摘要：背景：采用多种人工合成材料构建的组织工程皮肤，存在着创面愈合后不耐受摩擦、瘢痕增生及挛缩严重、缺乏皮肤附件等不足。而表皮干细胞尽管在体内可无限增殖分化以维持皮肤更新，但在体外普通培养条件下易发生终末分化。目的：为获得稳定生长的鼠表皮干细胞，拟建立或完善能够调控其增殖分化的体外培养体系。设计、时间及地点：细胞观察，于2007—05／11在广州市创伤外科研究所完成。材料：清洁级1～3d龄Wistar大鼠20只用于制备表皮干细胞。方法：采用两步酶消化法获得单个表皮细胞悬液，Ⅳ型胶原快速贴壁法分选贴壁细胞，加入含胎牛血清、0．05mmol／LCaCl2及表皮细胞生长因子、腺苷、胰岛素、氢化可的松、霍乱毒素等复合的DMEM培养基进行培养，原代分离细胞时胎牛血清体积分数为0．2以维持细胞活性，第2次换液时改为0．1。主要观察指标：光镜下观察细胞生长情况，免疫组化法检测目的细胞角蛋白19和P63整合素的表达，流式细胞仪检测01整合素和CD71的表达，通过细胞周期及生长曲线观察其增殖能力。结果：①Ⅳ型胶原筛选的细胞在复合DMEM培养基中生长良好，细胞活性〉98％，培养6d后形成含100～200个细胞的大克隆，呈鹅卵石样铺满瓶底。②角蛋白19和P63均呈阳性表达，β1整合素表达率为98.57％，CD71表达率为9．05％。③94．99％细胞处于GdG，期，细胞呈指数增长。结论：两步酶消化＋Ⅳ型胶原快速黏附法可成功分选稳定生长的鼠表皮干细胞。含霍乱毒素、腺苷、胰岛素等因子的复合DMEM培养基可维持表皮干细胞的增殖能力，其中合适的血清浓度及Ca^2＋浓度至关重要。

摘要：背景:治疗后交叉韧带胫骨附着点撕脱骨折的最佳手术技术仍值得商榷。随着关节镜手术的应用与成熟,它在后交叉韧带胫骨附着点撕脱骨折的诊疗中有很大前景。目的:综述关节镜技术在后交叉韧带胫骨附着点撕脱骨折治疗中的应用与进展,包括不同关节镜治疗方法、手术入路、胫骨隧道设计、缝合材料选择以及内固定植入物选择等。方法:通过计算机对中国知网、PubMed、Web of Science及ScienceDirect等数据库中的相关文献进行检索,检索时间为2003年1月至2023年11月,中文检索词为“后交叉韧带,后十字韧带,撕脱骨折,关节镜”;英文检索词为“posterior cruciate ligament,avulsion,fracture,tibia,arthroscopic,operation,fixation,treatment”。共纳入97篇文献进行综述。结果与结论:关节镜技术提供了一种可靠的治疗方式来治疗后交叉韧带胫骨附着点撕脱骨折。根据入路、缝合材料类型以及用于缝合的入路和胫骨隧道数量等不同,关节镜技术可以分为关节镜下缝线固定结合自体移植物增强重建、关节镜下多交叉带缝合桥固定、关节镜下高强度缝线固定以及关节镜下直接前后缝合悬吊固定等几类。在各种研究中,常用的临床结果评估指标包括关节活动度、Lysholm评分、国际膝关节文献委员会评分及KT-2000关节测量仪差等,研究显示关节镜手术后末次随访时上述指标检测结果较术前显著改善,影像学随访结果显示关节镜手术都取得了令人满意的结果。在随访过程中,接受关节镜技术治疗后的各类交叉韧带胫骨附着点撕脱骨折患者都未出现严重并发症,例如创伤性关节炎、神经血管损伤、围手术期伤口感染、血栓形成以及骨折不愈合等。

摘要：目的探讨沉默Smad泛素化调节因子2（Smurf2）基因对人增生性瘢痕Fb分泌TGF－β1、α平滑肌肌动蛋白（α－SMA）、Ⅰ型胶原的影响。 方法取9例烧伤后增生性瘢痕患者的正常皮肤组织和瘢痕组织，用组织块法培养人正常皮肤Fb和增生性瘢痕Fb，将2种第3代Fb均按随机数字表法分成6组，每组9孔。空白对照组，不加任何小干扰RNA培养72 h；阴性对照组，转染非靶向的小干扰RNA培养72 h；Smurf2小干扰RNA转染组，转染100 nmol/L的Smurf2小干扰RNA培养72 h；空白对照＋TGF－β1组，不加任何小干扰RNA培养72 h后加入10 ng/mL TGF－β1刺激6 h；阴性对照＋TGF－β1组，转染非靶向的小干扰RNA培养72 h后加入10 ng/mL TGF－β1刺激6 h；Smurf2小干扰RNA转染＋TGF－β1组，转染Smurf2小干扰RNA培养72 h后加入10 ng/mL TGF－β1刺激6 h。（1）分别采用蛋白质印迹法、RT－PCR法检测2种细胞空白对照组、阴性对照组、Smurf2小干扰RNA转染组Smurf2的蛋白和mRNA表达。（2）采用ELISA法检测2种细胞空白对照组和Smurf2小干扰RNA转染组细胞培养上清液中TGF－β1含量。（3）采用蛋白质印迹法检测2种细胞6组α－SMA的蛋白表达，ELISA法检测2种细胞6组细胞培养上清液中Ⅰ型胶原含量。（4）采用RT－PCR法检测2种细胞6组α－SMA和Ⅰ型胶原的mRNA表达。以上实验中各组样本数均为9。对数据行析因设计方差分析、Bonferroni法检验。 结果（1）2种细胞Smurf2小干扰RNA转染组中Smurf2的蛋白和mRNA表达量均明显低于空白对照组和阴性对照组（P值均小于0.05），空白对照组和阴性对照组中Smurf2的蛋白和mRNA表达量均相近（P值均大于0.05）。（2）增生性瘢痕Fb空白对照组和Smurf2小干扰RNA转染组细胞培养上清液中TGF－β1含量分别为（4.34±0.56）、（2.14±0.28）pg/mL，均明显高于正常皮肤Fb的（1.52±0.20）、（1.41±0.18）pg/mL（P值均小于0.05）。增生性瘢痕Fb中，Smurf2小干扰RNA转染组细胞培养上清液中TGF－β1含量明显低于空白对照组（P〈0.05）；正常皮肤Fb中，Smurf2小干扰RNA转染组细胞培养上清液中TGF－β1含量与空白对照组相近（P〉0.05）。（3）2种细胞空白对照＋TGF－β1组α－SMA蛋白表达量和细胞培养上清液中Ⅰ型胶原含量均明显高于空白对照组（P值均小于0.05），阴性对照＋TGF－β1组α－SMA蛋白表达量和细胞培养上清液中Ⅰ型胶原含量均明显高于阴性对照组（P值均小于0.05），Smurf2小干扰RNA转染组α－SMA蛋白表达量和细胞培养上清液中Ⅰ型胶原含量均与空白对照组和阴性对照组相近（P值均大于0.05），Smurf2小干扰RNA转染＋TGF－β1组α－SMA蛋白表达量和细胞培养上清液中Ⅰ型胶原含量均明显低于空白对照＋TGF－β1组和阴性对照＋TGF－β1组（P值均小于0.05）。（4）2种细胞空白对照＋TGF－β1组α－SMA和Ⅰ型胶原的mRNA表达量均明显高于空白对照组（P值均小于0.05），阴性对照＋TGF－β1组α－SMA和Ⅰ型胶原的mRNA表达量均明显高于阴性对照组（P值均小于0.05），Smurf2小干扰RNA转染组α－SMA和Ⅰ型胶原的mRNA表达量均与空白对照组和阴性对照组相近（P值均大于0.05），Smurf2小干扰RNA转染＋TGF－β1组α－SMA和Ⅰ型胶原的mRNA表达量均明显低于空白对照＋TGF－β1组和阴性对照＋TGF－β1组（P值均小于0.05）。 结论沉默人增生性瘢痕Fb中Smurf2基因，可减少TGF－β1的自分泌及抑制TGF－β1诱导的α－SMA表达和Ⅰ型胶原合成。

摘要：临床应用以胫后动脉为主轴的小腿内侧皮瓣15例,分别以岛状移转,交腿移转和吻合血管的游离移植等方式,修复四肢软组织缺损,取得满意疗效。文中介绍和讨论了该皮瓣的手术适应证、设计和操作方法。

摘要：作者参考Ｇａｍｍａ钉有关资料，根据中国人体形特点，制成适合国人使用的加锁髓内钉及其手术器械，治疗股骨转子骨折５３例。５２例患者术后随访１～３．５年，骨折全部愈合。生物力学试验结果显示，加锁髓内钉的抗压缩和抗弯曲强度都远超过人体股骨的强度。作者认为，加锁髓内钉是按照人体股骨近段的解剖特点和生物力学原理设计的，可将股骨头承受的各种应力以最佳方式分解和传递。其髓内棒上、下端均有螺丝钉交锁，可防止骨折段的各种移位和髓内棒的旋转、下沉，起静力性交锁固定作用。适用于各类型股骨转子骨折。

摘要：目的探讨整合素连接激酶（ILK）信号通路在糖尿病大鼠皮肤病变及创面愈合中的作用。方法将36只SD大鼠按随机数字表法分为糖尿病组和非糖尿病组，每组18只。糖尿病组大鼠腹腔注射10g／L链脲佐菌素（60mg／kg），非糖尿病组大鼠腹腔注射等量的柠檬酸钠缓冲液。糖尿病组大鼠建模成功2周后，切除2组大鼠背部两侧2处2cm×2cm的全层皮肤致伤。伤后第1、3、7、10、14、21天，2组各取3只大鼠，对创面进行拍照观察并计算创面愈合率。2组剩余15只大鼠于伤后第3、7、10、14、21天各取3只，切取背部的未致伤皮肤组织和创面中心组织。HE染色观察未致伤皮肤组织形态，测量全层皮肤和表皮的厚度；实时荧光定量RT—PCR法检测未致伤皮肤组织ILK、蛋白激酶B（Akt）和糖原合成酶激酶3p（GSK-3β）的mRNA表达；蛋白质印迹法检测未致伤皮肤组织ILK、Akt、磷酸化Akt、GSK-3β、磷酸化GSK-3β和创面组织ILK、磷酸化Akt的蛋白表达。对数据行两独立样本t检验、单因素方差分析、SNK检验和析因设计方差分析。结果（1）伤后，非糖尿病组大鼠创面痂皮干燥，脱落后见鲜红色肉芽组织，无分泌物，创面愈合速度快；糖尿病组大鼠创面痂皮下有分泌物，易脱落，脱落后见粉红色肉芽组织，有较多分泌物，创面愈合缓慢。除伤后第3天外，伤后各时相点糖尿病组大鼠的创面愈合率明显低于非糖尿病组（t值为3．858～13．738，P〈0．05或P〈0．01）。（2）伤后第3天，非糖尿病组大鼠的未致伤皮肤组织皮下毛囊和血管组织丰富，表皮由复层细胞如基底细胞和KC构成；糖尿病组大鼠的未致伤皮肤组织皮下毛囊和血管组织稀少，表皮几乎只有单层细胞。伤后3～21d，非糖尿病组大鼠未致伤皮肤组织全层皮肤和表皮的厚度无明显变化，糖尿病组大鼠未致伤皮肤组织全层皮肤和表皮的厚度分别由伤后第3天的（1074±66）、（15．1±3．8）汕m逐渐变薄至伤后第21天的（785±122）、（9．7±2．1）μm。伤后各时相点，非糖尿病组大鼠的未致伤皮肤组织全层皮肤和表皮厚度均明显厚于糖尿病组（t值为4．620～23．549，P值均小于0．001）。（3）伤后3—21d，糖尿病组大鼠未致伤皮肤组织中ILK和Akt的mRNA表达量明显低于非糖尿病组（t值分别为d．779、3．440，P值均小于0．05）；2组大鼠未致伤皮肤组织中GSK-3βmRNA表达量相近（t：0．363，P〉0．05）。（4）伤后3～21d，糖尿病组大鼠未致伤皮肤组织中ILK、Akt和磷酸化Akt蛋白的表达量均明显低于非糖尿病组（t值为2．630～6．209，P〈0．05或P〈0．01）；2组大鼠未致伤皮肤组织中GSK-3β蛋白的表达量相近（t=0．652，P〉0．05）；糖尿病组大鼠未致伤皮肤组织中磷酸化GSK-3β蛋白的表达量明显高于非糖尿病组（t=4．131，P〈0．001）。2组大鼠伤后各时相点创面组织中ILK蛋白的表达量相近（t值为0．381～2．440，P值均大于0．05）。除伤后第3天外，非糖尿病组大鼠伤后各时相点创面组织中磷酸化Akt蛋白的表达量均明显高于糖尿病组（t值为4．091～20．555，P〈0．05或P〈0．01）。伤后3～21d，非糖尿病组大鼠创面组织与未致伤皮肤组织中ILK蛋白表达量相近（F=2．522，P〉0．05），创面组织中磷酸化Akt蛋白表达量明显增高（F=117．329，P〈0．001）；糖尿病组大鼠创面组织与未致伤皮肤组织中ILK蛋白表达量相近（F=1．337，P〉0．05），创面组织中磷酸化Akt蛋白表达量明显增高（F=184．120，P〈0．001）。结论糖尿病皮肤病变可能与ILK信号通路中ILK、Akt和磷酸化Akt的表达下降有关，糖尿病大鼠创面愈合缓慢可能与磷酸化Akt的表达下降有关。

摘要：目的:探讨前列腺癌微环境中癌相关成纤维细胞(carcinorna-associated fibroblasts,CAFs)对非雄激素依赖性前列腺癌细胞株Du-145生物学行为的影响。方法:原代培养前列腺癌CAFs并制备CAFs条件培养基(CAFs-CM),通过增殖实验、平板集落形成实验、侵袭实验等体外实验,观察CAFs对前列腺癌细胞生物学行为的影响。结果:由从人新鲜前列腺癌组织中分离培养CAFs制备的CAFs-CM剂量依赖性地提高了Du-145细胞的增殖能力,与SFM相比,0.5 g/L的CAFs-CM明显增强了Du-145细胞的增殖能力,两者比较差异有统计学意义[(290.6±25.2)vs(88.4±12.1),P<0.05],其细胞增殖指数Ki-67明显提高(80%vs 20%);在CAFs-CM中培养的Du-145细胞与在DMEM中培养的细胞相比,其平板形成集落的能力明显提高,差异有统计学意义[(0.42±0.09)vs(0.23±0.03),P<0.05];在CAFs-CM中培养的前列腺癌Du-145细胞的变形迁徙破坏能力比在DMEM中培养的Du-145细胞明显增强[(162.12±9.13)vs(112.34±8.45),P<0.01]。结论:前列腺癌间质微环境中的CAFs促进了前列腺癌细胞的浸润与转移,是抗前列腺癌治疗药物设计的新靶点。

摘要：目的通过神经心理学指标、事件相关电位P300测定,系统评价往事回忆,现实定向和再激发的3R疗法对延缓阿尔茨海默病(AD)患者认知功能减退的效果。方法采用实验型研究设计,选择AD患者34例,进行神经心理学指标(MMSE、ADAS-cog、FAQ、NPI)、P300的基线评定,然后随机分组,对照组给予常规治疗,治疗组在常规治疗基础上采用3R疗法进行认知功能训练。在开始实施训练后的第3个月、第6个月时,分别对治疗组和对照组的患者进行各项指标的评定与分析。结果 3R治疗组生活能力显著提高(P<0.01);社会活动能力提高(P<0.05);P300潜伏期缩短,波幅增加(P<0.01)。结论 3R疗法能有效提高AD患者生活自理能力、社会活动能力,延缓认知功能减退。

摘要：目的设计一种血液透析治疗辅助回血管路,以减少血液损失。方法2017年1月至2018年12月,便利抽样法选取35例管路凝血的患者为研究对象。按时间先后将其分成两组,其中一组19例使用辅助管路回血,另一组16例采用更换静脉管路回血。统计两组的回血成功率。结果使用辅助管路回血组成功率(73.69%)高于更换静脉管路回血组(31.25%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论血液透析治疗辅助回血管路能提高凝血后回血的成功率,减少患者血液丢失。

摘要：目的探讨E3连接酶神经调节素受体降解蛋白1(neuregulin receptor degradation protein 1,Nrdp1)调控巨噬细胞极化对成纤维细胞功能的影响。方法分别以内毒素(lipopolysaccharide, LPS)和γ干扰素(interferon-γ,IFN-γ)混合剂、白细胞介素13(interleukin-13,IL-13)诱导小鼠原代腹腔巨噬细胞为M1型巨噬细胞(简称M1)和M2型巨噬细胞(简称M2);流式细胞仪、Western blot分别检测M1表面标记蛋白CD11c、特异性分泌物——诱导型一氧化氮合酶(induciblenitricoxide synthase, iNOS)及M2表面标记蛋白CD206、特异性分泌物——精氨酸酶1(arginine1,Arg1)的表达。转染siRNA-Nrdp1 24 h, Western blot检测Nrdp1表达;建立巨噬细胞与成纤维细胞的Transwell共培养体系,按添加的诱导剂不同,分为LPS组(LPS及IFN-γ共同诱导)、LPS-NC组(siRNA阴性Nrdp1无关序列对照组)、LPS-siRNA-Nrdp1组(转染siRNA-Nrdp1质粒)及对应的IL-13组、IL-13-NC组、IL-13-siRNA-Nrdp1组;培养8、12、24 h, CCK-8检测成纤维细胞增殖情况,ELISA检测转化生长因子β1(transforming growth factor-beta1, TGF-β1)、Ⅰ型前胶原含量。对数据行析因设计方差分析、Bonferroni法检验。结果 LPS诱导的巨噬细胞中,M1表面标记蛋白CD11c阳性细胞比例显著高于对照组(P<0.05);IL-13诱导的巨噬细胞中,M2表面标记蛋白CD206阳性细胞比例显著高于未诱导组(P<0.05);LPS组M1特异性分泌物iNOS表达量显著高于对照组(P<0.01)及IL-13组(P<0.01);IL-13组M2型特异性分泌物Arg1显著高于对照组及LPS组(P<0.01)。siRNA-Nrdp1干扰巨噬细胞24 h后,Western blot检测结果显示,干扰组(siRNA-Nrdp1组)Nrdp1的蛋白表达量明显低于空白对照组(P<0.01)及阴性对照组(P<0.01)。共培养24 h后,CCK-8检测结果显示,IL-13-siRNA-Nrdp1组成纤维细胞增殖数量明显低于IL-13组及IL-13-NC组(P<0.01);ELISA检测结果显示,IL-13-siRNA-Nrdp1组TGF-β1含量明显低于IL-13组及IL-13-NC组(P<0.01),IL-13-siRNA-Nrdp1组Ⅰ型前胶原含量明显低于IL-13组(P<0.01)。结论通过siRNA干扰Nrdp1合成,影响巨噬细胞向M2型极化,可抑制M2型巨噬细胞与成纤维细胞共培养体系中成纤维细胞的增殖,减少共培养体系中成纤维细胞TGF-β1及Ⅰ型前胶原的分泌。