摘要：目的探讨食蟹猴不同程度肝纤维化的氢质子磁共振波谱(1H-MRS)的变化规律,为研究人类不同程度肝纤维化的1H-MRS奠定理论依据。方法以四氯化碳(CCl4)成功建立22只食蟹猴的肝纤维化模型,其中发展至早期肝硬化(肝纤维化S4期)的有15只。对具有肝纤维化完整发展过程的15只食蟹猴的1H-MRS进行对比研究,分析食蟹猴不同程度肝纤维化的1H-MRS的变化规律。各研究指标的比较采用配伍组设计方差分析,组间两两比较用SNK q检验;1H-MRS研究指标与肝纤维化严重程度的相关性采用Spearman秩相关分析。结果食蟹猴1H-MRS的Cho随着肝纤维化严重程度的加重而增大,且肝纤维化各期(S1~S4)与正常肝组织(S0期)比较、重度肝纤维化S3、S4期与轻-中度肝纤维化S1、S2期比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。与S0期比较,S1期的lipid峰值明显增高,S2期有所回落,S3、S4期的lipid峰值则明显低于S0期,且肝纤维化S1、S3、S4期与S0期比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。随着肝纤维化严重程度的进展,Cho/lipid比值逐渐增大且组间差异均有统计学意义(P<0.01),Cho/lipid比值与肝纤维化病理学分期的秩相关系数达0.98(P<0.001)。ROC曲线分析显示,Cho/lipid比值为肝纤维化最具诊断意义的指标,Cho/lipid比值诊断肝纤维化和早期肝硬化的阈值分别为:肝纤维化≥0.028、早期肝硬化≥0.131(P<0.01)。结论食蟹猴肝纤维化模型的1H-MRS随着肝纤维化严重程度的加重而发生规律性变化,其中Cho/lipid比值是肝纤维化分期最有诊断价值的指标,该规律可为研究人的肝纤维化奠定理论基础。

摘要：目的研究血清在构建角膜基质细胞体外三维培养模型中对细胞生长情况及胶原纤维生成的影响,为体外研究角膜基质细胞外基质(ECM)纤维化提供新的培养模型。设计实验研究。研究对象牛角膜基质细胞。方法分离原代牛角膜基质细胞,取第一代细胞作为种子细胞构建Pellet模型,实验分为对照组(DMEM/F12)和血清组(DMEM/F12+10%胎牛血清FBS)。Pellet模型培养3周后,肉眼观察细胞生长状态,同时进行HE染色及Calcein AM/PI染色测定细胞活性,并应用MASSON染色及透射电子显微镜(TEM)观察胶原纤维的形成、走向及排列情况。主要指标细胞生长状态、细胞活性、胶原纤维走向及排列情况。结果Pellet模型培养3周后,对照组未观察到角膜基质细胞抱团生长现象,且细胞易松散,难以进行后续实验;血清组Pellet模型中细胞明显成簇生长,呈粒状,结合牢固。Calcein AM/PI染色及HE染色可见血清组大多数细胞存活且密集生长,细胞结构完整。MASSON染色示血清组较多胶原纤维显色,并于TEM下观察到胶原纤维密集分布于细胞外且走向紊乱。结论含血清的培养环境能成功构建牛角膜基质细胞体外Pellet三维培养模型,且能生成含有胶原纤维的ECM。

摘要：目的分析食蟹猴不同程度肝纤维化的磁共振灌注加权成像(MR-PWI)定量参数值的变化规律,探讨评价肝纤维化严重程度的MR-PWI最佳检测指标。方法以皮下注射四氯化碳溶液辅以饲喂高脂饲料的方法成功建立22只食蟹猴的肝纤维化模型,其中15只发展至早期肝硬化(即肝纤维化S4期)。采用配伍组设计对具有肝纤维化完整发展过程的15只食蟹猴进行Exchange肝脏双血供模型的MR-PWI对比研究,MR-PWI定量参数包括对比剂容积转运常数(k^(trans))、反流速率常数(k_(ep))、血管外细胞外间隙容积分数(v_(e))、对比剂血浆容积分数(v_(p))、肝动脉灌注指数(HPI)。分析不同程度肝纤维化上述参数的变化规律及其与肝纤维化严重程度的相关性,并探讨最佳的MR-PWI检测指标。统计学方法采用配伍组设计(随机区组设计)方差分析、SNK-q检验、Spearman秩相关分析和ROC曲线分析。结果食蟹猴MR-PWI的k^(trans)、k_(ep)随着肝纤维化进展而下降,差异均有统计学意义(F=685.228、99.718,P均0.05)。随着肝纤维化严重程度的进展,HPI逐渐增大,差异有统计学意义(F=839.883,P0.05)。Spearman秩相关分析显示,k^(trans)、k_(ep)与肝纤维化严重程度呈负相关(r_(s)=-0.875、-0.797,P均<0.01),HPI与肝纤维化程度呈正相关(rs=0.959,P<0.01)。ROC曲线分析结果显示,k^(trans)、k_(ep)和HPI诊断早期肝硬化的AUC分别为0.852(95%CI 0.767~0.937)、0.799(95%CI 0.700~0.897)和0.967(95%CI 0.932~1.002),最佳截断值分别为0.395 mL/min、1.561 mL/min和0.590,灵敏度分别为86.7%、79.6%和97.4%,特异度分别为77.4%、71.9%和93.1%。其中HPI诊断S1、S2、S3和S4期肝纤维化的最佳截断值分别为0.291、0.376、0.503和0.590,灵敏度分别为95.7%、93.8%、94.4%和97.4%,特异度分别为89.5%、84.7%、91.3%和92.7%。结论食蟹猴肝纤维化模型的MR-PWI参数值随肝纤维化发展而发生规律性变化,其中HPI是定量评价肝纤维化严重程度的最佳检测指标。

摘要：目的 探讨新型外固定牵屈器治疗膝关节僵直的临床疗效. 方法 回顾性分析2009年3月至2012年5月收治的17例膝关节僵直患者资料,男13例,女4例;年龄为21～59岁,平均38.2岁.术前膝关节屈曲5° ～ 39°,平均18.6°.病程为5～19个月,平均13个月.所有患者均应用自行研制的新型外固定牵屈器治疗：术后2～3d待患肢疼痛缓解后开始调整牵屈器,使膝关节逐步屈曲.牵屈速度开始为软组织水平≤1 mm/d,表现在连杆延伸3～4 mm/d,分3～4次完成.末次随访时参照Judet疗效评价标准评定治疗效果. 结果 17例患者经37～51 d（平均42 d）治疗.所有患者术后获8～21个月（平均13个月）随访.末次随访时17例患者膝关节屈曲75°～124°,平均103.7°.末次随访时参照Judet疗效评价标准评定治疗效果：优6例,良8例,可3例.1例患者在矫形期间出现患肢末端血供、感觉障碍,经调整牵屈器后恢复.1例患者出现局部针孔感染,经清洁换药处理后治愈.随访期间所有患者无骨折、牵屈器松动及断裂等并发症发生. 结论 新型外固定牵屈器治疗膝关节僵直具有创伤小、膝关节功能恢复快等优点,初步临床应用疗效满意.

摘要：目的构建小鼠髓样细胞触发受体-2(TREM2)基因小发卡状RNA(sh RNA)慢病毒表达载体,并检测其功能。方法针对小鼠TREM2基因设计合成3对sh RNA序列,将其分别与线性化GV248载体连接,转化至感受态大肠埃希菌DH5α,构建TREM2基因sh RNA重组慢病毒载体(TREM2-shRNA-1、TREM2-shRNA-2、TREM2-shRNA-3)。用重组载体转染293T细胞,荧光显微镜下观察绿色荧光(GFP)后,进行滴度测定。取对数生长期BV2小胶质细胞,分为TREM2-shRNA-1感染组、TREM2-shRNA-2感染组、TREM2-shRNA-3感染组、阴性对照组及空白对照组。TREM2-shRNA-1感染组、TREM2-shRNA-2感染组、TREM2-shRNA-3感染组、阴性对照组分别感染TREM2-sh RNA-1、TREM2-shRNA-2、TREM2-shRNA-3、sh RNA空质粒,空白组不做任何处理。感染120 h取各组细胞,Q-PCR法检测各组TREM2 m RNA,计算细胞沉默效率。结果 TREM2-shRNA-1、TREM2-shRNA-2、TREM2-shRNA-3转染293T后镜下均观察到GFP,包装浓缩的慢病毒滴度分别为(4×108)、(4×108)、(5×108) TU/m L。与空白对照组和阴性对照组比较,TREM2-shRNA-1感染组、TREM2-shRNA-2感染组、TREM2-shRNA-3感染组TRME2 m RNA相对表达量均降低(P均<0. 05);与TREM2-shRNA-1感染组、TREM2-shRNA-3感染组比较,TREM2-shRNA-2感染组TRME2 m RNA相对表达量降低(P均<0. 05)。TREM2-shRNA-1感染组、TREM2-shRNA-2感染组、TREM2-shRNA-3感染组、阴性对照组的沉默效率分别为49. 4%±3. 98%、79. 7%±2. 01、65. 3%±2. 41%和39. 2%±6. 98%,TREM2-shRNA2组沉默效率最高。结论成功构建TREM2-shRNA-1、TREM2-shRNA-2、TREM2-shRNA-3。TREM2-sh RNA-1、TREM2-shRNA-2、TREM2-shRNA-3均可沉默小鼠BV2小胶质细胞中TREM2基因表达,以TREM2-shRNA-2沉默效果最好。

摘要：随机对照试验(randomized controlled trial,RCT)属于实验性研究的范畴,是评价干预措施效果的"金标准"。在健康管理领域中,RCT研究可用于评价各种健康管理措施和方案的应用效果,相关应用不断增加。本文将从RCT的基本原理、特点、优势和局限性、常见类型、设计和实施关键点等角度展开阐述,并结合具体的健康管理研究案例进行分析。以期帮助读者充分理解和认识在健康管理研究领域如何应用随机对照试验;协助读者在健康管理研究领域更好地进行RCT设计和开展RCT研究,收获可靠和高质量的研究成果。

摘要：目的:寻找一个最适合生精细胞体外培养的培养体系,为进一步培养人类生精细胞提供技术基础。方法:用单一酶-研磨-Percoll法制备15d龄雄性大鼠生精细胞混悬液用于体外培养。①设计两种不同的培养条件:DMEM/F12和改良人类输卵管液(HTF)作为基础培养液,分为两组。每组根据添加不同浓度的激素分为6小组。添加的睾酮(T)和FSH浓度分别为:对照组H0(T1μmol/L,FSH0IU/L)、H1组(T1μmol/L,FSH10IU/L)、H2组(T1μmol/L,FSH25IU/L)、H3组(T1μmol/L,FSH50IU/L)、H4组(T1μmol/L,FSH100IU/L)、H5组(T0μmol/L,FSH50IU/L)。②通过BRDU标记和流式细胞仪检测所有实验的生精细胞倍体的变化来判断其发育,进一步确认本研究使用培养条件的可靠性。结果:在生精细胞与支持细胞共培养过程中以改良人类输卵管液作为基础培养液,添加T1μmol/L,FSH50IU/L或100IU/L都适宜生精细胞体外培养;另通过BRDU标记及流式细胞仪检测均表明,在本研究条件下体外培养生精细胞能从初级精母细胞阶段分化到精子细胞阶段。结论:改良人类输卵管液作为基础培养液,添加浓度为50IU/L或100IU/L的FSH及T1μmol/L,最适合生精细胞的体外成熟培养。

摘要：老年病人蛋白质--热卡缺乏性营养不良很常见.这种营养不良可以导致贫血、细胞免疫功能降低、伤口愈合延迟和消化功能紊乱,以致于手术的并发症增多,病死率增高.全静脉营养液(TPN)支持目前已成功应用于临床,以改善和逆转这种营养不良.老年病人生理和代谢有其特殊性,因此,老年病人TPN既要满足疾病治疗的特殊需要,也应符合老年人的生理及代谢改变的特点.我院从2003年开展TPN配制工作以来,给老年病人配制了TPN 392袋,占配制总数的63.22%.其中有2例病例使用基本方2个月,未调整,不见副作用,各项化验指标均在正常范围内,说明配方合理.笔者对老年病人的TPN配方进行合理设计如下.

摘要：目的分析食蟹猴不同程度肝纤维化的磁共振灌注加权成像(MR-PWI)参数的变化规律,探讨肝纤维化严重程度的最佳检测指标。方法采用配伍组设计对具有肝纤维化完整发展过程的15只食蟹猴进行Exchange肝脏双血供模型的PWI对比研究,分析不同程度肝纤维化的PWI参数达峰时间(TTP)、最大浓度(Max Conc)、最大斜率(Max Slope)、曲线下面积(AUC)的变化规律及其与肝纤维化严重程度的相关性,采用ROC曲线判断PWI参数对肝纤维化的诊断效能,探讨肝纤维化严重程度的最佳检测指标。结果随着肝纤维化进展,TTP逐渐延长且组间比较差异均有统计学意义(PMax Slope>AUC>Max conc。TTP诊断各期肝纤维化的阈值分别为:S1期1.714~<2.141 min、S2期2.141~<2.852 min、S3期2.852~<3.595 min、S4期≥3.595 min。结论食蟹猴肝纤维化模型的PWI参数随着肝纤维化进展而发生规律性变化,其中TTP是评价肝纤维化严重程度的最佳检测指标。

摘要：目的:尝试建立中间型综合征的logistic回归模型,以便较为客观地预测中间型综合征(IMS)的早期发生。方法:连续观察2000年4月～2009年2月广西医科大学附属三院收治的急性有机磷农药中毒患者136例,按成组设计分为IMS组27例与非IMS组109例。观察指标为入院24 h内的农药种类,服用剂量,复能剂量,洗胃次数,血糖,血钾,胆碱脂酶(AchE),红细胞,肝功白蛋白,年龄,是否出现烟碱样症状,呼吸骤停,阿托品化及导泻。采用logistic逐步回归方法筛选变量建立回归模型。结果:建立预测模型为:[LnR/(1-R)]=-1.844±2.196烟碱样症状-0.053胆碱酯酶。ROC曲线下面积为0.884;Hosmer-Lemeshow拟合优度检验P值为0.469,表明模型拟合较好。结论:烟碱样症状和AchE作为IMS的两个主要因素建立回归模型后可应用于IMS的早期预测。