摘要：背景:人工电子耳蜗是用来代替病变耳蜗的一种高科技治疗手段,影像学检查可以帮助了解人工耳蜗电极的植入情况。目的:探讨CT及X射线检查对人工电子耳蜗植入术前患者筛选及术后效果评估的价值。设计:自身前后对照观察。单位:南方医科大学附属珠江医院耳鼻咽喉科听力重建病房。对象:选择1999-01/2003-06拟进行人工耳蜗植入术的重度或极重度感音性耳聋患者44例。语前耳聋32例,年龄2.5～12岁;语后耳聋12例,年龄10～42岁。方法:对44例患者均采用颞骨轴位高分辨率CT螺旋扫描及内耳三维重建。患者取仰卧位,两侧对称分别做靶扫描,视野9.6cm,基线与听眶上线平行,轴位容积扫描颞骨。扫描参数:层厚1mm,螺距1.0,间距0.5mm,扫描结束后再行层厚1mm,间距0.1mm内插重建。术后采用常规耳蜗轴位改良的斯氏位X射线摄影,对于怀疑有术后并发症的3例患者,行螺旋CT颞骨容积扫描。主要观察指标:①术前患者内耳结构检查结果。②术后患者内耳和植入电极排列及深度检查结果。结果:按意向处理分析,44例患者均进入结果分析。①术前患者内耳结构检查结果:32例语前聋患者中检出1例2耳Mondini畸形Ⅰ型,2例4耳Mondini畸形Ⅱ型;12例语后聋患者中检出2例4耳慢性化脓性中耳炎,1例2耳内耳骨化,1例2耳耳硬化症,3例6耳大前庭水管综合征。②术后患者内耳和植入电极排列及深度检查结果:X射线片显示,植入的耳蜗电极位于耳蜗之中,呈二维的螺旋状,位于内耳道底。3例术后行CT检查,电极自圆窗植入耳蜗底周。其中1例术后植入电极扭结并感染。结论:①人工耳蜗植入患者术前应用颞骨轴位高分辨率CT螺旋扫描及内耳三维重建可以检出急慢性中耳炎、内耳骨迷路结构的严重畸形。②术后耳蜗位X射摄影片可提供电极的位置、植入的深度以及电极有无扭结或滑脱。CT及耳蜗位摄片检查相互补充,可进行术前病例选择和术后效果评估,有助于最大限度地发挥人工耳蜗改善听力的作用。

摘要：目的构建针对鼻咽癌（nasopharyngeal carcinoma，NPC）EB病毒（Epstein—Barr virus，EBV）潜伏膜蛋白1（latent membrane protein1，LMP-1）的特异性发夹状RNA（small hairpin RNA，shRNA）干扰序列的重组腺相关病毒（recombinant adeno—associated virus，rAAV）载体（rAAV-shRNA—LMP-1），介导其体外表达并鉴定其生物活性。方法设计针对EBV-LMP-1的特异性shRNA干扰序列，采用分子克隆的方法，将干扰序列及U6启动子插入pAAV-2质粒中，采用无需包装辅助病毒的双质粒共转染方法制备rAAV-shRNA-LMP-1，测定其滴度及感染效率，RT-PCR鉴定目的基因的抑制效率。结果以rAAV-EGFP5×10^4v．g（virus genome，病毒基因组数）／细胞转染C666-1细胞，转染效率大干95％，PT—PCR鉴定rAAV-shRNA-LMP-1以5×10^4v．g／细胞转染C666—1后目的基因抑制效率大于90％。结论通过rAAV介导RNA干扰能有效抑制LMP-1基因表达，为进-步研究肿瘤基因治疗，尤其是动物实验奠定了基础。

摘要：该文探讨circCALN1(circular RNA calneuron 1)在鼻咽癌中的表达及调控分子机制。运用生物信息软件预测circCALN1调控的miRNA及miRNA调控的靶基因;运用RT-PCR检测鼻咽癌组织及细胞株中的基因表达水平;常规培养鼻咽癌细胞株(CNE1、HNE1、SUNE-1、5-8F、6-10B),鼻咽永久上皮分化细胞株NP69,人肾小管上皮细胞株293T;设计针对circRCALN1接头处的及BCL-2的siRNA序列,运用脂质体转染细胞株;Transwell检测细胞侵袭能力;MTT检测细胞增殖抑制率;Western blot检测蛋白的相对表达水平;构建双荧光报告基因载体验证基因之间的结合作用。circCALN1、BCL-2在鼻咽癌组织及细胞株的相对表达水平上调,而miR-143-3p表达水平下调;其中,在CNE1、HNE1、SUNE-1、5-8F细胞株中,circCALN1、BCL-2在CNE1细胞株的表达水平最高,而miR-143-3p在CNE1细胞株的表达水平最低;有效降低circCALN1、BCL-2在鼻咽癌细胞株CNE1的表达水平24、48、72 h之后,抑制率分别为(16.3±1.65)%、(29.6±2.6)%、(63±3.6)%;(26.3±2.9)%、(32.6±3.8)%、(59.6±3.9)%;过表达miR-143-3p 24、48、72 h之后,抑制率为(9.6±3.6)%、(13.6±5.6)%、(36.8±2.3)%;过表达miR-143-3p及降低circCALN1、BCL-2的表达,其侵袭细胞个数分别为185±13、200±15、183±18;生物信息学结果提示:miR-143-3p与circCALN1存在结合位点,miR-143-3p与BCL-2存在结合位点。circCALN1、BCL-2-3?UTR双荧光报告基因载体质粒与miR-143-3p mimics共转梁293T细胞,荧光活性降低。降低circCALN1的表达促进miR-143-3p的表达上调,而BCL-2的表达下调。circCALN1/miR-143-3p/BCL-2调控轴影响了鼻咽癌细胞的增殖与侵袭。

摘要：目的探讨circCALN1(circular RNA calneuron 1)在鼻咽癌组织及细胞株中的相对表达水平与对鼻咽癌细胞株增殖及侵袭的影响,进一步探讨潜在的分子机制。方法运用RT-PCR检测鼻咽癌组织及细胞株中的circCALN1相对表达水平;常规培养鼻咽癌细胞株(CNE1、HNE1、SUNE-1、5-8F、6-10B、NP69、293T);设计针对circCALN1接头处的siRNA序列;运用脂质体转染细胞株;Transwell检测细胞侵袭能力;运用生物信息学软件预测circCALN1结合的miRNA;构建双荧光报告基因载体验证基因之间的结合作用。结果circCALN1在鼻咽癌组织及细胞株的相对表达水平上调。有效降低circCALN1在鼻咽癌细胞株的表达水平之后,能有效抑制CNE1细胞株增殖与侵袭,其抑制率分别为:24 h(15.2±0.9)%、48 h(27.3±2.3)%、72 h(56.7±3.9)%;其侵袭细胞个数为(65±6.9)。生物信息学结果提示:miR-143-3p与circCALN1存在结合位点。circCALN1双荧光报告基因载体与miR-143-3p mimics共转梁293T细胞,荧光活性降低。降低circCALN1的表达促进miR-143-3p的表达上调。结论circCALN1负性调控miR-143-3p的表达影响鼻咽癌细胞增殖与侵袭。