摘要：目的:应用RNA干扰技术抑制人肝细胞癌细胞系HepG2细胞DcR3表达,并研究DcR3基因沉默后对HepG2细胞凋亡和迁移能力的影响.方法:设计并合成特异性DcR3-siRNA 4条和阴性对照siRNA 1条,转染HepG2细胞,通过半定量反转录-PCR(RT-PCR)及免疫细胞化学方法检测其对DcR3表达的抑制作用并筛选出干扰效果最强的siRNA,应用流式细胞仪、DNA ladder方法检测细胞的凋亡情况,应用划痕实验检测细胞体外迁移能力的变化.结果:各特异性DcR3-siRNA均能抑制DcR3mRNA表达(P<0.05),其中以DcR3-siRNA4的抑制作用最明显,抑制作用达62.9%;将DcR3-siRNA4转染HepG2细胞能明显抑制HepG2细胞DcR3蛋白的表达(P<0.01).流式细胞仪检测结果显示,特异性DcR3-siRNA转染组细胞的凋亡率(22.97%±2.10%)明显高于空白对照组(1.17%±0.32%)、脂质体转染组(1.44%±0.43%)和非特异性siRNA转染组(1.22%±0.40%)(均P<0.001);DNA ladder实验发现特异性DcR3-siRNA转染组出现DNAladder,而空白对照组、脂质体转染组和非特异性siRNA转染组均未出现DNA ladder.划痕实验结果显示,转染后24、48和72 h,特异性DcR3-siRNA转染组细胞的相对迁移率均低于空白对照组、脂质体转染组和非特异性siRNA转染组.结论:DcR3在肝癌细胞的凋亡及迁移中发挥重要作用,抑制DcR3的表达能诱导肝癌细胞凋亡并降低肝癌细胞的迁移能力.

摘要：目的通过调查，了解护理人员对自愿报告护理差错和不良事件的认知状况，分析其相关影响因素。方法采用自行设计的问卷，2008年6-10月对广西25所二级、三级甲等医院275名护士进行便利抽样调查，对调查情况进行统计分析。结果不同职称、是否管理人员与对定义、制度标准的认知状况差异显著；护理人员在对现行制度和拟实行非惩罚性制度报告差错和不良事件的态度上差异显著。结论护理人员安全意识有待加强，现行的报告制度需要改进，有必要建立一个完善的护理差错和不良事件报告系统。

摘要：为保证病人的交接班质量,杜绝和减少护理缺陷,增强护士护理工作的主动性.我科自2007年5月起设计并使用心脏外科护理交接班记录单,使临床护理交接班得到了进一步规范,提高了交接班质量.

摘要：背景:人源化非肥胖糖尿病/重症联合免疫缺陷(nonobese diabetic/severe combined immunodeficient,NOD/SCID)小鼠模型在生物及医学科学研究中被广泛应用,而提高人源化NOD/SCID小鼠模型中的人源化水平是研究者的迫切需要。目的:探讨提高人源化NOD/SCID小鼠模型人源化水平的措施。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2008-11/2009-01在广西医科大学实验动物中心及广西医科大学第一附属医院完成。材料:雄性NOD/SCID小鼠14只,体质量(25.0±1.5)g;1例骨髓标本约6mL(多部位分层次采集)取自健康志愿者;1例足月脐带血标本大约90mL,取自广西医科大学第一附属医院产科,为健康产妇。方法:无菌抗凝的正常骨髓及足月脐带血样本均在采集后6h内处理。密度梯度离心法分离单个核细胞。将14只小鼠标号电脑随机分为5组:全身照射/环磷酰胺骨髓移植组(n=3),全身照射/环磷酰胺脐血移植组(n=3),全身照射骨髓移植组(n=3),全身照射脐血移植组(n=3),空白对照组(n=2)。将人骨髓或脐血单个核细胞分别移植给经不同方案和剂量预处理的各组小鼠,移植后给小鼠腹腔注射重组人粒-巨噬细胞集落刺激因子及重组人促红细胞生成素。主要观察指标:各组小鼠输注的细胞数,小鼠存活情况并计算死亡率,移植6周后流式细胞仪检测小鼠骨髓及外周血人CD45+细胞比例。结果:全身照射/环磷酰胺骨髓移植组、全身照射骨髓移植组和全身照射/环磷酰胺脐血移植组、全身照射脐血移植组小鼠输注人单个核细胞数分别为(0.6560±0.0089)×106和(4.0775±0.8450)×106。全身照射/环磷酰胺组死亡率均为100%,全身照射组死亡率均为33.3%。全身照射后再加环磷酰胺,小鼠不能耐受;而全身照射剂量越大,死亡率越高,当达400cGy时,死亡率100%。存活小鼠移植6周后,流式细胞仪检测小鼠骨髓中人CD45+细胞的比例,全身照射脐血移植组13号和6号小鼠分别为59.61%和21.46%,而全身照射骨髓移植组2号和8号小鼠其比例均为0,空白对照组小鼠比例均为0。而在13号小鼠骨髓细胞中,CD33+细胞比例为13.13%,GlyA+CD45-细胞比例为20.21%。结论:要建立人源化NOD/SCID小鼠模型,所输入的造血干细胞数量一定要达到阈剂量,而在可耐受的范围内,尽可能提高预处理的强度,并使用人细胞因子可提高人源化NOD/SCID小鼠模型的人源化比例。

摘要：目的通过对比两种健康教育方法对脑卒中患者诊疗方案依从性的影响,找出适合脑卒中患者最佳的健康教育方式。方法采用整群抽样方式,将368例脑卒中住院患者随机分为实验组和对照组,实验组按自行设计的健康教育路径实施健康教育;对照组按传统方法实施健康教育。在住院22天后,分别用问卷调查方式对患者住院期间的检查、治疗、护理、饮食、休息等10个项目的依从性进行记录评分,并做统计学分析和日常生活活动能力评定量表(ADL表)进行测评,比较两组患者的得分情况。结果实验组与对照组在住院第22天后对检查、治疗、护理、饮食、活动、功能锻炼、休息等10项诊疗措施的依从性和日常生活自理能力差异均有极显著意义(P<0.01)。结论依照临床路径实施健康教育,可有效提高脑卒中患者对诊疗方案的依从性和日常生活自理能力。

摘要：目的构建介导人α-反义寡核苷酸的慢病毒载体,为α-反义寡核苷酸对β-地中海贫血基因治疗的体内试验提供稳定的转染细胞载体。方法根据人α-反义寡核苷酸序列设计siRNA、合成DNA片段,通过双限制性内切酶消化和连接的方法构建pGCSIL-vshRNA-GFP载体质粒,接着该质粒转化感受态的大肠杆菌***5α,通过PCR及基因测序鉴定阳性克隆,再经Lipofectamine 2000将pGCSIL-vshRNA-GFP,pHelper 1.0和pHelper 2.0三质粒系统共转染293 T细胞包装病毒,通过绿色荧光蛋白的表达测定收集的病毒滴度。结果重组质粒的外源基因PCR鉴定正确,基因测序结果与所需要的α-反义寡核苷酸序列完全一致,浓缩后病毒滴度为5×109TU/ml。结论成功构建介导人α-反义寡核苷酸的慢病毒载体。

摘要：目的克隆广西菲牛蛭水蛭素基因的cDNA,并对该基因以及氨基酸进行序列分析。方法根据已发表的马尼拉菲牛蛭水蛭素基因cDNA设计一对引物,从广西菲牛蛭的头部提取总RNA后,采用RT-PCR扩增cDNA,将产物克隆至载体PMD-19T,PCR鉴定后进行测序。结果广西菲牛蛭水蛭素基因cDNA序列长度为251 bp,编码框由83个氨基酸组成,其中包括由20个氨基酸的信号肽,以及63个氨基酸组成的成熟肽。广西菲牛蛭水蛭素基因的氨基酸序列和已报道的广东菲牛蛭、马尼拉菲牛蛭水蛭素基因HM1、HM2基因的氨基酸序列相比较,同源性分别为94%,91.8%,84.7%。结论广西菲牛蛭水蛭素基因cDNA序列长度为251 bp,由83个氨基酸组成。

摘要：目的了解经外周静脉置入中心静脉导管(PICC)置管肿瘤化疗患者对居家维护的接受程度及其影响因素,为更多带管回家患者接受PICC居家维护提供依据。方法自行设计调查问卷,采用方便抽样方法,对160例PICC置管患者进行问卷调查。结果接受居家维护患者74例,未接受86例,付费方式、行动能力、住所距维护点距离、较方便的导管维护方式4个因素对PICC置管的肿瘤化疗患者居家维护接受程度的影响差异有统计学意义(OR值分别为2.180、2.959、3.688、2.293),其他调查因素对居家维护接受程度的影响差异无统计学意义(P>0.05);患者接受与不接受居家维护的原因进一步分析显示,接受居家维护的患者中83.78%认为居家维护比返院维护省时、省钱,40.54%认为居住地离维护点太远,返维护点维护不方便,不接受居家维护患者中75.58%认为住所离维护点近,返院维护方便。结论 PICC居家维护接受程度呈较低水平,影响患者接受PICC居家维护的主要因素为住所距维护点距离、付费方式、行动能力和较方便的导管维护方式,建议向基层医院推广PICC维护技术,进一步建立、完善PICC社区维护网络;同时制定标准化、专业化、管理规范化的PICC居家维护模式,为部分家住偏远地区、行动不便的患者提供新的选择。

摘要：目的:构建携带人端粒酶逆转录酶基因(hTERT)慢病毒表达载体LV3-shRNA-hTERT及其病毒包装鉴定并稳定转染宫颈癌Caski细胞系。方法:使用Designer3.0(Genepharma)软件设计靶向hTERT的小发卡RNA(shRNA)序列,将hTERT-shRNA基因片段插入慢病毒载体pGLV3/H1/GFP+Puro中,构建慢病毒表达质粒LV3-shRNA-hTERT。通过酶切、DNA测序验证hTERT片段的准确性,将LV3-shRNA-hTERT与包装质粒共转染293T细胞,浓缩上清并测定病毒滴度获得重组慢病毒,将该重组慢病毒感染Caski细胞,通过观测绿色荧光蛋白(GFP)的表达判断转染成功与否以及估计转染效率,RTPCR、Western blot分别测定转染后不同时间点的hTERTmRNA水平和hTERT蛋白表达情况,TRAP-ELISA法测定细胞端粒酶活性。结果:LV3-shRNA-hTERT携带正确hTERT基因,重组病毒经PCR证实hTERT-shRNA基因插入。利用重组慢病毒介导将重组质粒LV3-shRNA-hTERT高效转导入宫颈癌Caski细胞并稳定表达,荧光显微镜观察转染后24 h Caski细胞即开始发出绿色荧光,72 h后有大量荧光表达,而在稳定转染空质粒的Caski细胞中不表达。检测转染后的Caski细胞,发现有3条链能明显抑制hTERT mRNA和蛋白水平的表达,并显著降低了细胞端粒酶活性,其中以72H-TERT-1515抑制作用最强,对hTERTmRNA和蛋白的抑制率分别达75.0%和70.3%,端粒酶活性下降74.6%。结论:成功构建携带hTERT-shRNA慢病毒表达载体LV3-shRNA-hTERT,并稳定转染Caski细胞系,实验设计的shRNA能有效抑制宫颈癌Caski细胞hTERT mRNA水平和hTERT蛋白表达,并显著降低细胞端粒酶活性。为端粒酶在宫颈癌发病机制的研究、宫颈癌基因治疗的体外干扰治疗奠定了工作基础。

摘要：目的探讨生死观教育对家居晚期癌症病人生死观及生活质量的影响。方法采用自行设计的生死观认识与行为问卷及生活质量评估表对100例晚期癌症病人进行评定。结果进行生死观教育后所有病人的生死观均得到显著改善,生活质量明显提高。结论生死观教育可改善家居晚期癌症病人对死亡的不良认知及行为,促进病人的心理健康,提高其生活质量。