摘要：背景:氯胺酮是否可通过影响脊髓水平的伤害性信息的传递而发挥抗伤害作用尚不清楚;一氧化氮在脊髓水平主要参与痛觉过敏的形成和发展,可诱导Fos表达,但其是否参与了氯胺酮对痛信号的转导或调控的机制不明。目的:观察大鼠脊髓对甲醛痛刺激的反应及氯胺酮的影响。设计:均衡随机的动物实验。单位:徐州医学院附属医院麻醉科和江苏省麻醉学重点实验室。材料:实验于2000-01/03在徐州医学院江苏省麻醉学重点实验室进行。取SD大鼠30只,用均衡随机方法分为6组熏甲醛组6只,甲醛+氯胺酮组6只,氯胺酮+甲醛组6只,氯胺酮组6只,甲醛+生理盐水组3只,生理盐水组3只,各组雌雄比例相同。方法:①甲醛组:体积分数为0.05的甲醛200μL一侧前爪掌心皮下注射,刺激1h。②甲醛+氯胺酮组:甲醛痛刺激10min后腹腔注射100mg/kg氯胺酮1h。③氯胺酮+甲醛组:腹腔注射氯胺酮10min后再行甲醛痛刺激1h。④氯胺酮组:腹腔注射同等剂量氯胺酮1h。⑤甲醛+生理盐水组:甲醛痛刺激10min后腹腔注射等容(10mL/kg)的生理盐水1h。⑥生理盐水组:腹腔注射等容生理盐水1h。主要观察指标:①各组大鼠行为学表现。②取脊髓切片,用c-fos基因免疫组化法和NADPH-d组化技术染色,观察大鼠脊髓背角4层(Ⅰ～Ⅱ层,Ⅲ～Ⅳ层,Ⅴ～Ⅵ层,Ⅶ～Ⅹ层)切片Fos样免疫阳性神经元(FLI)和FLI/NOS双标记神经元的数目变化。结果:30只大鼠全部进入结果分析。①行为学变化:甲醛组及甲醛+生理盐水组大鼠注射甲醛后,出现痛反应;注射氯胺酮的大鼠,注射后数分钟内翻正反射消失,无明显的痛行为表现,而呈持续睡眠状态,至灌注时翻正反射仍未恢复。②FLI神经元表达:甲醛组及甲醛+生理盐水组大鼠注射侧脊髓背角出现大量FLI阳性神经元,主要分布在脊髓背角Ⅰ～Ⅱ层;氯胺酮+甲醛组、甲醛+氯胺酮组大鼠脊髓FLI细胞的分布与甲醛组及甲醛+生理盐水组基本相似,但FLI阳性细胞数量显著减少(P<0.01);氯胺酮组和生理盐水组大鼠脊髓未见或偶见FLI阳性细胞。③FLI/NOS双标记神经元表达:氯胺酮+甲醛组、甲醛+氯胺酮组脊髓背角Ⅰ～Ⅱ层双标记神经元数目显著少于甲醛组及甲醛+生理盐水组眼(1±1),(1±1),(7±3),(8±3)个/切片,P<0.01演,氯胺酮组和生理盐水组无表达。结论:同侧相应脊髓节段的某些神经元参与了化学性致痛信息的传导和调控,氯胺酮通过抑制这些神经元的活动而产生抗伤害作用;此作用与抑制脊髓内一氧化氮合酶阳性神经元的活性有关。

摘要：背景:定量药物脑电图可反映大脑皮质功能,全麻药物对脑皮质功能有肯定影响,由于麻醉深度与麻醉剂量有很好的相关性,若能找出与麻醉药剂量相关性好的定量药物脑电图的脑区与频段,则此频段可能成为反映麻醉深度的指标。目的:观察异丙酚对家兔定量药物脑电图α2频段的影响。设计:随机对照动物实验。单位:徐州医学院江苏省麻醉学重点实验室。材料:实验在徐州医学院动物实验室进行。取健康成年白兔36只,随机均分为异丙酚2.5,5,10mg/kg3组,每组12只,其中6只用于观察定量药物脑电图各频段功率百分比变化,另外6只用于观察兔翻正反射消失的潜伏期和持续期。方法:每日14:00～17:00进行实验。3组兔分别静脉注射异丙酚2.5,5,10mg/kg,药物均在30s内匀速注完。①将清醒兔俯卧位固定在兔台上,采用功率谱分析法,分别记录3组兔给药前和给药后20,30,40,50,60,70,80,90,100,110s,2,5,10,15,20,30min的定量药物脑电图。每时间点采样时间为5s。②记录兔翻正反射消失的潜伏期和持续期。结果:36只兔全部进入结果分析。①兔静脉注射异丙酚后,翻正反射均在1min内消失。剂量越大,潜伏期越短,持续期越长(r=0.79,P0.05);5mg/kg时,各脑区α2频段的功率百分比在给药后升高(P<0.05);10mg/kg时,除左右顶区与2.5mg/kg组差异无显著性外,各脑区α2频段的功率百分比较给药前及前两个剂量组均下降(P<0.05),以上变化以额、颞区最为明显。结论:异丙酚对兔定量药物脑电图α2频段的功率百分比的影响呈双向型,提示α2频段可能成为反映异丙酚麻醉深度的指标。

摘要：背景:脑缺血-再灌注损伤与 Kinesin 活性密切相关,研究认为微管运动蛋白 Kinesin 活性下降是脑缺血后神经细胞死亡的早期标志。黄芩素甙可以防止脑缺血-再灌注诱发的蛋白激酶 C 的激活、减轻钙超载,且可减小缺血梗死灶的体积,从而减轻脑缺血-再灌注损伤。但是黄芩素甙脑保护作用是否与 Kinesin 活性有关,目前很少报道。目的:观察黄芩素甙对脑缺血-再灌注期间海马锥体细胞微管运动蛋白Kinesin 活性的变化。设计:随机对照实验。单位:济宁医学院附属医院麻醉科及徐州医学院附属医院江苏省麻醉学重点实验室。材料:实验于 1999-02/08在江苏省麻醉学重点实验室完成。选用雄性沙土鼠 35只。方法:将沙土鼠随机分成假手术组(5只)、缺血再灌注对照组(15只)和黄芩素甙组(15只)3组,根据再灌注时间将缺血再灌注对照组和黄芩素甙组分为 3个亚组,即再灌注Ⅰ组(再灌注 6h)、再灌注Ⅱ组(再灌注 48h)和再灌注Ⅲ组(再灌注 96h)。每亚组 5只动物。缺血再灌注对照组和黄芩素甙组制备沙土鼠前脑缺血-再灌注损伤模型,脑缺血时间为 10m in。假手术组仅游离双侧颈总动脉但不予阻断。黄芩素甙组于缺血前 15m in 给予灯盏花素(其有效成分为黄芩素甙)45m g/kg腹腔注射,假手术组和缺血再灌注对照组则给予等量的生理盐水灌胃。应用免疫组织化学染色方法结合计算机图象分析技术测定海马微管运动蛋白 Kinesin 的活性。主要观察指标:各组动物 Kinesin 的活性及其变化。结果:纳入实验的动物为 35只,均进入结果分析,无实验动物脱失。在海马 CA1区,缺血再灌注对照组缺血-再灌注 6,48和 96h 时微管运动蛋白 Kinesin 活性分别降至假手术组的 58%,38%和 12%(P 均<0.01),而黄芩素甙组在再灌注 6,48和 96h 后,微管运动蛋白 Kinesin 活性分别为假手术组的 81%,61%和 21%,均明显高于缺血再灌注对照组(P均<0.05)。在海马 CA2,CA3和 CA4区,微管运动蛋白 Kinesin 的活性无明显变化。结论:黄芩素甙可通过抑制脑缺血-再灌注期间海马 CA1区微管运动蛋白 Kinesin 活性的下降达到脑保护作用。

摘要：背景:脑缺血-再灌注后能量代谢障碍和脑水肿是脑缺血-再灌注损伤重要因素之一。中药灯盏花素注射液(其有效成分为黄芩素甙)可以防止脑缺血-再灌注诱发的蛋白激酶C的激活、减轻钙超载,且可减小缺血梗死灶的体积,从而减轻脑缺血-再灌注损伤。可灯盏花素注射液对脑缺血-再灌注后能量代谢和脑水肿有何影响?目的:观察灯盏花素注射液对沙土鼠脑缺血-再灌注后能量代谢和脑水肿的影响。设计:随机对照实验。单位:济宁医学院附属医院及徐州医学院附属医院江苏省麻醉学重点实验室。材料:实验于1999-02/08在江苏省麻醉学重点实验室完成。选用雄性沙土鼠72只。方法:将实验动物随机分成3组,即假手术组、常温对照组和灯盏花素组,假手术组8只,常温对照组和灯盏花素组每组各32只。根据再灌注时间将常温对照组和灯盏花素组分4个亚组,即缺血末组、再灌注10min组、再灌注30min组和再灌注60min组。每亚组8只动物。常温对照组和灯盏花素组制备前脑缺血-再灌注损伤模型,脑缺血时间为10min。假手术组仅游离双侧颈总动脉但不予阻断。灯盏花素组于缺血前15min给予灯盏花素注射液90mg/kg腹腔注射,假手术组和常温对照组则给予等量的生理盐水。脑水的测定采用干湿重法,应用高效液相及紫外检测仪测定海马三磷酸腺苷,二磷酸腺苷,磷酸腺苷的含量。主要观察指标:①实验动物海马三磷酸腺苷、二磷酸腺苷、磷酸腺苷的含量。②实验动物脑皮质水含量。结果:纳入实验的动物为72只,均进入结果分析,无实验动物脱失。①实验动物海马三磷酸腺苷、二磷酸腺苷、磷酸腺苷的含量:常温对照组在缺血末、再灌注10min、再灌注30min、再灌注60min时,海马组织三磷酸腺苷和腺苷酸池含量明显降低,三磷酸腺苷含量分别为假手术组的68%,56%,49%和50%(P均<0.01),腺苷酸池含量为假手术组的62%,50%,51%和52%(P均<0.01)。而灯盏花素组各时间点三磷酸腺苷含量分别为假手术组的84%,69%,64%和63%,腺苷酸池含量为假手术组的86%,72%,68%和69%,均明显高于常温对照组(P均<0.05)。②实验动物脑皮质水含量:脑缺血-再灌注后常温对照组脑皮质水含量明显高于假手术组(P<0.05),并且随再灌注时间的延长逐渐加重。灯盏花素组脑皮质水含量虽明显高于假手术组,但明显低于常温对照组(P<0.05)。结论:灯盏花素可能通过抑制能量代谢障碍、减轻脑水肿而发挥脑保护作用。

摘要：目的观察咪达唑仑、盐酸戊乙奎醚单用、合用对小鼠学习记忆的影响。方法80只昆明(KM)小鼠分层随机区组设计,分为咪达唑仑(***-1,midazolan,Mid)组、盐酸戊乙奎醚(***-1,penehyclidine hydrochloride,Pen)组、咪达唑仑+盐酸戊乙奎醚(***-1Mid+***-1Pen,Mid+Pen)组及生理盐水(***-1,NS)组,每组20只;每组再随机分为测试记忆获得组和巩固组,每组10只。采用避暗实验,以训练前/后给药分别评估药物对小鼠记忆获得或巩固的影响。比较各组避暗实验训练后d1、2、3、4、5、6和7测验所得的潜伏期和错误次数。结果①Mid单用或与Pen合用对记忆的获得和巩固均有抑制作用;②Mid合用Pen与Mid单用相比,不加重对记忆获得的抑制,而明显加重对记忆巩固的抑制,且合用比单用抑制记忆时间长。结论Mid和Pen联合使用,对小鼠学习记忆产生明显影响。

摘要：目的观察七氟烷麻醉后对大鼠不同脑区、不同时期腺苷酸环化酶及磷酸二酯酶活性的影响,探讨3’,5’-环腺苷酸(cAMP)在七氟烷麻醉中的作用。方法SD大鼠40只,分层随机区组设计分成5组,每组8只,吸入1.5%的七氟烷,分别在未吸入七氟烷时(对照组)、翻正反射即将消失时(诱导期组)、翻正反射消失后2min(麻醉期组)、翻正反射恢复即刻(恢复期组)和翻正反射恢复后1h(清醒期组)断头取脑。放射免疫法测定大脑皮质、海马和脑干的腺苷酸环化酶(AC)活性及磷酸二酯酶(PDE)活性。结果(1)在对AC活性影响上,与对照组比较,诱导期组、麻醉期组的皮质、海马、脑干及恢复期组皮质、海马AC活性升高;与麻醉期组比较,清醒期组皮质、海马、脑干AC活性降低。上述差异均有统计学意义(均P<0.05)。(2)在对PDE活性的影响上,与对照组比较,诱导期组、麻醉期组皮质、海马、脑干PDE活性下降;与麻醉期组比较,恢复期组、清醒期组皮质、海马、脑干PDE活性升高。上述差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论cAMP在七氟烷的全麻机制中可能发挥重要作用。

摘要：目的观察异氟醚麻醉后大鼠不同脑区、不同时期cAMP含量的动态变化,探讨cAMP在其麻醉中的作用。方法SD大鼠40只,分层随机设计均分成5组,每组8只,吸入1.5%异氟醚,分别在未吸入异氟醚时(对照组)、翻正反射即将消失时(诱导期组)、翻正反射消失后1 min(麻醉期组)、翻正反射恢复即刻(恢复期组)和翻正反射恢复后1 h(清醒期组)断头取脑。放射免疫法测定大脑皮层、海马和脑干的cAMP含量。结果在皮层,与对照组相比,cAMP含量在诱导期组即升高(P<0.05),麻醉期组进一步升高(P<0.01),恢复期组迅速下降至对照组水平。在海马,与对照组相比,各组cAMP含量均无明显变化。在脑干,与对照组比,仅麻醉期组cAMP含量升高(P<0.05),而其他组无显著变化。结论异氟醚升高大脑皮层及脑干cAMP含量(而对海马却无影响),提示cAMP在异氟醚的全麻机制中可能发挥重要作用。

摘要：背景:海马CA1区锥体细胞是对缺血缺氧性损伤最为敏感的神经元,缺血缺氧后海马CA1区锥体细胞膜电位表现为缺氧早期细胞膜的超极化,随着缺氧时间的延长,细胞膜发生缓慢去极化及快速去极化,引起神经元不可逆性损伤。目的:应用细胞内记录技术,观察N-甲基-D-天冬氨酸受体阻断剂MK801对离体海马脑片CA1区锥体细胞缺氧期间电生理指标的变化。设计:观察对比实验。单位:解放军第九七医院,徐州医学院江苏省麻醉学重点实验室,Healthy-ScienceCenter,StateUniversityofNewYork。材料:实验于2002-09/2003-02在美国纽约州立大学医学中心完成。选择成年雄性SD大鼠5只,预吸纯氧3min后以体积分数为0.02的异氟醚麻醉,快速断头取脑,制备离体海马脑片。方法:大鼠海马脑片随机分为单纯缺氧组和MK801组,每组10个。单纯缺氧组海马脑片给予10min缺氧;而MK801组的海马脑片在缺氧前10min及10min的缺氧期间分别应用100μmol/L的MK801。所有脑片均给予60min的复氧。应用细胞内记录技术记录海马CA1区神经元缓慢去极化及快速去极化的时间、快速去极化的幅度。在复氧末,应用细胞内注入电流及经Schaffer通路刺激,观察神经元对刺激的反应。主要观察指标:①两组海马CA1区锥体神经元缓慢去极化速率。②两组海马CA1区神经元的快速去极化时间。③两组海马CA1区神经元的快速去极化幅度。④MK801对海马CA1区神经元功能恢复的影响。结果:①海马CA1区锥体神经元缓慢去极化速率:单纯缺氧组显著高于MK801组[(0.20±0.05)mV/s,(0.08±0.03)mV/s,(P<0.05)]。②海马CA1区神经元的快速去极化时间:MK801组显著高于单纯缺氧组[(537±139)s,(261±26)s,(P<0.05)]。③海马CA1区神经元的快速去极化的幅度:MK801组显著小于单纯缺氧组[(4±13)mV,(53±7)mV,(P<0.05)。④在复氧末期,MK801组的10个神经元中,9个神经元恢复对刺激的反应。结论:N-甲基-D-天冬氨酸受体阻断剂MK801可以显著降低缺氧引起的神经元缓慢去极化速率,延缓神经元快速去极化的发生及降低快速去极化的幅度,说明N-甲基-D-天冬氨酸受体阻断剂可显著减轻神经元的缺氧性损伤,促进复氧后神经元功能的恢复。

摘要：目的探讨瑞芬太尼和异丙酚对健康成人静脉血中性粒细胞（PMNs）CD11b表达的影响。方法取成人静脉血，采用正交实验设计确立实验因素为瑞芬太尼和异丙酚；实验水平数为5水平，即瑞芬太尼空白对照、溶媒（甘氨酸）对照、5ng／ml、50ng／ml、500ng／ml和异丙酚空白对照、溶媒（脂肪乳）对照、5μg／ml、50μg／ml、500／μg／ml，用正交表L25（5^6），观察药物对静息状态和脂多糖（LPS）激活状态PMNs下CD11b表达的影响，对激活状态的PMNs根据用药时机的不同又分为预防性用药和治疗性用药。预防性用药加入药物后1h用终浓度为1μg／ml的LPS进行刺激；治疗性用药在LPS刺激后1h加药。各标本均放入37℃、95％的空气-5％的CO2培养箱中孵育3h，其间每隔1h混匀1次。用流式细胞仪测定PMNs CD11b表达。结果瑞芬太尼和异丙酚对静息状态PMNs CD11b的表达无影响。预防性用药对PMNs CD11b表达的比较：与空白对照比较，5、50、500ng／ml瑞芬太尼可上调激活状态PMNs CD11b表达（P〈0．05或0．01）；与甘氨酸对照比较，50、500ng／ml瑞芬太尼可上调激活状态PMNs CD11b表达（P〈0．05和0．01）；异丙酚对激活状态PMNs CD11b表达无影响。治疗性用药对PMNs CD11b表达的比较：与空白对照和甘氨酸对照比较，500ng／ml瑞芬太尼可上调激活状态PMNs CD11b表达（P〈0．01）；与空白对照比较，50ng／ml异丙酚可上调激活状态PMNs CD11b表达（P〈0．05）。结论瑞芬太尼和异丙酚对PMNs的CD11b表达的影响可能与PMNs所处的状态、用药剂量以及用药时机有关。

摘要：目的对小鼠经跳台实验训练后自然遗忘的时间进行测定。方法70只昆明小鼠随机分层区组设计,按测验时间分为T1、T2、T3、T4、T5、T6和T7组,每组10只。分别于训练后24、48、72、96、120、148和172 h对小鼠进行测验,比较各组间小鼠的潜伏期和错误次数。结果各组小鼠训练时跳上时间和基础错误次数相似(P>0.05),表明各组小鼠基础智力水平相同。训练后T1、T2和T3组之间的错误次数和潜伏期相似(P>0.05);T1、T2和T3组与T4组相比,潜伏期延长、错误次数减少(P0.05)。T5、T6和T7组之间的错误次数和潜伏期相似(P>0.05)。结论小鼠于跳台实验训练后第4天开始出现遗忘。