摘要：目的探讨沉默Smad泛素化调节因子2（Smurf2）基因对人增生性瘢痕Fb分泌TGF－β1、α平滑肌肌动蛋白（α－SMA）、Ⅰ型胶原的影响。 方法取9例烧伤后增生性瘢痕患者的正常皮肤组织和瘢痕组织，用组织块法培养人正常皮肤Fb和增生性瘢痕Fb，将2种第3代Fb均按随机数字表法分成6组，每组9孔。空白对照组，不加任何小干扰RNA培养72 h；阴性对照组，转染非靶向的小干扰RNA培养72 h；Smurf2小干扰RNA转染组，转染100 nmol/L的Smurf2小干扰RNA培养72 h；空白对照＋TGF－β1组，不加任何小干扰RNA培养72 h后加入10 ng/mL TGF－β1刺激6 h；阴性对照＋TGF－β1组，转染非靶向的小干扰RNA培养72 h后加入10 ng/mL TGF－β1刺激6 h；Smurf2小干扰RNA转染＋TGF－β1组，转染Smurf2小干扰RNA培养72 h后加入10 ng/mL TGF－β1刺激6 h。（1）分别采用蛋白质印迹法、RT－PCR法检测2种细胞空白对照组、阴性对照组、Smurf2小干扰RNA转染组Smurf2的蛋白和mRNA表达。（2）采用ELISA法检测2种细胞空白对照组和Smurf2小干扰RNA转染组细胞培养上清液中TGF－β1含量。（3）采用蛋白质印迹法检测2种细胞6组α－SMA的蛋白表达，ELISA法检测2种细胞6组细胞培养上清液中Ⅰ型胶原含量。（4）采用RT－PCR法检测2种细胞6组α－SMA和Ⅰ型胶原的mRNA表达。以上实验中各组样本数均为9。对数据行析因设计方差分析、Bonferroni法检验。 结果（1）2种细胞Smurf2小干扰RNA转染组中Smurf2的蛋白和mRNA表达量均明显低于空白对照组和阴性对照组（P值均小于0.05），空白对照组和阴性对照组中Smurf2的蛋白和mRNA表达量均相近（P值均大于0.05）。（2）增生性瘢痕Fb空白对照组和Smurf2小干扰RNA转染组细胞培养上清液中TGF－β1含量分别为（4.34±0.56）、（2.14±0.28）pg/mL，均明显高于正常皮肤Fb的（1.52±0.20）、（1.41±0.18）pg/mL（P值均小于0.05）。增生性瘢痕Fb中，Smurf2小干扰RNA转染组细胞培养上清液中TGF－β1含量明显低于空白对照组（P〈0.05）；正常皮肤Fb中，Smurf2小干扰RNA转染组细胞培养上清液中TGF－β1含量与空白对照组相近（P〉0.05）。（3）2种细胞空白对照＋TGF－β1组α－SMA蛋白表达量和细胞培养上清液中Ⅰ型胶原含量均明显高于空白对照组（P值均小于0.05），阴性对照＋TGF－β1组α－SMA蛋白表达量和细胞培养上清液中Ⅰ型胶原含量均明显高于阴性对照组（P值均小于0.05），Smurf2小干扰RNA转染组α－SMA蛋白表达量和细胞培养上清液中Ⅰ型胶原含量均与空白对照组和阴性对照组相近（P值均大于0.05），Smurf2小干扰RNA转染＋TGF－β1组α－SMA蛋白表达量和细胞培养上清液中Ⅰ型胶原含量均明显低于空白对照＋TGF－β1组和阴性对照＋TGF－β1组（P值均小于0.05）。（4）2种细胞空白对照＋TGF－β1组α－SMA和Ⅰ型胶原的mRNA表达量均明显高于空白对照组（P值均小于0.05），阴性对照＋TGF－β1组α－SMA和Ⅰ型胶原的mRNA表达量均明显高于阴性对照组（P值均小于0.05），Smurf2小干扰RNA转染组α－SMA和Ⅰ型胶原的mRNA表达量均与空白对照组和阴性对照组相近（P值均大于0.05），Smurf2小干扰RNA转染＋TGF－β1组α－SMA和Ⅰ型胶原的mRNA表达量均明显低于空白对照＋TGF－β1组和阴性对照＋TGF－β1组（P值均小于0.05）。 结论沉默人增生性瘢痕Fb中Smurf2基因，可减少TGF－β1的自分泌及抑制TGF－β1诱导的α－SMA表达和Ⅰ型胶原合成。

摘要：目的探讨整合素连接激酶（ILK）信号通路在糖尿病大鼠皮肤病变及创面愈合中的作用。方法将36只SD大鼠按随机数字表法分为糖尿病组和非糖尿病组，每组18只。糖尿病组大鼠腹腔注射10g／L链脲佐菌素（60mg／kg），非糖尿病组大鼠腹腔注射等量的柠檬酸钠缓冲液。糖尿病组大鼠建模成功2周后，切除2组大鼠背部两侧2处2cm×2cm的全层皮肤致伤。伤后第1、3、7、10、14、21天，2组各取3只大鼠，对创面进行拍照观察并计算创面愈合率。2组剩余15只大鼠于伤后第3、7、10、14、21天各取3只，切取背部的未致伤皮肤组织和创面中心组织。HE染色观察未致伤皮肤组织形态，测量全层皮肤和表皮的厚度；实时荧光定量RT—PCR法检测未致伤皮肤组织ILK、蛋白激酶B（Akt）和糖原合成酶激酶3p（GSK-3β）的mRNA表达；蛋白质印迹法检测未致伤皮肤组织ILK、Akt、磷酸化Akt、GSK-3β、磷酸化GSK-3β和创面组织ILK、磷酸化Akt的蛋白表达。对数据行两独立样本t检验、单因素方差分析、SNK检验和析因设计方差分析。结果（1）伤后，非糖尿病组大鼠创面痂皮干燥，脱落后见鲜红色肉芽组织，无分泌物，创面愈合速度快；糖尿病组大鼠创面痂皮下有分泌物，易脱落，脱落后见粉红色肉芽组织，有较多分泌物，创面愈合缓慢。除伤后第3天外，伤后各时相点糖尿病组大鼠的创面愈合率明显低于非糖尿病组（t值为3．858～13．738，P〈0．05或P〈0．01）。（2）伤后第3天，非糖尿病组大鼠的未致伤皮肤组织皮下毛囊和血管组织丰富，表皮由复层细胞如基底细胞和KC构成；糖尿病组大鼠的未致伤皮肤组织皮下毛囊和血管组织稀少，表皮几乎只有单层细胞。伤后3～21d，非糖尿病组大鼠未致伤皮肤组织全层皮肤和表皮的厚度无明显变化，糖尿病组大鼠未致伤皮肤组织全层皮肤和表皮的厚度分别由伤后第3天的（1074±66）、（15．1±3．8）汕m逐渐变薄至伤后第21天的（785±122）、（9．7±2．1）μm。伤后各时相点，非糖尿病组大鼠的未致伤皮肤组织全层皮肤和表皮厚度均明显厚于糖尿病组（t值为4．620～23．549，P值均小于0．001）。（3）伤后3—21d，糖尿病组大鼠未致伤皮肤组织中ILK和Akt的mRNA表达量明显低于非糖尿病组（t值分别为d．779、3．440，P值均小于0．05）；2组大鼠未致伤皮肤组织中GSK-3βmRNA表达量相近（t：0．363，P〉0．05）。（4）伤后3～21d，糖尿病组大鼠未致伤皮肤组织中ILK、Akt和磷酸化Akt蛋白的表达量均明显低于非糖尿病组（t值为2．630～6．209，P〈0．05或P〈0．01）；2组大鼠未致伤皮肤组织中GSK-3β蛋白的表达量相近（t=0．652，P〉0．05）；糖尿病组大鼠未致伤皮肤组织中磷酸化GSK-3β蛋白的表达量明显高于非糖尿病组（t=4．131，P〈0．001）。2组大鼠伤后各时相点创面组织中ILK蛋白的表达量相近（t值为0．381～2．440，P值均大于0．05）。除伤后第3天外，非糖尿病组大鼠伤后各时相点创面组织中磷酸化Akt蛋白的表达量均明显高于糖尿病组（t值为4．091～20．555，P〈0．05或P〈0．01）。伤后3～21d，非糖尿病组大鼠创面组织与未致伤皮肤组织中ILK蛋白表达量相近（F=2．522，P〉0．05），创面组织中磷酸化Akt蛋白表达量明显增高（F=117．329，P〈0．001）；糖尿病组大鼠创面组织与未致伤皮肤组织中ILK蛋白表达量相近（F=1．337，P〉0．05），创面组织中磷酸化Akt蛋白表达量明显增高（F=184．120，P〈0．001）。结论糖尿病皮肤病变可能与ILK信号通路中ILK、Akt和磷酸化Akt的表达下降有关，糖尿病大鼠创面愈合缓慢可能与磷酸化Akt的表达下降有关。

摘要：目的探讨E3连接酶神经调节素受体降解蛋白1(neuregulin receptor degradation protein 1,Nrdp1)调控巨噬细胞极化对成纤维细胞功能的影响。方法分别以内毒素(lipopolysaccharide, LPS)和γ干扰素(interferon-γ,IFN-γ)混合剂、白细胞介素13(interleukin-13,IL-13)诱导小鼠原代腹腔巨噬细胞为M1型巨噬细胞(简称M1)和M2型巨噬细胞(简称M2);流式细胞仪、Western blot分别检测M1表面标记蛋白CD11c、特异性分泌物——诱导型一氧化氮合酶(induciblenitricoxide synthase, iNOS)及M2表面标记蛋白CD206、特异性分泌物——精氨酸酶1(arginine1,Arg1)的表达。转染siRNA-Nrdp1 24 h, Western blot检测Nrdp1表达;建立巨噬细胞与成纤维细胞的Transwell共培养体系,按添加的诱导剂不同,分为LPS组(LPS及IFN-γ共同诱导)、LPS-NC组(siRNA阴性Nrdp1无关序列对照组)、LPS-siRNA-Nrdp1组(转染siRNA-Nrdp1质粒)及对应的IL-13组、IL-13-NC组、IL-13-siRNA-Nrdp1组;培养8、12、24 h, CCK-8检测成纤维细胞增殖情况,ELISA检测转化生长因子β1(transforming growth factor-beta1, TGF-β1)、Ⅰ型前胶原含量。对数据行析因设计方差分析、Bonferroni法检验。结果 LPS诱导的巨噬细胞中,M1表面标记蛋白CD11c阳性细胞比例显著高于对照组(P<0.05);IL-13诱导的巨噬细胞中,M2表面标记蛋白CD206阳性细胞比例显著高于未诱导组(P<0.05);LPS组M1特异性分泌物iNOS表达量显著高于对照组(P<0.01)及IL-13组(P<0.01);IL-13组M2型特异性分泌物Arg1显著高于对照组及LPS组(P<0.01)。siRNA-Nrdp1干扰巨噬细胞24 h后,Western blot检测结果显示,干扰组(siRNA-Nrdp1组)Nrdp1的蛋白表达量明显低于空白对照组(P<0.01)及阴性对照组(P<0.01)。共培养24 h后,CCK-8检测结果显示,IL-13-siRNA-Nrdp1组成纤维细胞增殖数量明显低于IL-13组及IL-13-NC组(P<0.01);ELISA检测结果显示,IL-13-siRNA-Nrdp1组TGF-β1含量明显低于IL-13组及IL-13-NC组(P<0.01),IL-13-siRNA-Nrdp1组Ⅰ型前胶原含量明显低于IL-13组(P<0.01)。结论通过siRNA干扰Nrdp1合成,影响巨噬细胞向M2型极化,可抑制M2型巨噬细胞与成纤维细胞共培养体系中成纤维细胞的增殖,减少共培养体系中成纤维细胞TGF-β1及Ⅰ型前胶原的分泌。

摘要：背景:一氧化氮在烧伤创面愈合过程起重要作用,针灸有消炎和免疫调节作用,但其作用机制是否对创面组织一氧化氮的影响有关还不清楚。目的:探讨针刺减轻烧伤创面早期进行性损害的机制。设计:双盲随机对照研究。地点和对象:实验在广州市红十字会医院烧伤整形科完成,对象为22只新西兰大白兔,体质量2.0～2.5kg,雌雄不限,由广东省实验动物中心提供。干预:建立兔深Ⅱ度烧伤模型,针刺双侧足三里穴。采用一氧化碳试剂盒(酶法)测定组织一氧化碳。主要观察指标:创面组织一氧化氮的含量。结果:兔深Ⅱ度烧伤早期组织中一氧化氮含量显著低于正常组织。正常组织,烫伤后1,3,5d创面组织一氧化氮分别为(4.76±1.31),(2.68±0.92),(2.07±0.81),(2.85±1.12)μmol/g。以伤后第3天最低(t=2.382,P<0.05);针刺治疗3d,创面组织一氧化氮为(3.05±1.16)μmol/g,明显提高(t=2.216,P<0.05)。但仍低于正常组(4.76±1.31)μmol/g(t=2.156,P<0.05)。结论:针刺能提高创面组织一氧化氮含量,可能是其减轻组织水肿和烧伤创面早期进行性损害重要因素。

摘要：背景:针刺可促进烧伤创面愈合,但对创面组织胶原代谢的影响尚不清楚。目的:观察针刺对烧伤创面愈合过程中胶原代谢的影响。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于1997-01/2005-12在广州市创伤外科研究所完成。材料:雌性新西兰大白兔27只,体质量2.0～2.5kg,用于制备深Ⅱ度烧伤模型。方法:每个兔背部脊柱两旁造成10个创面。实验分为3组,正常组(n=3):只背部剃毛备用;常规治疗组:伤后自由进食,创面外用25g/L的碘伏暴露;针刺组:在常规治疗的基础上,伤后24h内开始针刺治疗,取双侧"足三里(ST36)"穴,针刺后接电针仪,频率20Hz,时间30min,1次/d。伤后3,7,13,21d常规治疗组和针刺组各取3只动物处死,取组织待测。主要观察指标:各组动物不同时间点创面组织中羟脯氨酸水平。结果:27只大白兔均进入结果分析。烧伤后13d常规治疗组和针刺组创面组织中羟脯氨酸水平均低于正常皮肤组织(P0.05)。而针刺组创面组织中羟脯氨酸水平高于常规治疗组和正常皮肤组织(P<0.05)。结论:针刺可促进烧伤创面胶原的合成。

摘要：目的探讨按亚单位原则使用预扩张皮瓣修复面部瘢痕的临床疗效。方法回顾分析2018年5月至2020年9月收治的8例面部瘢痕患者,其中男性5名,女性3名,年龄6~47岁(平均21岁),瘢痕大小4 cm×7 cm~12 cm×9 cm。根据面部亚单位分区设计,Ⅰ期行头部或颈部扩张器植入术,注水2~3个月(平均2个月),注水完成后Ⅱ期行面部瘢痕切除及扩张皮瓣修复,供瓣区直接拉拢缝合。结果8例扩张皮瓣均成活,切口愈合良好,术后随访6~12个月,扩张皮瓣色泽、质地与面部相似,修复后的形态及功能评分较术前有明显提高(P<0.05)。结论根据亚单位原则设计预扩张皮瓣修复面部瘢痕,形态轮廓及功能可得到良好改善。

摘要：目的：探讨小腿内侧皮瓣在修复足部软组织缺损方面的应用．方法：设计应用小腿内侧逆行筋膜岛状皮瓣修复足部软组织缺损１５例．其中，男１１例，女４例；缺损原因：电烧伤３例，皮肤肿瘤２例，慢性溃疡７例，化学烧伤２例，热压伤１例．结果：１５例病例皮瓣全部成活。足外形、感觉及行走的稳定性均恢复良好。结论：小腿内侧逆行岛状皮瓣与足部皮肤组织类似，血运及神经支配有保证，成活率高；蒂部较长，操作简便；特别适用于足跟及底部软组织缺损的修复。

摘要：背景:转化生长因子-β(TGF-β)是病理性瘢痕形成的重要因素。Smad蛋白家族是近年来发现的TGF-β受体下游信号蛋白。积雪草苷可抑制成纤维细胞增殖及胶原的合成,使瘢痕内的TGF-β表达减少。目的:研究积雪草苷对瘢痕成纤维细胞增殖与磷酸化Smad2和Smad7的作用及机制。设计:以细胞为研究对象,对照、观察性研究。单位:一所大学医院烧伤整形科。对象:实验于2002-04/2003-03在中山大学外科实验室完成。标本取自因增生瘢痕住院进行整形手术的患者6例,男3例,女3例,年龄1～35岁。增生性瘢痕成纤维细胞由本科实验室经原代培养后传代获得。干预:研究分为实验组和对照组,将积雪草苷作用于成纤维细胞为实验组,对照组不加积雪草苷,观察用药前后各指标的改变。主要观察指标:①积雪草苷对磷酸化Smad2和Smad7的影响。②积雪草苷对细胞周期和凋亡的影响。结果:积雪草苷可抑制瘢痕的成纤维细胞从S期进入M期,减少成纤维细胞中磷酸化Smad2的含量,两组差异无显著性意义(t=1.53,P=0.08),细胞中Smad7的含量实验组为(50.80±22.40)%,对照组(32.18±17.84)%,两组的差异有显著性意义(t=2.17,P=0.024)。结论:积雪草苷抑制瘢痕可通过Smad通路发挥作用。

摘要：目的　探讨眼轮匝肌瓣悬吊治疗重度上睑下垂方法的临床效果。方法　做重睑成形术切口 ,于皮肤与眼轮匝肌间向上分离达眉上缘 ,再于眼轮匝肌深面、眶隔浅面向上分离达眶上缘 ;根据睑板宽度及弧度设计眼轮匝肌瓣 ,向下推进固定在睑板前方 ,悬吊上睑。结果　 15例 2 4只眼重度上睑下垂者术后效果均较满意 ,睑缘外形匀称优美 ,眼睑闭合功能良好 ,无并发症。不足之处是 ,向下注视时有上睑停滞现象。结论　眼轮匝肌瓣悬吊手术操作简单 ,手术野显露良好 ,固定牢靠 ,张力适当 ,不易复发 ;无需做额肌纵切口 ,不损伤眶上血管神经束及面神经额支 ,不减弱额肌的收缩力 ,是一种治疗重度上睑下垂可供选择的方法。

摘要：目的探讨阴茎深度烧伤的修复方法。方法本组112例阴茎深度烧伤患者,其中阴茎皮肤部分坏死107例,切除阴茎坏死皮肤后,直接缝合修复或利用阴茎皮肤良好的延展性设计切口将清创创面改形后缝合修复32例,自体大张刃厚皮片移植修复75例。另外5例除阴茎皮肤坏死外,合并部分阴茎坏死3例,部分阴茎坏死并有尿道损伤2例,分别采用髂腹股沟皮瓣修复阴茎及带蒂阴囊纵隔皮瓣重建尿道阴茎部。结果经积极修复,112例患者阴茎的外观(常态与勃起)及功能(排尿与性交)均达到良好的效果。结论阴茎深度烧伤后采用皮片移植、切除缝合及皮瓣覆盖等多种方法修复,均可达到满意的疗效。