摘要：目的探讨影响麻醉恢复室(PACU)全身麻醉患者转出延迟的主要因素。方法收集PACU全身麻醉(以下简称全麻)转出延迟患者105例,采用1∶2匹配设计,选出符合条件的对照组210例,利用中南大学湘雅三医院临床医疗信息系统及麻醉临床信息系统收集患者各类临床手术相关数据。结果单因素一般Logistic回归分析结果显示:术前Cl^(-)、平均动脉压(MAP)、MAP>130 mmHg时间、全手术期平均心率、最高心率、全手术期总入量、全手术期总出量、输血量、PACU再使用阿片类止痛药、总去甲肾上腺素剂量、是否使用升压药物、术后动脉血二氧化碳分压(PaCO_(2))、术中动脉血氧分压、术中Na^(+)、术后Glu均是PACU全麻患者转出延迟的危险因素(P<0.05)。多因素逐步Logistic回归分析结果显示:术中Na^(+)[OR=1.137(95%CI:1.056,1.223)]、术后PaCO_(2)[OR=3.602(95%CI:1.693,7.681)]、PACU再使用阿片类药物[OR=2.950(95%CI:1.460,5.959)]均是PACU全麻患者转出延迟的独立危险因素(P<0.05)。结论及时监测术中Na^(+)、术后PaCO_(2)、PACU再使用阿片类药物及早期干预可降低PACU转出延迟发生率。

摘要：目的:构建E2F-1真核表达载体,建立稳定过表达E2F-l的胃癌细胞株,探讨E2F-l基因过表达对胃癌MCC-803细胞化疗敏感性的影响方法:应用Tri zol法从胃癌的癌组织中提取mRNA逆转录合成cDNA,按Gene-Bank公布的E2F-1基因序列设计带有酶切位点的引物并行扩增获得E2F-1的ORF片段;然后经限制性内切酶EcoR l和Hind Ⅲ双酶切后将E2F-1定向克隆到真核表达载体pCMV-HA2中转化筛选用脂质体Lipofectamine2000将该载体转染MGC-803胃癌细胞,然后用含G418的培养基筛选获得具Genectin抗性的过表达E2F-1的胃癌细胞株实时定量PCR( real-time quantitative PCR)和蛋白印迹(Western blotting)技术检测MGC-803/E2F-1细胞内E2F-1表达情况四唑蓝(MTT)法检测MGC-803/E2 F-1组(实验组)、MGC-803/EV组(阴性对照组)和MCC-803组(未转染组)细胞对化疗药物的敏感性结果:重组载体pCMV-E2F-1-HA2经EcoR I和Hind Ⅲ双酶切后得到预期片段,测序结果与报道的E2F-1基因之0RF完全一致,证明目的基因已成功克隆入真核表达载体,获取具Genectin抗性的细胞克隆、并进行了扩增。RT-PCR和Western blotting实验证实重组载体pCMV-E2F-l-HA2成功转入胃癌细胞内,并稳定过表达E2F-1 MTT法检测发现,5-氟尿嘧啶(5-FL)、阿霉素(ADM)、丝裂霉素(MMC)对MGC-803/E2F、-1组细胞的抑制率分别为71.45%、74.03%、76.72%,均明显高于MGC-803/EV组(45.58%、53.69%、54.58%)和MGC-803组(53.70%、54.67%、55.05%) (P<0.05)结论:成功构建了真核表达载体pCMV-E2F-1-HA2,并建立了稳定过表达E2F-1的胃癌细胞株MGC-803/E2F-1。E2F-1过表达增强了胃癌细胞对化疗药物的敏感性。

摘要：芬太尼－安氟醚静吸复合麻醉，高流量心肺转流同时应用自行设计的灌注装置，经冠状静脉窦逆行灌注，在心脏不停跳的状态下进行主动脉瓣置换术，然后改为顺行灌注，再行二尖瓣置换术或其它合并症的矫治，治疗风湿性心脏病病人１２例。术中麻醉平稳，灌注满意，阻断主动脉前后的血气分析、电解质、心肌酶的测定无明显变化，术后无多巴胺等正性肌力药物依赖和严重心律失常，恢复良好，提示该麻醉和灌注方法具有良好的心肌保护作用。

摘要：教学活动是教师与学生共同参与,教师如果只管“照本宣科”,埋头讲授,而不顾学生情趣和收益如何,那么他的课是不成功的,同样尽管教师对课程精心设计,精彩讲授,而学生学而不乐,分心“打野”,也未必达到教学效果。教与学是一对立统一的矛盾,在教学活动中如何做到教与学的同步思维,使教与学都想到一块,是课堂教学中至关重要的问题[1]。下面是我们在麻醉学课堂教学中如何注重教与学同步思维的做法和体会。1营造和谐的课堂氛围课堂教学是教与学的双边活动,需师生共同努力完成。和谐的课堂气氛和民主的师生关系,使学生心灵上产生对教师的亲近感和信任感,有利于树立教师的威信,发挥教师的主导作用,也有利于学生自信心的建立,更是培养学生创新思维最佳的空间和发挥学生的主体作用。和谐民主的课堂氛围有助于师生互动,实现教学相长[2]。因此,我们在课堂教学中树立民主意识,建立民主平等的师生关系,课前、课后广泛与学生交流,把学生作朋友善待,鼓励学生课间大胆质疑,消除学生紧张和恐惧感,创造宽松学习环境,使每个学生都体验到学习的快乐和自己是学习的主人,在心理上始终处于一种追求知识的积极状态。2激发学生的学习兴趣和求知欲望一堂课是否成功,首先要看其是否能吸引学生,...

摘要：目的：探讨经皮锁骨上、锁骨中点内侧新进路行锁骨下静脉穿刺中心静脉置管的技术特点及应用于成年人及小儿的可行性。方法：随机选择拟行各种大手术或长期全胃肠外营养的成人患者194例，儿童、婴儿136例，新生儿16例，采用自行设计的锁骨上、锁骨中点内侧新进路行锁骨下静脉置管。进针点位于锁骨中点内侧约0．5cm（成人）或0．3cm（小儿），锁骨上0．5～1cm。穿刺针与冠状面呈向前10°～15°，进针方向指向锁骨内1／3段的中点。用J型引导钢丝外套法置入中心静脉导管。结果：成人组总穿刺成功率100％，首次穿刺成功率88．6％（172／194）；儿童及婴儿组总穿刺成功率98．52％（134／136），首次穿刺成功率84．51％（115／136）；新生儿组总穿刺成功率93．7％（15／16），首次穿刺成功率68．7％（11／16）。穿刺成功的343例全部置管顺利。无穿破动脉、无血肿、气胸和臂丛神经损伤出现。结论：经皮锁骨上、锁骨中点新进路行锁骨下静脉置管是一种安全、有效的技术，可用于成人、儿童、婴儿和新生儿。

摘要：目的构建E2F-1截短体的诱饵载体,并进行自激活活性和诱饵蛋白毒性检测,为应用酵母双杂交系统筛选与E2F-1相互作用蛋白建立实验基础。方法设计引物,PCR扩增E2F-1截短体,引入酶切位点EcoRⅠ和BamHⅠ,将E2F-1截短体连接至载体pGBKT7中,将构建成功的诱饵表达载体pGBKT7-E2F-1截短体转化到酵母菌AH 109中,采用选择性培养皿和β-半乳糖苷酶分析等方法分析检测重组质粒的自激活活性和细胞毒性。结果成功扩增了E2F-1截短体,并连接至载体pGBKT7中,测序比对结果正确,成功转化到酵母菌AH 109中,经检测无自激活活性和细胞毒性。结论成功构建了E2F-1截短体的诱饵载体,经检测无自激活活性和细胞毒性,可应用于酵母双杂交系统筛选与E2F-1相互作用的蛋白。

摘要：目的:通过构建人E2F-1基因的小干扰RNA(siRNA)表达质粒,探讨其对胃癌MGC803细胞中E2F-1基因表达的影响。方法:将设计合成的具有短发夹结构的人E2F-1基因siRNA寡核苷酸链退火形成双链,连接入经BamHⅠ和HindⅢ双酶切后的pSilencer4·1-CMVneo表达质粒,并做酶切及测序鉴定。用脂质体把重组质粒转染至细胞,采用实时定量PCR(real-time quantitativePCR)及蛋白印迹(western blotting)技术分别检测E2F-1mRNA及蛋白表达。结果:经酶切及测序鉴定,成功构建了E2F-1 siRNA表达质粒;它可显著抑制MGC803细胞中E2F-1基因mRNA及蛋白表达,与未转染组及阴性对照组细胞比较,分别降低了86·4%、86·1%和81·5%、79·6%。结论:pSilencer4·1-E2F-1重组质粒能抑制人胃癌MGC803细胞E2F-1基因的表达,为进一步E2F-1基因的功能研究及胃癌治疗研究提供了实验基础。

摘要：目的探讨E2F-1对胃癌细胞生物学行为影响的分子机制。方法分别抽取转染E2F-1的胃癌MGC-803细胞和未转染E2F-1的胃癌MGC-803细胞的总RNA。纯化mRNA,逆转录合成cDNA标记后,与22K人类基因表达谱芯片进行杂交,扫描后筛选出表达差异的基因。随机选取3个差异表达基因,分别设计引物,用半定量RT-PCR检测验证。结果在21522条基因中,两组细胞间的差异表达基因有740条,其中上调基因405条,下调基因335条。差异基因中有73条功能信息不明。随机选取的3个差异表达基因的RT-PCR结果与基因芯片扫描结果相似,具有相同的方向性。结论胃癌的发生发展是多基因相互作用、多种信号通路相互调节的结果。生物信息学分析显示,E2F-1基因可以通过TP53信号传导途径影响胃癌MGC-803细胞生物学行为的改变,还与众多基因的差异性表达密切相关。

摘要：目的:观察Cdx2小分子干扰RNA(Cdx2-siRNA)对人胃癌MGC-803细胞凋亡及Survivin、Caspase-9表达的影响。方法:设计合成针对Cdx2基因的siRNA寡核苷酸以及阴性对照siRNA。将人胃癌MGC-803细胞接种于培养板中,分为3组,正常对照组不作处理,阴性对照组和Cdx2-siRNA组分别用LipofectamineTM2000将阴性对照siRNA或Cdx2-siRNA成功转染进细胞内。应用流式细胞仪检测转染24h时MGC-803细胞凋亡的变化,并应用RT-PCR和Western blot技术检测胃癌MGC-803细胞中Survivin和Caspase-9基因mRNA和蛋白的表达。结果:Cdx2-siRNA组MGC-803细胞的凋亡率为(12.5±0.6)%,明显高于阴性对照组和正常对照组(P0.05)。结论:Cdx2-siRNA促进人胃癌细胞的凋亡,其机制可能与其抑制Survivin的表达、增强Caspase-9的活性有关。