摘要：目的通过构建Dectin-1慢病毒过表达载体,感染巨噬细胞RAW264.7,建立Dectin-1过表达的巨噬细胞模型。方法根据小鼠Dectin-1基因序列设计引物,经PCR扩增目的基因后克隆至载体pLenti6.3-IRES2-EGFP/V5 DEST(MCS),获得重组质粒pLenti6.3-dectin-1-IRES-EGF。经和包装质粒Mix共同转染293T细胞,收获慢病毒,利用293T细胞大量扩增慢病毒并进行慢病毒的滴度测定,根据MOI值感染巨噬细胞RAW264.7,经荧光显微镜和荧光定量PCR鉴定感染慢病毒组和感染空病毒组中Dectin-1基因的表达。结果 PCR和测序结果证明已成功构建pLenti6.3-dectin-1-IRES-EGFP,成功包装慢病毒,计算慢病毒滴度为3.12×10~9 Tu/mL,成功感染巨噬细胞RAW264.7,荧光显微镜下可见绿色荧光,RT-PCR检测到感染重组慢病毒组Dectin-1表达量是感染空病毒组的1 275倍(P<0.01)。结论成功构建Dectin-1基因过表达的巨噬细胞模型,为进一步研究Dectin-1基因在巨噬细胞对抗真菌感染中的作用打下基础。

摘要：目的:筛选特异性抑制人-单核巨噬细胞TLR2基因表达的siRNA(small interference RNA)序列,在分子水平上初步讨论其在HIV治疗方面的前景。方法:在基因库中寻找TLR2基因的mRNA序列,针对TLR2基因设计并合成3条siRNA,阳性对照为人类看家基因GAPDH siRNA,阴性对照为6-羧基荧光素标记的siRNA(NC-FAM)。采集健康人新鲜外周血,分离单个核细胞,再经贴壁法培养纯化为人-单核巨噬细胞。采用阳离子脂质体试剂Lipofectamine 2000介导转染培养的人-单核巨噬细胞。用q-PCR法测定干扰后单核巨噬细胞的TLR2 mRNA的表达,Western blot法测定干扰后TLR2蛋白表达。结果:转染72 h后,阳性对照组GAPDH mRNA及蛋白的表达明显降低(P<0.05)。siRNAs组TLR2 mRNA表达水平整体有显著性差异(F=41.957,P<0.001),与阴性对照组比较,TLR2 siRNA各组的TLR2 mRNA相对表达水平均明显降低(P<0.05),抑制率分别为46%、43%、43%。WB结果显示,TLR2 siRNA各组的TLR2蛋白表达量显著降低(P<0.05)。结论:本研究设计的siRNA能够有效抑制人-单核巨噬细胞TLR2基因的表达,从分子免疫学角度出发,表明通过阻断siRNA介导的TLR2信号传导通路能够为HIV治疗提供新思路。

摘要：目的基于国内艾滋病流行现状,以丹皮酚抗菌消炎、调节代谢、调理免疫、抗肿瘤、抗病毒等药理活性为基础,进一步明确丹皮酚的抗人类免疫缺陷病毒(Human immunodeficiency virus,HIV)-1活性,为新型抗HIV药物的研发提供依据。方法建立TZM-bl-HIV-1IIIB细胞系统,设计细胞毒性实验及抗病毒活性实验,通过检测荧光素酶报告基因在TZM-bl细胞中的表达水平,探讨丹皮酚的毒性及抗HIV-1活性。结果在细胞毒性实验及抗病毒活性实验中,细胞存活率及抗HIV-1IIIB活性均与药物浓度呈剂量依赖关系,且通过Graphpad Prism 5软件计算出丹皮酚对TZM-bl细胞的半数细胞毒性浓度(concentration of cytotoxicity 50%,CC50)为208.00μM,丹皮酚对HIV-1IIIB的半数抑制浓度(median effective concentration,IC50)>48.14μM,治疗指数(therapeutic index,TI)为4.32。结论多酚类化合物已在近年研究中被发现具备抗HIV的生物活性,丹皮酚属植物多酚类药物,既往研究表明其通过多靶点多通路机制表现出多种药理活性,本次实验中其表现出抗病毒活性强兼自身毒性弱的特点。可见丹皮酚具有一定的抗HIV-1活性,能为研发抗HIV-1药物提供新参考,促进抗HIV-1药物的研制。

摘要：目的分析广西壮族自治区(简称广西)龙州县越南籍妇女HIV检测现状及其相关的影响因素,为提高越南籍妇女HIV检测覆盖率提供科学依据。方法2019年应用自行设计的调查问卷对龙州县内越南籍妇女HIV检测情况开展调查,并用Logistic回归分析对HIV检测的影响因素。结果研究共调查413名越南籍妇女,平均年龄(45±17)岁;嫁入中国时间≤25年者占72.4%(299/413);既往接受HIV检测率25.9%(107/413)。多因素Logistic回归分析既往接受HIV检测的结果显示,年龄≤49岁(OR=2.598,95%CI:1.310~5.151)、已结婚登记(OR=2.147,95%CI:1.222~3.774)、获得HIV知识途径是报刊(OR=6.176,95%CI:2.165~17.615)、书籍(OR=3.828,95%CI:1.531~9.569)是既往进行HIV检测的积极影响因素;回过越南(OR=0.348,95%CI:0.185~0.653)是既往进行HIV检测的阻碍因素。结论目前龙州县越南籍妇女的HIV检测率仍比较低,相关政府部门应提高认识,针对特殊年龄段,加大对该人群的管理和监测力度,采用恰当的知识宣传方式,加强HIV免费咨询检测,提高HIV检测覆盖率。

摘要：目的了解广西地区南宁、柳州、北海市女性性工作者（Fsws）对暴露前药物预防（PrEP）HIv感染的接受意愿及其影响因素。方法采用横断面设计，方便抽样的方法选取3市405名FSWs进行问卷调查，了解FSWs的AIDS相关危险行为、对PrEP的知晓情况及其接受意愿。结果在了解PrEP后，对于“如果PrEP预防HIV感染安全、有效且免费提供”，405人中有85．9％表示愿意接受。logistic回归分析显示，与PrEP接受意愿有关的因素为：工作场所（OR=2．256，P=0．009）、月经济收入（OR=0．257，P=0．004）、与家人的关系（OR=0．338，P=0．012）、AIDS知晓情况（OR=2．802，P=0．028）、认为HIV感染危险来自陌生性伴（OR=o．363，P=0．049）、老板是否规定使用安全套（OR=0．432，P=0．010）、商业性行为时是否全程使用安全套（OR=3．010，P=0．002）、是否使用过药物预防性病（OR=3．570，P=0．049）。结论对HIV／AIDS相关知识的知晓程度及自我保护意识的高低可能是影响FSWs接受PrEP的主要因素。以健康教育的形式官侍PrEP旱提高其接蛋意愿的较好方式。

摘要：目的:探讨广西地区未进行抗病毒治疗的基因1型丙型肝炎患者对NS5A抑制剂的天然耐药突变情况。方法:收集2013年5月至2017年11月在广西医科大学第一附属医院感染性疾病科门诊就诊的基因1型丙型肝炎患者134例。提取患者的HCV RNA,设计针对NS5A区域的特异性引物进行巢式PCR扩增,PCR产物经纯化后测序,进行序列比对和耐药分析。结果:134例样本中有119例(基因1a型19例,基因1b型100例)扩增成功,其中53例(44.5%)存在天然耐药位点突变。基因1a型NS5A区7例(36.9%)存在耐药突变(Q30H,n=1,5.3%;H58P,n=1,5.3%;M28T+H58P,n=1,5.3%;H58P+E62D,n=4,21.0%)。基因1b型有46例(46.0%)存在天然耐药突变(R30Q,n=23,23.0%;Y93H,n=6,6.0%;Q54H,n=4,4.0%;P58S,n=4,4.0%;Q54H+P58S,n=4,4.0%;L31M+R30Q,n=2,2.0%;Q54H+R30Q,n=2,2.0%)。结论:广西地区未接受抗病毒治疗的基因1型丙型肝炎患者中有部分患者存在针对NS5A抑制剂的天然耐药位点突变,其突变有单位点突变也有联合位点突变。

摘要：目的了解南宁市产妇对产后康复治疗的认知和需求情况。方法自行设计问卷对南宁市494例产妇进行线上+线下调查,了解其对产后康复治疗的认知和需求情况。分析不同特征产妇对产后康复治疗的知晓率及对产后康复治疗的需求。采用Logistic回归模型分析产妇知晓产后康复治疗的影响因素。结果494例产妇中,有95.7%(473/494)的产妇产后6个月出现产后相关症状,54.7%(270/494)的产妇知晓产后康复治疗,96.6%的产妇(477/494)表示对产后康复治疗有需求。不同年龄、学历、家庭月收入、职业的产妇对产后康复治疗的知晓率差异均具有统计学意义(均P0.05)。Logistic回归分析结果显示,与年龄>40岁的产妇相比,年龄在19~28岁的产妇对产后康复治疗知晓率较高,与家庭月收入水平>20000元的产妇相比,家庭月收入≤10000元的产妇对产后康复治疗知晓率较低。结论南宁市产妇对产后康复治疗的知晓率较低,而对产后康复需求率较高。年龄和家庭月收入是影响产妇知晓产后康复治疗的因素。