摘要：秉承历史,展望未来。以讲述"我与西蒙"的故事为主题的第五届西蒙杯"织网高手邀请赛"成功落幕。在活动宣布启动到正式截止的五个月时间里,我们陆续收到了来自北京、上海、天津、重庆、青岛、郑州、南昌、合肥、广州、昆明、兰州、沈阳等大中型城市的50余篇有效来稿。在众多来稿中,大家以个人的见识和经历畅所欲言,从初步印象到具体实施、从技术创新到技术应用,既有对行业发展趋势的深度见解,也有对业内具体项目的深层剖析。这些不仅强化了我们对整个行业的思考,也为我们今后的发展提供了方向。我们将陆续刊登本次竞赛的优胜文章,与全国各地的业界同仁共同分享。

摘要：目的评估苯磺酸氨氯地平联合氯沙坦钾治疗原发性轻、中度高血压患者的疗效和安全性,并根据析因研究设计,探索两种药物对于降压效果影响的交互作用。方法本研究为一项为期8周、随机、双盲、析因设计、Ⅱ期、多中心临床研究。纳入299例原发性轻、中度高血压患者,并按照1∶1∶1∶1∶1∶1的比例随机分为6组:A组患者接受苯磺酸氨氯地平5mg模拟剂、氯沙坦钾50mg模拟剂和氯沙坦钾100mg模拟剂治疗;B1组患者接受氯沙坦钾50mg、苯磺酸氨氯地平5mg模拟剂、氯沙坦钾100mg模拟剂;B2组患者接受氯沙坦钾100mg、苯磺酸氨氯地平5mg模拟剂、氯沙坦钾50mg模拟剂治疗;B3组患者接受苯磺酸氨氯地平5mg、氯沙坦钾50mg模拟剂、氯沙坦钾100mg模拟剂治疗;C1组患者接受苯磺酸氨氯地平5mg、氯沙坦钾50mg、氯沙坦钾100mg模拟剂治疗;C2组患者接受苯磺酸氨氯地平5mg、氯沙坦钾100mg、氯沙坦钾50mg模拟剂治疗。分别在0、4、8周评估坐位舒张压和坐位收缩压及其变化值,并记录不良事件。结果治疗8周后,苯磺酸氨氯地平和氯沙坦钾联合用药组(5/50mg和5/100mg,C1+C2组)的坐位舒张压[(-13.2±9.3)比(-8.3±7.2)mmHg,F=-4.813,P0.1)。各组间不良事件发生率差异无统计学意义(P=0.689)。仅在A组(2.0%)和B3组(2.1%)各有1例重度不良事件发生。结论与单药方案相比,苯磺酸氨氯地平联合氯沙坦钾(5/50mg和5/100mg)方案治疗原发性轻、中度高血压患者有更好的降压效果,不增加不良事件发生率,且两种药物之间无交互作用。

摘要：多表位疫苗是指同时携带多个与目标抗原相关的表位以及辅助性表位的疫苗。因其在细胞免疫方面的独特优势,已成为肿瘤疫苗研究领域的热点之一。随着分子生物学及免疫学等学科的飞速发展,使得多表位疫苗的临床应用也有了很大的进展。本文主要对多表位疫苗的选择、设计及临床应用等方面作一综述。

摘要：本研究通过构建β-连环蛋白(β-catenin)特异的RNAi慢病毒表达载体,探讨阻断Wnt/β-catenin信号通路对骨髓间充质干细胞(MSC)生物学行为的影响。设计3对针对β-catenin mRNA不同位点的shRNA编码序列,分别连接到慢病毒载体质粒PLB中,构建PLB-β-catenin/shRNA1,PLB-β-catenin/shRNA2和PLB-β-catenin/shRNA3;将重组质粒与慢病毒包装质粒及包膜蛋白质粒共转染293FT细胞,收获病毒颗粒,浓缩后测定病毒滴度,感染MSC细胞,并应用流式细胞术分选GFP阳性细胞,Western blot和RT-PCR验证其对细胞内β-catenin基因表达的抑制效果,筛选干扰效率最高质粒;CCK-8法检测细胞增殖,Annexin-V/7-AAD法检测干扰后细胞凋亡情况,细胞划痕实验及Transwell实验检测MSC迁移能力。结果表明:构建的特异性慢病毒siRNA干扰组(PLB-β-catenin/shRNA2)能有效抑制β-catenin的mRNA和蛋白表达,并抑制细胞的增殖;而空载体对照组(PLB group)和正常对照组(control group)细胞增殖无明显变化,两组之间无显著的统计学差异(P>0.05);流式细胞术检测结果显示,采用血清饥饿法处理后,干扰组细胞的凋亡率明显增加,但两对照组之间无统计学差异(P>0.05);细胞划痕和Transwell实验显示,干扰组MSC的迁移能力明显降低,对照组细胞迁移能力无明显变化。结论:构建的特异RNAi慢病毒能够有效抑制β-catenin基因的表达,减少细胞内目的基因mRNA和蛋白的水平,从而对MSC细胞的增殖、凋亡和迁移能力产生重要影响。

摘要：目的:探讨干扰ADAM10基因对多发性骨髓瘤MM.1S细胞增殖与凋亡的影响及其作用机制。方法:设计4对针对ADAM10 mRNA不同位点的shRNA编码序列,分别连接到慢病毒载体质粒p LVshRNA-EGFP(2A)Puro中去,构建sh/ADAM10-1,sh/ADAM10-2,sh/ADAM10-3,sh/ADAM10-4和sh/Con;将重组质粒与慢病毒包装质粒及包膜质粒共转染293FT细胞,收获病毒颗粒,浓缩后测定病毒滴度,感染MM.1S细胞,流式细胞术分选GFP+细胞。利用实时定量PCR及Westem blot检测慢病毒载体介导的shRNA干扰ADAM10基因的作用。选取ADAM10下调最显著的细胞株,CCK-8法检测干扰ADAM10后细胞的增殖,Annexin V/7-AAD双染流式细胞术检测细胞存活与凋亡,定量PCR检测促凋亡基因BAD、BAK、BIK抑凋亡基因BCL-2、c-Myc以及Notch1及其下游靶基因Hes-1的转录变化。结果:成功构建了特异性干扰ADAM10表达的慢病毒载体,干扰ADAM10基因对MM.1S细胞的增殖具有抑制作用,并能诱导MM.1S细胞的凋亡,且促凋亡基因BAD、BAK表达升高,抑凋亡基因BCL-2、c-Myc表达降低。Q-PCR结果显示,干扰ADAM10后Notch1水平升高,Hes-1水平降低。结论:干扰ADAM10基因可显著抑制MM.1S细胞的增殖,促进其凋亡,其机制与Notch1信号通路有关。

摘要：目的:探索临床药师参与制定药物个体化治疗方案设计以及实施有效药学监护的思路。方法:以1例心肌梗死患者为例,从临床药师角度分析患者的病情特征和治疗原则,利用药学理论和循证药学的证据,与临床医师共同商讨和制定药物治疗方案,对患者实施药学监护。结果:临床药师参与对患者个体化治疗方案的制定,同时对患者进行密切的药学监护,提高了患者的药物治疗效果,减少了不良反应,确保患者用药安全,取得了满意的治疗效果。结论:临床药师通过参与个体化用药融入临床药物治疗团队,在对患者的治疗方面发挥越来越重要的作用,为特定患者选用适当的药物、适当的剂量和适当的时间的个体化用药方案将打破传统给药模式,从而进一步促进临床用药更加安全、有效、合理。

摘要：目的 探讨乳腺数字X线摄影管电压对辐射剂量和图像质量的影响.方法 （1）选择手动曝光模式,分别在钼/钼（Mo/Mo）、钼/铑（Mo/Rh）、铑/铑（Rh/Rh）3种阳极靶/滤过组合下,采用25、28和31 kVp 3种管电压以32 ～ 140 mAs范围内的14个管电流值对CIRS 015乳腺模体曝光（相当于50％的腺体和50％的脂肪、压迫厚度为4.2 cm的乳腺）.记录每次曝光的皮肤入射剂量（ESE）和平均腺体剂量（AGD）；测量图像的信噪比（SNR）、对比噪声比（CNR）和品质因素（FOM）,计算上述参量的平均值,比较相同靶/滤过组合不同管电压的AGD、ESE、ESE/AGD、SNR CNR和FOM均数.统计方法采用随机区组设计的方差分析.（2）选择手动曝光模式,采用Mo/Rh滤过组合和固定管电流56 mAs以23 ～ 33 kVp范围内的11个管电压值,对CIRS 015乳腺模体曝光,记录每次曝光后系统显示的AGD和ESE值,测量计算图像的SNR、CNR和FOM值,绘制AGD、ESE、ESE/AGD、SNR、CNR和FOM变化曲线.结果 Mo/Mo组合时25、28和31 kVp的AGD、ESE、SNR、CNR、FOM值分别为（1.25±0.56） mGy、（6.46±2.86） mGy、71.52 ±8.37、1.91±0.26、3.21±0.68,（1.94±0.85） mGy、（9.18 ±4.07） mGy、144.46±11.31、2.41 ±0.28、3.37±0.96和（3.01±1.38） mGy、（12.60±5.59） mGy、128.89±15.29、2.47 ±0.31、2.31±0.76; Mo/Rh组合时为（1.23±0.55） mGy、（5.26±2.33） mGy、67.31 ±4.11、1.82 ±0.19、3.01±0.82,（1.86±0.84） mGy、（7.57±3.34） mGy、139.54±12.16、2.30±0.25、3.23±0.92和（2.81±1.24） mGy、（10.48 ±4.62） mGy、127.77±15.14、2.59 ±0.31、2.67±0.68；Rh/Rh组合时为（1.09 ±0.48） mGy、（4.89±2.16） mGy、67.46±2.23、1.48±0.72、3.08±1.69,（1.75 ±0.78） mGy、（6.88 ±3.03） mGy、137.74±14.65、2.37 ±0.26、3.62±1.07和（2.59±1.13） mGy、（9.32 ±4.12） mGy、117.91±19.05、2.51 ±0.31、2.74±0.84.两种实验方法均显示：相同靶/滤过组合的AGD、ESE和CNR值随着管电压的升高而升高,ESE/AGD随着管电压的升高而下降.实验1表明28 kVp的SNR和FOM均高于25 kVp和31 kVp.实验2显示SNR和FOM曲线均呈逐渐下降趋势.统计分析表明：不同管电压的AGD、ESE、ESE/AGD、SNR、CNR和FOM值差异均存在统计学意义（F值为4.391～528.848,P值均＜0.05）.其中,Mo/Mo和Rh/Rh组合时28 kVp与31 kVp的CNR值差异无统计学意义（P值均＞0.05）；3种靶/滤过组合25 kVp与28 kVp之间的FOM值差异均无统计学意义（P值均＞0.05）.结论 对于压迫厚度4.2 cm,50％脂肪和50％腺体乳腺,不同管电压对辐射剂量和图像质量具有显著影响.

摘要：目的肿瘤干细胞是肿瘤复发和转移的原因。探讨CD133基因RNA干扰(RNA interference,RNAi)的重组质粒,对人肝癌细胞株MHCC-H的CD133基因表达、上皮间质化和侵袭能力的影响。方法通过免疫磁珠分选MHCC-H细胞中的CD133阳性细胞,设计并合成特异性靶向CD133的小分子干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)片段,并构建pSuper retro GFP-neo-siRNA-CD133表达质粒,将其转入MHCC-H-CD133+细胞,并设空白对照组、阳性对照组。通过G418筛选出稳定株。通过粘附实验、Boyden小室实验和软琼脂克隆形成实验观察各细胞株侵袭能力的变化。采用明胶酶法测定肝癌细胞的基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)和MMP-9的含量,蛋白质印迹法检测上皮间质化相关基因的变化。结果通过免疫磁珠分选后的MHCC-H细胞中CD133表达率为83.5%。qRT-PCR结果显示,shCD133组相对空白对照组的CD133表达量下降了80%,P<0.05。蛋白质印迹法检测结果显示,shCD133组的CD133表达明显下降,约为空白对照组的12%和shNC组的10%,均P<0.05。shCD133组的粘附能力为86.9±12.4,较空白对照组的568.5±53.2和shNC组的538.8±35.6明显下降,P<0.05。Boyden小室实验发现,shCD133组穿膜细胞数为(80.6±11.4)个,较空白对照组的(228.5±33.2)个和shNC组的(230.8±32.9)个明显减少,P<0.05。软琼脂克隆形成率的检测发现,shCD133的细胞克隆形成(60±5)个,比空白对照组的(178±23)个和shNC组的(168±25)个明显下降,P<0.05。明胶酶法检测发现,shCD133组MMP-2和MMP-9相对活性为0.4±0.14和0.6±0.16,较shNC组的1.03±0.19和1.3±0.16明显下降,P<0.05。蛋白质印迹法检测结果表明,shCD133组N-cadherin蛋白表达为36.3±4.5,Snail为53.6±6.7,Slug为41.63±5.6,Twist为39.4±3.9,均明显低于空白对照组的87.6±8.6、80.6±7.5、81.9±9.2和83.9±9.1,也明显低于shNC组的89.4±9.6、83.5±8.9、85.1±8.7和87.6±9.3,均P<0.05;而shCD133组E-cadherin表达为88.4±9.2,较空白对照组的57.6±8.7和shNC组的53.9±8.9明显上调,P<0.05。结论沉默MHCC-H细胞CD133基因的表达能有效抑制其上皮间质化和侵袭能力,CD133基因可能成为肝癌基因治疗的有效靶点。

摘要：目的研制一种新型的致大鼠不同程度脊髓损伤的打击装置,为制作大鼠脊髓损伤标准化模型提供新的科学手段。方法在打击锤两侧安装两个激光发射头,通过发射的两束激光的交点来确定打击锤的打击点。采用重物下落致伤技术及根据电磁吸附原理,设计高度调节电路,控制微型电机转动,通过涡轮涡杆精确调节打击锤的高度;设计时间控制电路,使打击时间恒定在100ms内完成。结果该打击仪能够实现定时、瞬时,定点、定高打击,可以制作不同程度的脊髓损伤模型。结论激光定位的电控大鼠脊髓损伤打击装置,具有操作简单、灵活方便、精确度高、可重复性好的特点。

摘要：目的 探讨脊髓神经激肽-1受体（NK-1R）在吸入麻醉药对小鼠抗伤害性效应中的作用.方法 昆明种小鼠320只,雌雄各半,体重20～25g,按分层随机区组设计,将小鼠随机分为4组（n=80）：生理盐水组（NS组）、恩氟醚组（E组）、异氟醚组（Ⅰ组）和七氟醚组（S组）,每组再分为4个亚组,Ⅰ组～Ⅳ组,每亚组20只.NS组腹腔注射生理盐水1.0 ml/kg,E组、Ⅰ组和S组分别腹腔注射恩氟醚0.5 ml/kg、异氟醚0.4 ml/kg和七氟醚2.0 ml/kg,腹腔注射结束后5 min时,Ⅰ组～Ⅳ组分别鞘内注射生理盐水5μl、Sar-SP（NK-1R激动剂）20、40和80ng.于腹腔给药前（基础状态）、鞘内给药后测定甩尾潜伏期（TFL）,于鞘内给药后1 min时行福尔马林实验,记录Ⅰ相和Ⅱ相累积舔足时间（PLT）.结果 与NS组比较,E组、Ⅰ组和S组相应亚组TFL延长,Ⅰ相和Ⅱ相PLT缩短（P＜0.05或0.01）;与Ⅰ组比较,E组、Ⅰ组和S组各其余亚组TFL缩短（P＜0.05）;E组、Ⅰ组和S组的Ⅱ组～Ⅳ组TFL均逐渐缩短（P＜0.05）;NS组、E组、Ⅰ组和S组各亚组间Ⅰ相和Ⅱ相PLT比较差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 脊髓 NK-1R与吸入麻醉药（恩氟醚、异氟醚、七氟醚）抗热刺激诱发的伤害效应有关,与其抗化学性刺激和炎性刺激诱发的伤害效应无关.