摘要：目的应用蛋白质相互作用网络图，寻找鼻咽癌放射抗拒相关的分子标志物，探讨鼻咽癌放射抗拒机制。方法应用全基因组表达谱芯片，初步筛选出2种不同放射敏感性细胞株CNE-2R与CNE-2的差异表达基因。采用计算机软件随机选取4个差异表达基因，分别设计引物，用半定量RT—PCR技术检测验证。将2次实验中均出现的差异有统计学意义的基因导入SNOW在线数据库进行分析，绘制差异基因相互作用网络图，网络中心节点作为鼻咽癌放射抗拒相关分子标志物；进一步采用Westernblot检测关键节点STAT1在CNE-2R与CNE-2表达差异。结果CNE-2R与CNE-2相比，2次芯片实验中均出现的差异基因374个，其中差异有统计学意义的基因197个；随机选取的4个差异表达基因RT—PCR结果与芯片扫描结果相似，具有相同的方向性。197个共有的差异有统计学意义的基因编码蛋白经SNOW分析存在相互作用，并构成一个复杂的相互作用网络图，寻找到了关键性的节点为STAT1和JUN。Westernblot结果显示，STAT1-α在CNE-2R中表达明显高于CNE-2（t=4．96，P〈0．05）。结论关键性的节点STAT1和JUN可能是引起鼻咽癌放射抗拒的分子标志物，STAT1-α可能与鼻咽癌放射抗拒发生密切相关。

摘要：目的 利用RNA干扰技术抑制放射抗拒人鼻咽癌细胞系CNE-2R中高表达的c-jun基因,研究其对CNE-2R细胞放射敏感性的影响及其潜在机制.方法 设计合成3组特异性针对c-jun基因的siRNA,构建慢病毒vshRNA载体,感染CNE-2R细胞,采用RT-PCR和Western blot方法检测各组对目的基因的抑制效果;并通过克隆形成实验测定其放射敏感性,CCK-8实验检测细胞的存活能力,流式细胞术检测细胞凋亡率.结果 重组慢病毒c-jun-RNAi-LV2能明显下调CNE-2R细胞中c-jun的mRNA和蛋白水平的表达（F =217.20、42.07,P＜0.05）.6MVX射线联合c-jun-RNAi-LV2组在0、2、4、6和8 Gy照射后细胞的吸光度值均显著低于未转染组和阴性对照组（F=42.70 ～ 200.67,P＜0.05）.克隆形成实验显示,c-jun-RNAi-LV2组与未转染组及阴性对照组相比,SF2、D0和Dq值均减小,放射增敏比（SERD0）为1.41.细胞凋亡实验结果显示,未经照射的c-jun-RNAi-LV2组与联合2 Gy照射的凋亡率分别为（20.93±1.99）％和（38.17±0.83）％,均高于未转染组和阴性对照组的凋亡率[0 Gy：（10.97±0.70）％和（20.43±0.25）％;2 Gy：（10.80±1.25）％和（19.53±1.50）％;F=50.54、330.14,P＜0.05].结论 RNA干扰技术可有效抑制放射抗拒人鼻咽癌细胞系CNE-2R中高表达的c-jun基因,使细胞放射敏感性增高,其作用可能与c-jun基因的下调使细胞增殖能力减弱,细胞凋亡增多有关.