仪器随机配置的彩色多普勒时间-强度曲线软件评价肾脏血流灌注情况。设计:动物实验观察。单位:广州市第一人民医院功能检查科。材料:实验于1999-01/2000-04在广州军区广州总医院动物实验室完成,选择8只健康新西兰兔,雌雄各4只,体质量2.5～3.5kg。观察肾脏16个。声学造影剂为全氟显,主要成分为声振白蛋白的微泡,微泡内有一定浓度的全氟丙烷气体。方法:兔外周静脉团注造影剂全氟显后用彩色多普勒能量图、彩色多普勒血流显像和彩色多普勒能量谐波成像连续采集肾脏彩色血流图像,随机配置软件显示时间-强度曲线。主要观察指标:造影增强肾脏血流灌注时间-强度曲线的形态。结果:进入结果分析8只家兔。肾脏血流造影增强的时间-强度曲线呈单峰状,上升支陡直,下降支平缓。调节时间轴上的感兴趣线可作定量分析,回放显示注射造影剂后对应某一时刻的造影增强的彩色多普勒图像。结论:造影增强彩色多普勒血流显像和彩色多普勒能量图的时间-强度曲线能有效的观察肾脏血流灌注特征,既可显示整个肾脏的血流灌注情况,也用于观察低血流灌注区域,发现病灶进一步绘制肾功能图。

摘要：背景:大段骨缺损现象时有发生,但目前假体如何设计尚由医生主观经验判断,有限元分析的出现有望改变这一局面,可以为临床医师实施手术提供技术支持,提高手术治愈率。目的:利用有限元分析研究植入体及髓内钉设计方案对比格犬大段骨缺损修复手术的影响。方法:基于比格犬CT图像数据建立其正常左侧股骨的三维模型。在此基础上建立大段骨缺损三维有限元模型,分别从锁钉粗细、锁钉数量、植入体长度及锁钉距截面中心的距离等方面,建立4组12个不同的实验模型(每组3个模型),通过有限元仿真分析,探讨术后髓内钉的力学结构特性,对比分析各模型的生物力学效果,得到最佳的设计方案。结果与结论:(1)第一组实验,锁钉直径为2.7 mm时,髓内钉应力最大值较其他2种模型小;(2)第二组实验,锁钉数量为4根时,髓内钉应力最大值较其他2种模型小;(3)第三组实验,植入体长度为20 mm时,髓内钉应力最大值较其他2种模型小;(4)第四组实验,锁钉距截面中心距离为30 mm时,髓内钉应力最大值较其他2种模型小;(5)提示髓内钉大小确定后,锁钉直径应选取髓内钉直径的一半左右为最佳,锁钉数量为4根、上下均2根为最佳,植入体长度应越短越好,锁钉距截面中心的距离尽可能远一点。

摘要：目的评价自制新型MR对比剂：长循环超顺磁性氧化铁（superparamagnetic ironoxide，SPIO）脂质体纳米微粒的药代动力学。方法以加入SPIO为对照组，加入长循环SPIO脂质体纳米微粒为实验组。（1）巨噬细胞的体外吞噬实验：将巨噬细胞株RAW264．7经复苏、培养，细胞达到80％～90％融合后，以每孔2．5×10’个细胞接种于培养板，对照组和实验组细胞与不同浓度药物孵化后，分别测定细胞中Fe浓度和Fe染色情况，并用析因设计的方差分析对结果进行统计学处理。（2）小鼠体内药物分布实验：C57BL／6J雄性小鼠6只，每组2只，设为空白对照组、对照组、实验组，经尾静脉分别注射生理盐水、SPIO以及长循环SPIO脂质体后牺牲动物，经病理检查观察2组药物在体内的分布情况。（3）荷肺癌裸鼠MR成像实验：建立20只BALB／c裸鼠移植型肺癌模型，分为对照组和实验组，每组10只，分别经尾静脉注入SPIO和长循环SPIO脂质体纳米微粒后行MR扫描，测量增强前后2组实验动物各时间点肝脏和肿瘤ROI的信号强度，绘制信噪比（SNR）时间动态变化曲线，采用协方差分析比较2组动物肝脏及肿瘤增强12h后SNR差异有无统计学意义。（4）细胞毒性实验（噻唑蓝，MTT法）：检查2种药物对人肝细胞株HL-7702细胞的毒性作用，用析因设计的方差分析对结果进行统计学处理。结果（1）巨噬细胞的体外实验：析因分析结果表明，对照组细胞内Fe含量明显高于实验组，差异有统计学意义（F=296839．9，P=0．000）。普鲁士蓝染色显示对照组巨噬细胞染色较深，实验组巨噬细胞染色较浅。（2）小鼠体内药物分布实验：对照组肝、脾、肺、肾组织内蓝染颗粒多于实验组。（3）荷肺癌裸鼠MR成像实验：平扫对照组肝脏SNR为31．47±0．56，实验组为30．89±1．41；增强扫描12h后对照组为17．00±0．96，实验组为22．29±0．73。平扫对照组肿瘤SNR为58．41-4-0．61，实验组为58．44±1．08；增强扫描12h后对照组为58．50±0．63，实验组为52．47±1．18。经协方差分析表明增强12h后对照组肝脏SNR显著低于实验组（F=167．022，P=0．000）；而实验组肿瘤SNR显著低于对照组（F=266．106，P=0．000）。（4）细胞毒性实验：随着培养液中Fe浓度的增加，HL-7702细胞生存率均有下降趋势，但析因分析结果表明，实验组药物的细胞毒性较对照组低（F=2256．204，P=0．000）。结论长循环SPIO脂质体纳米微粒在体内外均有较好的抗巨噬系统吞噬功能，在体内实现了长循环，对非网状内皮系统的肿瘤也具有良好的T2负性被动靶向强化效果；同时还降低了SPIO对细胞的毒性作用。

摘要：目的探讨膝关节置换术后隐神经髌下支损伤所致的皮肤麻痹的解剖基础,改良手术切口,减少膝前皮肤麻木并发症。方法解剖观察12例成人尸体下肢标本,观测隐神经髌下支形态、神经束的走行及毗邻关系。设计改良膝外侧皮肤切口行膝关节置换手术入路进行临床验证,比较术后效果。结果解剖研究发现隐神经髌下支自缝匠肌穿出后,标本在髌骨中心平面神经距髌骨内侧缘约3.2 cm,75%标本有3束分支分布于髌骨下极及胫骨粗隆区域,以髌骨下极与粗隆连线中点为中心作圆,神经纤维主要分布左侧在第2象限,右侧在第1象限。临床研究采用改良膝关节外侧切口行膝关节置换术15例,方法可行,术后膝前皮肤麻木的发生率及范围较对照组减少,有统计学意义。结论根据膝关节隐神经髌下支解剖分布特点,改良膝前皮肤切口行膝关节置换术可减少术后膝前麻木。

摘要：目的研究特异性载体介导的小干扰RNA（siRNA）对小鼠巨噬细胞株表达肿瘤坏死因子（TNF）-α基Ⅲ的抑制作用。方法设计两段靶向TNF-α基因的特异性siRNA。合成相应寡核苷酸。插入载体H1启动子下游，构建表达干扰性发央状RNA（shRNA）载体pHS-A和pHS-B，转染小鼠巨噬细咆株（RAW264．7）。用实时荧光定量PCR和酶联免疫吸附法检测siRNA对TNF-amRNA和蛋白表达的抑制作用。结果内毒素脂多糖（LPS）刺激后6h。巨噬细胞表达TNF-α mRNA和合成的TNF-α量均增加。于9-12h达高峰。PHS-A转染后。LPS刺激巨噬细胞的TNF-α mRNA为0．00356±0．00187，TNF-α蛋白表达为（149．93±21．02）Pg／ml，比未转染组[分别为0．02134±0．00960、（1922．30±149．05）pg／m1]显著减少（P〈O．01），抑制率达83．3％。pHS-B及阴性对照组对基因及蛋白表达均无影响。结论LPS可刺激小鼠巨噬细胞合成TNF-α,pHS-A可抑制小鼠巨噬细胞TNF-α表达。

摘要：背景:体外扩增脐血造血细胞对增加脐血造血细胞数量及植入能力至关重要,合适的细胞因子组合介导的体外扩增不仅能使造血细胞数量增加,而且能够上调和归巢有关的黏附分子和趋化因子受体4的表达。目的:实验拟观察白细胞介素3和白细胞介素6在人脐血单个核细胞体外扩增中的作用及对扩增后黏附分子和趋化因子受体4表达的影响。设计、时间及地点:随机区组开放性实验,于2007-03/12在广西壮族自治区人民医院及广州医学院附属广州市第一人民医院血液实验室完成。材料:10份足月顺产健康新生儿脐血标本。方法:将自新鲜脐血标本分离的单个核细胞接种于含有不同细胞因子组合的无血清无基质培养体系中培养7d,根据不同细胞因子组合实验分组为:对照组(无细胞因子组)、干细胞因子+FLT3配基+促巨核细胞生成因子组(A组)、干细胞因子+FLT3配基+促巨核细胞生成因子+白细胞介素6组(B组)、干细胞因子+FLT3配基+促巨核细胞生成因子+白细胞介素3(C组)、干细胞因子+FLT3配基+促巨核细胞生成因子+白细胞介素6组+白细胞介素3(D组)。主要观察指标:在0,7d检测有核细胞数,CD34+细胞数及CD34+CXCR4+,CD34+CD62L+,CD34+CD49d+的细胞数和集落形成单位数。结果:与对照组相比,A,B,C,D组均可有效的扩增脐血造血细胞(P0.05),D组能有效的扩增脐血细胞,并优于C组(P0.05),但均优于C组(P<0.05),D组CD34+CXCR4+,CD34+CD62L+和CD34+CD49d+的细胞数扩增倍数优于A,B,C组(P<0.05)。结论:白细胞介素6组+白细胞介素3可协同扩增脐血细胞,并能促进和归巢有关的CD49d,CD62L及趋化因子受体4表达。