摘要：目的利用实时定量PCR(RQ-PCR)检测乳腺癌患者内皮素-2 mRNA(EDN-2)的表达情况。方法选取EDN-2 mRNA特异性序列作为检测靶基因设计引物,用SYBR Green$建立20μl实时定量反应体系,对160份乳腺癌组织和148例正常乳腺组织进行RQ-PCR检测。结果与正常乳腺组织相比,EDN-2 mRNA在乳腺癌组织中表达含量明显升高,与正常乳腺组织之间存在显著性差异(P0.05),只和肿瘤的大小(P<0.05)、是否有淋巴结转移(P<0.01)以及肿瘤病理级别(P<0.01)有关。结论 EDN-2 mRNA在乳腺癌中高度表达,且含量随着肿瘤越大,病理级别越高,淋巴结转移数目越多,其表达量也越高。EDN-2 mRNA的检测可作为乳腺癌的辅助检查,其含量的变化也可作为病情的发展和预后的观察指标,为乳腺癌的诊断与治疗提供新的途径,该检测项目宜在临床工作中得到开展。

摘要：目的:利用聚合酶链式反应(PCR)技术分析广东省中医院喹诺酮耐药鲍曼不动杆菌耐药基因的种类,并进行多基因聚类分析,了解我院鲍曼不动杆菌的流行病学情况。方法:利用Primer Premier5软件设计11对喹诺酮耐药基因,利用PCR技术对52株喹诺酮耐药鲍曼不动杆菌进行分析,并利用Cross Checker和ntsys软件进行多基因聚类分析。结果:PCR扩增结果:52株均有parC基因和parE基因、48株有gyrA基因、40株有gyrB基因、10株有Aac(6′)-Ib基因、1株有qnrA基因,其余未检出;多基因聚类分析显示,主要还是以染色体介导的耐药性基因突变为主。结论:52株鲍曼不动杆菌耐抗菌药物种类广泛,耐药水平高;ICU或许已成为耐药鲍曼不动杆菌传播的一个重要枢纽。

摘要：目的针对编码大肠杆菌志贺毒素由位于STEC染色体上的前噬菌体携带的stx基因和O_(157)抗原编码基因rfbe设计特异性引物,并对反应体系和反应条件进行优化,建立一种针对肠出血性大肠杆菌及其毒素的环介导等温扩增(LAMP)反应技术检测法。方法通过优化LAMP反应的各影响因素,确定LAMP反应体系和反应条件并利用已优化的LAMP体系进行相关检测。结果确定LAMP反应体系为:内引物(FIP、BIP)与外引物(F3、B3)的比例为8:1,Mg^(2+)浓度10 mmol/L,dNTPs浓度1. 2 mmol/L,甜菜碱浓度0. 4 mol/L,Bst DNA聚合酶的添加量为1μl。LAMP反应时间为60 min,反应温度为60。以PCR法作为对照,LAMP检测的敏感度为5×10~1 CFU/mL,PCR的敏感度为5×10~4 CFU/mL。同时,研究应用所建立的LAMP快速检测法对部分革兰阳性和阴性菌及102株O_(157)大肠杆菌进行快速检测。结果显示,检测特异度达100%,O_(157)大肠杆菌rfbe检出率为100%(102/102),stx1检出率为95. 2%(59/62),stx2检出率为92. 9%(52/56)。结论成功建立了一种可应用于肠出血性大肠杆菌及其毒素的敏感、特异的LAMP检测方法。