摘要：目的设计并构建排便生理模型。方法依据肠道压力学说，模拟排便生理制作实验模型。采用恒流水泵作为动力源，调节水泵流量改变肠道压力，恒温水浴箱保持装置37℃恒温，贮液室通气口供给5％CO2＋95％空气，使离体肠管保持相对稳定的内环境。实验方法包括模型流体力学测试和人工肛门括约肌注水体积与最大约束压关系测定。结果实验过程中，装置及管道接口未发生脱落、爆裂；水泵流量（137．100±10．279）ml／s时，肠道压力为90mmHg（1mmHg=0．133kPa），实验模型压力变化范围0—90mmHg，人工括约肌注水体积2ml可获得最佳肠管约束压（88．600±10．490）mmHg。结论本实验模型能满足人工肛门括约肌的体外实验研究。

摘要：目的界定人工肛门括约肌工作压力范围。方法观察人工肛门括约肌挤压肠壁时肠壁血流灌注量改变,分析人工肛门括约肌压力与肠壁血流灌注量之间的关系。结果人工肛门括约肌工作压力与肠壁血流灌注量之间密切相关(R2=0.462,P=0.000),括约肌压力达到20mmHg之前,肠壁血流灌注量未发生变化,压力增加至70mmHg时,肠壁血流灌注量减少到基线的49.66%,90mmHg时,血流灌注量减少至基线的30.02%。结论人工肛门括约肌压力在20～70mmHg时,肠壁血流灌注量减少不到1/2,能有效避免肠缺血发生,为人工肛门括约肌整体设计提供了依据。

摘要：目的探讨STAT3基因短发夹RNA(shRNA)表达质粒对结肠癌SW480细胞STAT3基因的干扰作用。方法根据siRNA设计原则,构建靶向STAT3基因的短发夹RNA干扰质粒(pGPU6/GFP/STAT3),使用脂质体法转染人结肠癌细胞系(SW480),通过RT-PCR和Western印迹检测结肠癌SW480细胞STAT3基因mRNA和蛋白表达水平。结果pGPU6/GFP/STAT3重组质粒经限制性内切酶酶切及测序证明基因插入正确。质粒成功转染SW480细胞后,该细胞的STAT3mRNA和蛋白表达明显下降(P<0.05)。结论成功构建靶向STAT3基因的shRNA表达载体,转染SW480细胞,能有效抑制细胞的STAT3mRNA和蛋白表达,为STAT3基因靶向治疗提供前期的实验依据。

摘要：目的:观察抑制Galectin-3表达与BT-549细胞系增殖和凋亡的关系,探讨利用RNA干扰技术作为三阴性乳腺癌基因治疗方法的可行性。方法:设计并化学合成Galectin-3小干扰片段并顺势转染乳腺癌细胞系BT-549(为Galectin-3siRNA组),以未转染细胞为空白对照,以转染阴性干扰为阴性对照,荧光倒置显微镜和实时定量PCR验证干扰结果,XTT方法观察干扰后24、48、72和96h各组细胞增殖吸光度(A值),流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况,划痕实验和Transwell实验比较不同组间细胞迁移和侵袭情况,以上实验均重复3次。结果:空白对照组、阴性对照组和Galectin-3siRNA组Galectin-3mRNA相对含量分别为(0.078±0.003)、(0.069±0.004)和(0.015±0.001),差异有统计学意义,F=486.97,P<0.001。XTT法检测结果显示,同一组不同时间点之间差异有统计学意义,P值均<0.001;同一时间点各组之间差异亦有统计学意义,P值均<0.001。随着时间推移,空白组和阴性对照组细胞继续生长,Galectin-3siRNA组细胞生长抑制,数量逐渐减少,干扰时间和实验分组之间存在交互效应,F=26.43,P<0.001。流式细胞仪检测结果显示,Galectin-3siRNA组、空白对照组和阴性对照组凋亡率分别为(26.83±2.15)%、(2.73±0.18)%和(5.86±0.51)%,差异有统计学意义,F=24 537.92,P<0.001。空白对照组、阴性对照组和Galectin-3siRNA组愈合率分别为(91.47±4.39)%、(82.36±3.68)%和(52.26±1.95)%,差异有统计学意义,F=213.71,P<0.001。转染Galectin-3siRNA的乳腺癌细胞浸润穿过Matrigel膜的细胞数(169.36±23.71)要比空白对照组(480.80±30.80)和阴性对照组(320.70±28.12)的细胞数显著减少,差异有统计学意义,F=115.20,P<0.001。结论:Galectin-3siRNA成功转染入BT-549细胞,并抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡,降低其迁移侵袭能力,为三阴性乳腺癌基因治疗提供实验依据。

摘要：目的研究基于64排螺旋CT扫描数据的三维肝脏虚拟手术的设计和仿真效果，以及基于自由设计模型系统（FreeForm Modeling System）的虚拟手术的可行性。方法采集正常人肝脏64排薄层扫描数据集，利用医学三维重建软件（MIMICS软件）进行肝脏及其肝内血管三维重建，并将重建的肝脏及其管道模型、人工绘制肝脏肿瘤模拟物导入FreeForm Modeling System，利用力反馈设备（PHANTOM），对肝脏模型进行手术切割。结果通过旋转和放大目标物体，肿瘤与肝内血管的立体关系能清晰展示。根据手术原则，使用PHANTOM操纵“手术刀”，仿真左外叶切除，术中肝内管道结构容易识别，其过程基本符合临床肝脏肿瘤切除的手术过程并可调节目标物体的强度，感受切割时力反馈的大小。结论利用FreeForm Modeling System虚拟手术系统仿真肝脏手术切割，可以制定合理的个体化手术方案，减少并发症发生，提高手术成功率。

摘要：背景:作者先前已成功建立小动物移植模型,并验证了受者经供体凋亡细胞预处理后能够诱导免疫耐受。目的:验证60Coγ射线体外处理后的供者淋巴细胞预输注诱导猪肝移植特异性免疫耐受的可能性,为不作常规免疫抑制处理成年大动物的移植免疫耐受诱导提供可行的途径。设计、时间及地点:于2004-06/2007-02在南方医科大学南方医院动物研究所完成随机对照动物实验。材料:版纳小型猪16只为供体组,西藏小型猪16只为受体组,五六月龄,体质量15～17kg,雌雄不拘,共行原位肝移植手术16只次。方法:将受体猪按随机数字表法分为2组(n=8),空白对照组受体猪无特殊处理;供体淋巴细胞预处理组受体猪在术前7d经耳静脉注射60Coγ射线处理过的供体淋巴细胞。主要观察指标:应用AnnexinV/PI双标法检测60Coγ射线处理后的淋巴细胞凋亡率,并与正常淋巴细胞进行对照。观察两组受体猪移植术后的存活时间,术后检测肝功能指标及肝脏病理变化。结果:成功建立非转流小型猪原位肝移植模型16例。①60Coγ射线体外处理后的淋巴细胞凋亡率明显高于正常淋巴细胞(P0.05)。结论:60Coγ射线体外照射可以诱导淋巴细胞凋亡,60Coγ射线体外处理过的淋巴细胞预输注未能够诱导小型猪同种异体肝移植特异性免疫耐受。

摘要：目的探讨个体化仿真手术在肝血管瘤外科手术中的应用价值。方法利用1例肝血管瘤患者64排螺旋CT扫描数据集，在自主开发的图像处理软件对图像进行分割及三维重建，将重建模型导入到FreeForm Modeling System进行修饰和平滑。使用系统的力反馈设备PHANToM进行肝血管瘤术前仿真手术研究，选择适合本例患者的手术方式。结果重建的肝脏、肝内管道系统、血管瘤模型形态逼真，立体感强；各管道系统的分布、走行以及相互关系明晰；在建立的仿真手术系统的仿真环境中，使用“仿真手术刀”仿真了肝血管瘤的手术过程，仿真手术符合临床手术过程并有力的反馈作用。结论可视化三维重建模型有利于肝血管瘤手术治疗方案的合理选择；术前的手术设计和可视化演示可提高手术效果，降低手术风险及减少手术并发症。

摘要：目的探讨孕激素膜受体1(progesterone receptor membrane component-1,PGRMC1)是否参与乳腺癌细胞增殖及化疗药物敏感度的调控,为乳腺癌的化疗提供参考依据。方法设计合成以PGRMC1为靶标的siRNA1、2,用lipofectin2000转染人乳腺癌高转移细胞株MDA-MB-231(ER-,PR-)和低转移细胞株MCF-7(ER+,PR+),QRT-PCR检测转染siRNAs后PGRMC1基因mRNA水平变化,Western blot法检测蛋白表达变化,以siRNA-GFP为阳性对照,未处理组为空白对照。CCK8法检测转染前后DTX敏感度。应用1/2的IC50DTX作用转染组与对照组,流式细胞仪检测各组细胞周期变化,Annexin V/PI阳性细胞百分比,对比各组细胞凋亡率、死亡率,双氢二氯荧光黄染色阳性率判定各组细胞内ROS水平。JC-1染色后,免疫荧光显微镜下观察各组细胞线粒体膜电位变化。结果以PGRMC1为靶标设计的siRNA1、2对该基因mRNA及蛋白表达显著抑制在70%以上,细胞增殖受抑,对化疗药物敏感度增高,与非转染组相比G2期细胞比例明显增加,凋亡细胞比率明显增加,细胞内ROS水平也随之升高,线粒体膜电位下调。结论 PGRMC1参与了乳腺癌细胞增殖及化疗敏感度的调控。

摘要：目的设计一种新型混合型生物人工肝(HBAL)并通过对模拟肝衰竭血清的净化作用评价其疗效,探讨其临床应用的可行性。方法选用中国人肝细胞株-1(CL-1)作为肝细胞供体,在微重力环境下,肝细胞微载体共培养方法培养至第5天,细胞总量约4.0×109个,细胞密度约为4.0×1010/L,在无菌环境下灌入自制生物反应器中,制成生物部分,非生物部分采用血液灌流+胆红素吸附,生物部分和非生物部分通过两套聚乙烯胶管构成一个封闭的环路,监测模拟肝衰竭血清中未结合胆红素、鹅去氧胆酸,胆酸、血氨经过HBAL循环后浓度的变化以及生物反应器中肝细胞功能、形态及肝细胞活性的变化。结果整个治疗过程中循环前24h内,模拟肝衰竭血清中未结合胆红素(UBD)、鹅去氧胆酸(CDCD),胆酸(CA)和血氨(AA)的浓度分别从(335.3±6.0)、(395.0±5.6)、(155.7±4.5)、(39.0±2.6)μmol/L下降至(106.0±10.9)、(131.8±28.7)、(42.2±7.3)、(3.5±1.0)μmol/L,与0h比较差异有统计学意义(P=0.041),24h后浓度下降趋于平稳;循环48h后,CL-1细胞功能发生变化,生物反应器中模拟肝衰竭血清中的谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)分别从(25.9±4.2)IU/L、(22.0±3.6)IU/L、(0.28±0.09)μmol/L升高至(31.0±2.6)IU/L、(31.6±8.0)IU/L、(0.41±0.12)μmol/L,与0h比较差异有统计学意义(P=0.027);并且整个反应器中肝细胞的数量和活力在循环48h后也呈现显著性下降(P=0.044)。结论(1)构建了一种新型灌流型生物反应器,该生物反应器中的CL-1细胞能够保持较高的活性和良好的功能。(2)新型混合生物型人肝可以显著降低模拟肝衰竭血清中的未结合胆红素、鹅去氧胆酸,胆酸、血氨的浓度,具有清除这些毒性物质的功能,提示其具有明显的肝功能支持作用。

摘要：目的研究三维重建技术在儿童腹部肿瘤中的临床应用价值。方法利用自主研发的医学图像处理与模拟软件,对儿童腹部肿瘤CT图像进行分割、三维重建,根据重建结果对肿瘤与周围脏器及血管的关系进行分析,并对手术难易程度及可切除性进行评估。手术中进行拍照、录像,与重建结果进行对比。术后再用病理结果对肿瘤组织来源进行验证。结果例1:三维重建的模型显示肿瘤占居腹部和盆腔大部,形状不规则,其内有一不规则高密度骨质样物,腹主动脉、髂血管位于肿瘤后侧,与肿瘤有一定的距离。术前预测为畸胎瘤。经手术验证,重建结果符合患者个体化实际情况。肿瘤内为大量褐色液体,内含少量毛发及骨骼样组织。术后病理证实为囊性成熟性畸胎瘤。例2:重建的模型显示腹主动脉、腹腔干及其分支、肝动脉、门静脉主干及分支、脾静脉等结构均清楚显示,胃网膜血管迂曲增粗,肿瘤来源于胰腺,胰体尾受压萎缩,仅保留少量胰头组织。术中结果证实肿瘤来源于胰腺,胰体尾受压。术后病理证实为胰腺实性-假乳头状瘤。结论三维重建技术可对儿童腹部肿瘤进行准确定位,并于术前进行肿瘤性质及来源预测,有利于手术方案的合理设计,降低手术风险。