摘要：目的利用CRISPR/Cas9技术构建SLC19A2基因敲除的纯合子小鼠模型,并验证其表型。方法设计gRNA载体,将构建好的gRNA载体和Cas9载体进行体外转录后共注射到受精卵,经胚胎移植后获得6只(雌性3只、雄性3只)阳性F0代小鼠。通过繁育获得12只(雄性6只、雌性6只)SLC19A2基因敲除纯合子小鼠[SLC19A2-/-小鼠(C57BL/6)]。8周龄野生型C57BL/6小鼠和SLC19A2-/-小鼠各12只(雄性6只、雌性6只),分别设为野生型组与基因敲除纯合子组。采用PCR扩增凝胶电泳法鉴定小鼠基因型;采用实时荧光定量PCR检测胰腺组织和肝脏组织中SLC19A2 mRNA表达,采用蛋白质印迹法检测胰腺组织和肝脏组织中THTR-1蛋白表达。结果PCR扩增凝胶电泳法成功鉴定出SLC19A2-/-小鼠。基因敲除纯合子组胰腺组织和肝脏组织中SLC19A2 mRNA及THTR-1蛋白表达水平低于野生型组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论基于CRISPR/Cas9技术成功构建了SLC19A2基因敲除小鼠。

摘要：目的 探讨高分辨熔解曲线（HRM）技术对SLC4A1基因进行突变筛查的可行性.方法 选用DNA测序确认为c.166A〉G（***56Glu）杂合突变的2例遗传性球形红细胞增多症（HS）和30份健康体检者标本,使用Primer Premier 6.0软件设计相应的HRM引物,在LightCycler 480中进行检测和HRM分析.结果 应用HRM法能有效检测出2例HS的SLC4A1基因c.166A〉G杂合突变,且其检测的特异度与敏感度皆为100%.结论 HRM技术能对SLC4A1基因c.166A〉G进行突变筛查,为一种高效、准确和低成本的分子诊断方法.

摘要：目的:探讨高分辨熔解(HRM)曲线分析法检测遗传性球形红细胞增多症(HS)患者SLC4A1基因D38A和K56E突变位点的可行性及其意义。方法:抽取23例HS患者外周血样本进行常规检测,提取基因组DNA,针对SLC4A1基因突变位点D38A和K56E设计引物,应用HRM法对所有样本进行突变分析,并通过DNA测序技术对HRM结果进行验证。结果:23例HS患者中,HRM法共检测出杂合突变型基因6例,其中包括D38A突变3例,K56E突变3例。DNA测序结果与HRM法检测结果一致。结论:应用HRM法能准确检测SLC4A1基因D38A和K56E突变位点,具有高效、快速、可靠等优点,不仅可用于临床辅助诊断,还有望成为确定HS患者基因突变谱的新方法。

摘要：目的：探讨广西壮族寻常型银屑病患者的发病与HLA-DRB1基因的关联。方法：应用聚合酶链式反应—序列特异引物（PCR-SSP）法对58例壮族寻常型银屑病患者和102例健康壮族人的HLA-DRB1座位进行基因分型,比较两组相应等位基因的频率。结果：两组被检者在设计的15对引物中检出12个等位基因,其中以HLA-DRB1＊15和HLA-DRB1＊16的频率最高,HLA-DRB1＊07在银屑病组的频率明显高于对照组（OR=0.330,CI=0.123-0.880,P=0.022）,其它等位基因频率在两组间差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：HLA-DRB1＊07与广西壮族人寻常型银屑病的关系密切,可能为该人群银屑病的易感因子之一。

摘要：目的监测2005年我国不同地区15家教学医院分离的医院获得革兰阴性病原菌的耐药性。方法按设计方案收集非重复的1927株院内获得革兰阴性病原菌。菌株经中心实验室复核后,采用琼脂稀释法测定6类18种抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC),数据输入 WHONET 5.4软件进行耐药性分析。结果不产超广谱β内酰胺酶(ESBEs)的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌对被测β内酰胺类药物的敏感性均较高,而对于产 ESBLs 的大肠杆菌和肺炎克雷伯菌,敏感率大于80%的药物只有美罗培南、亚胺培南和哌拉西林-三唑巴坦。不产 ESBLs 大肠埃希菌对氟喹诺酮类药物的敏感性很低(34.8%～36.1%),产 ESBLs 大肠埃希菌的敏感性则更低(13.4%～17.1%)。对于易产头孢菌素酶(AmpC)的菌株(包括阴沟肠杆菌、产气肠杆菌、枸橼酸杆菌属、沙雷菌属、普通变形杆菌),敏感率均大于80%的抗生素有美罗培南、亚胺培南、哌拉西林-三唑巴坦,另外,敏感性较高的抗菌药物还包括头孢吡肟(67.3%～100%)、阿米卡星(67.3%～95.2%)、头孢他啶(52.9%～100%)和头孢哌酮-舒巴坦(51.9%～100%),氟喹诺酮类药物的敏感率为52.5%～86.2%。铜绿假单胞菌对多黏菌素 B 的敏感性最高(95.6%),敏感率在70%～80%之间的药物有美罗培南、亚胺培南、阿米卡星和哌拉西林-三唑巴坦。鲍曼不动杆菌对多黏菌素 B 的敏感率达98.3%,继之为亚胺培南(80.8%)、美罗培南(76.2%)和米诺环素(67.4%),其他药物的敏感率低于60%。对嗜麦芽窄食单胞菌,敏感性较高的抗菌药物有米诺环素(85.0%)、左氧氟沙星(82.5%)和甲氧苄啶-磺胺甲噁唑(77.5%)。对洋葱伯克霍尔德菌,敏感性相对较高的抗菌药物有米诺环素(77.2%)和美罗培南(61.4%)。结论碳青酶烯类、哌拉西林-三唑巴坦、阿米卡星和头孢吡肟对医院分离的肠杆菌科菌保持了较高的抗菌活性,而非发酵革兰阴性杆菌对临床常用药物的敏感性较以往监测有所降低。

摘要：文章较为系统地介绍了葛洪的从医经历以及《肘后备急方》的成书背景。葛洪渊博的知识、对百姓的关爱、对真理的追求、孜孜不倦的科学品质,让他著成了《肘后备急方》。在当前提升文化软实力的时代潮流中,将中医名家的美德与智慧融入课堂教学中,能够进一步提升学生对传统文化的认识,进而增强中医文化自信。