摘要：为建立番茄褐色皱果病毒(tomato brown rugose fruit virus,ToBRFV)Taq Man荧光定量RT-PCR方法,本研究针对ToBRFV RNA依赖的RNA聚合酶(RNA-dependent RNA polymerase,RdRP)基因序列设计了4组特异性引物和Taq Man探针,构建了标准曲线,并对该方法的特异性、灵敏度和实际样品的检测效率进行评估。结果显示,该方法特异性强,与番茄花叶病毒、番茄斑驳花叶病毒、烟草花叶病毒、黄瓜绿斑驳花叶病毒、番茄环斑病毒、番茄黑环病毒、辣椒轻斑驳病毒、烟草环斑病毒和凤果花叶病毒等9种病毒均无交叉反应。建立的标准曲线的R^(2)为0.999,扩增效率为102.096%,检测灵敏度为10 fg/μL,与EPPO PM 7/146(1)推荐的CaTa28、CSP1325方法相当,是常规RT-PCR的100倍;采用该方法成功从60份番茄和辣椒叶片、种子样品中检出10份阳性样品。建立的Taq Man荧光定量RT-PCR方法特异性强、灵敏度高,适用于实际样品中ToBRFV的快速精准检测。

摘要：南方菜豆花叶病毒及烟草环斑病毒是中国进境植物检疫性有害生物,属于大豆种传病害,为提高在进口大豆中两种病毒的检出率,本研究针对SBMV及TRSV基因组中的保守序列,分别设计特异性DPO引物,建立了一种快速检测这两种植物病毒的双重DPO-RT-PCR方法,并对该方法的特异性、灵敏度及退火温度敏感性等性能进行评价。结果表明:该方法能准确地从10种植物病毒中鉴定出SBMV及TRSV,表现出良好的特异性,且检测灵敏度可达0.02 ng·μL^(-1),退火温度为在45~65℃时该方法检测结果无明显差异,表现出对退火温度不敏感的特性。研究结果为进出境植物病毒的高通量检测提供了新的思路。

摘要：建立快速检测致泻性大肠埃希氏菌的(DEC)方法,根据DEC的uidA(GenBank:JQ068101.1)、bfpB(Sequence:NG_034726.1)、eaeA(GenBank:AJ579305.1)、LT(GenBank:M17873.1)、ST(GenBank:M18346.1)、Stx1(GenBank:FR875155.1)、Stx2(GenBank:AB030484.1)、ipaH(GenBank:JQ638638.1)、aggR(GenBank:Z32523.1)设计引物和探针,建立基于TaqMan探针荧光PCR检测方法。用uidA基因检测所有DEC,A体系4个基因bfpB、eaeA、LT、ST检测EPEC和ETEC,B体系4个基因ipaH、Stx1、Stx2、aggR检测EIEC、STEC和EAEC,两个体系探针的5′端分别标记FAM、VIC、TET和ROX。试验结果表明,两个体系扩增效率89.6%~102.2%,线性相关系数R2在0.965~0.999范围,可准确鉴别出25株DEC型别,而70株非DEC扩增结果阴性。本研究所建立方法的特异性强,可准确检测EPEC、ETEC、EIEC、STEC和EAEC。

摘要：目的研制一种能够用于快速鉴定单核细胞增生李斯特菌(以下简称单增李斯特菌)的质粒DNA标准物质。方法设计一种质粒DNA包含目前常用于单增李斯特菌检测的hlyA、plcB、inlA基因,并对其稳定性、均匀性和量值可追溯性进行评价。评估其在实时定量聚合酶链式反应(PCR)检测中的适用性。结果质粒DNA参考物质的最终定值结果为29.85μg/mL。该质粒DNA参考物质量值可靠,均匀性和稳定性良好,可以在-20℃下保存1年以上。质粒DNA参考品在实时荧光PCR检测中的适用性证明,可以保证实时定量PCR检测结果与单增李斯特菌基因组DNA参考品具有可比性。结论研制的质粒DNA标准物质可以替代单增李斯特菌基因组DNA对单增李斯特菌进行质量监控,满足单增李斯特菌检测在实验室质量的有效控制和试验方法验证的需要。

摘要：为了快速、准确地鉴定番茄斑萎病毒,根据GenBank中韩国的番茄斑萎病毒株系(序列号:KC261961)ssRNA-S基因组编码保守外壳蛋白基因序列设计特异性引物TSWV 5F/5R,建立了番茄斑萎病毒RT-RPA检测方法。特异性检测结果表明,仅番茄斑萎病毒样品扩增出215 bp目标条带,而其他4种病毒样品无扩增出目标条带。灵敏度检测结果表明番茄斑萎病毒RPA检测方法可以达到10-5 cDNA稀释度。

摘要：欧洲议会和理事会于2013年8月2日发布了第(EU)No.813/2013号委员会法规,该法规主要针对空间加热器和组合加热器等空气源能热泵产品提出了能耗、噪音、氮氧化物、颗粒物和碳氢化合物的排放等一系列限制措施。我国是空气源能热泵产品主要生产和出口国,该法规的实施给我国空气源能热泵产品生产和出口企业设置了很大的技术壁垒,为了帮助国内企业全面了解该法规的内容,本文对该法规的核心内容进行解读,希望能够帮助国内企业在应对该法规方面起到一定的积极作用。

摘要：目前我国缺乏口岸致灾因子智能查验装备,高度依赖人工作业,影响样品检验效果,对检验人员的生命安全造成威胁。基于颗粒介质地面力学模型,设计了一款新型螺旋轮式移动机器人,通过实验验证其动力学模型的准确性,在松散环境中具备较好的越障性能。使用机器人操作系统(Robot Operating System 2,ROS2)作为控制平台,搭载多种传感器实现建图、定位、导航及远程可视化等功能。实验表明,设计的移动机器人可以有效实现在松散环境中的复杂运动,为搭载采样、杂质检测等功能性平台的开发提供可行性。

摘要：为建立一种针对马链球菌兽疫亚种(Streptococcus equi subspecies zooepidemicus,SEZ)快速、特异、敏感的检测方法,并了解SEZ在入境我国马匹中的感染情况,试验首先根据SEZ标准菌株(ATCC 43079)的保守基因comB设计合成特异性引物,经PCR扩增后构建pMD19-T-comB重组质粒,以此为标准品模板建立基于SYBR GreenⅠ染料的荧光定量PCR检测方法(quantitative PCR,qPCR);进而利用所建方法对2018―2023年由荷兰、比利时、日本、德国、阿根廷和新西兰等6个国家入境我国口岸的477份马血清样本进行SEZ感染情况的检测分析。结果发现本试验所建立的qPCR检测方法特异性良好,仅对SEZ存在特异性扩增;敏感性试验表明该方法最低检测量为4.58×10^(1)copies/μL;重复性试验检测结果显示批内重复性变异系数均小于0.5%,批间重复性变异系数均低于3.0%,表明重复性良好,稳定性高。回顾性检测分析显示2018年荷兰入境的共40份样本均为阴性(0/40);2019年比利时入境样本中检测到1份阳性(1/20),日本和德国入境样本均为阴性(0/36);2021年日本样本中3份为阳性(3/34),阿根廷1份为阳性(1/20),荷兰均为阴性(0/40);2022年荷兰76份样本均为阴性(0/76);2023年荷兰126份样本检出阳性样本5份(5/126),新西兰88份样本中检出阳性1份(1/88)。总计阳性样本11份,阳性率为2.31%(11/477),总体阳性率较低。结果说明,成功建立了用于检测SEZ的SYBR Green I荧光定量PCR检测方法,其对我国出入境、口岸部门的快速检疫以及该病的流行病学调查等工作提供了必要的技术支撑。

摘要：本文基于电磁兼容性(Electromagnetic Compatibility,EMC)风险评估方法,研究其在电子电气产品的电磁兼容性测试中的应用。由于电子电气产品的多样性,其存在的电磁兼容性问题比较复杂,因此在产品设计时需要加以重视,通过产品设计可解决大多数的电磁兼容性问题。本文通过风险识别,结合测试经验和问题风险程度对各类风险要素予以赋值,得到所有的风险要素并计算出电子电气产品整机风险评估值,从而依据风险评估值评价产品的风险程度,确定风险等级。该方法对于减少研发和认证测试成本,提升企业产品质量具有积极的意义。

摘要：本研究针对引起人呼吸道感染的腺病毒B组(3型、7型、11型、14型、16型、21型、50型、55型)、C组(1型、2型、5型、6型、57型)和E组(4型)设计2组通用型引物探针,建立了主要呼吸道腺病毒荧光定量PCR检测方法,并测试方法的灵敏度、重复性、特异性,同时应用于临床样本测试。结果显示,该方法可特异性检出呼吸道腺病毒,灵敏度约为500 copies/mL;检测12种呼吸道病原体,结果无交叉反应;在66份临床样本的应用性验证中,未见非特异性反应,方法的特异性为100%。研究表明,该方法具有良好的灵敏性和特异性,可用于呼吸道传染病样本腺病毒的快速筛查。