摘要：目的 观察重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（rhGM-CSF）联合重组牛碱性成纤维细胞生长因子（rb-bFGF）治疗化疗性口腔溃疡的效果.方法 将108例肿瘤科化疗引起口腔溃疡的患者按完全随机设计/成组设计分成两组,对照组54例先给予西地碘片含服,之后给予庆大霉素、地塞米松、2％利多卡因、0.9％氯化钠溶液制成的雾化剂,3次/d;治疗组54例先给予rhGM-CSF、地塞米松、0.9％氯化钠溶液配成的溶液含漱,再给予rb-bFGF喷涂溃疡面,3次/d.结果 治疗组有效率为96.30％（52/54）,优于对照组的64.81％（35/54）,两组比较差异有统计学意义（x2=17.08,P＜ 0.05）.结论 rhGM-CSF联合rb-bFGF治疗化疗性口腔溃疡疗效甚佳.

摘要：目的 构建靶向神经纤毛蛋白-1（NRP-1）基因的RNA干扰慢病毒表达载体[pLB-NRP-1/短发卡RNA（shRNA）],并观察其对人T淋巴瘤Jurkat细胞靶基因NRP-1的沉默效应.方法设计、合成3对人NRP-1的特异性干扰序列（NRP-1/shRNA1-3）和1对非特异性对照序列（NRP-1/shRNA4）,分别亚克隆至经Hpa Ⅰ、Xho Ⅰ双酶切线性化的慢病毒载体pLB中,得到pLB-NRP-1/shRNA重组慢病毒质粒;经酶切和测序鉴定成功后,与包膜质粒pCMV△8.91、被摸蛋白质粒pMD.G重组并包装成为慢病毒表达载体;将其感染至Jurkat细胞;分选阳性细胞后应用荧光定量聚合酶链反应（PCR）和Western blot检测对NRP-1 mRNA和蛋白表达的沉默效应.结果 酶切和测序结果证实3个靶向NRP-1基因的慢病毒载体构建成功,包装成慢病毒滴度可达108 IU/ml;感染Jurkat细胞后,NRP-1 mRNA表达量分别下降了95.9％、92.3％、87.1％,NRP-1蛋白的表达量分别下降了33.8％、29.7％、17.9％,与对照组比较差异有统计学意义（P＜0.05）,shRNA1为最佳干扰靶序,pLB-NRP-1/shRNA1为最佳干扰靶序列慢病毒表达载体.结论 成功构建慢病毒表达载体可高效感染体外培养的人Jurkat细胞株,并可显著抑制靶基因NRP-1 mRNA和蛋白的表达.

摘要：目的:研究雷帕霉素联合紫杉醇对人胃癌SGC-7901细胞增殖和凋亡的影响。方法:MTT法检测经雷帕霉素、紫杉醇和雷帕霉素+紫杉醇作用后人胃癌SGC-7901细胞的增殖抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡率,蛋白质印迹法检测缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1alpha,HIF-1α)及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)蛋白表达,两因素析因设计方差分析法进行统计分析。结果:雷帕霉素、紫杉醇及雷帕霉素联合紫杉醇处理SGC-7901细胞后细胞增殖抑制率分别为(25.43±1.98)%、(27.28±3.34)%和(53.64±1.99)%,雷帕霉素或紫杉醇单独作用均可抑制细胞增殖,联合作用对细胞增殖抑制率影响极显著,F=57.471,P1.15,雷帕霉素和紫杉醇具有协同作用。雷帕霉素、紫杉醇及雷帕霉素联合紫杉醇处理SGC-7901细胞后细胞凋亡率分别为(16.25±1.86)%、(21.80±3.12)%和(38.60±3.78)%,雷帕霉素或紫杉醇单独作用均可诱导细胞凋亡,两药联用细胞凋亡率显著增加,P=0.016 3;雷帕霉素和紫杉醇具有协同诱导SGC-7901细胞凋亡作用。紫杉醇处理细胞后,HIF-1α及VEGF蛋白相对表达量分别为0.598±0.089和0.420±0.091,VEGF蛋白表达下降,P=0.001;而HIF-1α蛋白表达无明显变化,P=0.434。雷帕霉素处理细胞后,HIF-1α及VEGF蛋白相对表达量分别为0.416±0.034和0.376±0.022,表达均显著下降,P值分别为0.016和0.001;而两药联合处理细胞后,HIF-1α及VEGF蛋白相对表达分别为0.209±0.027和0.156±0.015,均显著降低,F值分别为18.322和25.525,P值均为0.001。2种药物对SGC-7901细胞HIF-1α及VEGF蛋白表达抑制起到了显著的协同作用。结论:雷帕霉素联合紫杉醇可显著抑制人胃癌SGC-7901细胞增殖,诱导凋亡,2种药物具有协同抗肿瘤作用。

摘要：目的观察小干扰RNA（siRNA）抑制大鼠垂体生长激素腺瘤细胞（GH3）中垂体特异转录因子．1（Pit-1）的基因表达对其生物学行为的影响。方法设计合成针对Pit-1基因的siRNA，经脂质体包裹转染GH3细胞。采用Westernblot、逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）法测定经siRNA转染24h后；Pit．1蛋白和Pit-1mRNA表达；用细胞计数试剂盒（CCK-8）细胞增殖-毒性检测法检测细胞生长增殖的变化；用流式细胞仪检测细胞凋亡的改变；制备Transwell小室测定GH3细胞体外侵袭能力的变化。结果siRNA显著地抑制Pit-1蛋白和Pit-1mRNA的表达水平，分别降低58．18％和75．82％；CCK．8法结果显示siRNA组细胞增长率明显低于与阴性对照组；流式细胞仪分析显示，siRNA组细胞凋亡率[（9．25000±0．99695）％]较阴性对照组[（2．89330±0．66516）％]增加；，siRNA组穿过Matrigel胶及滤膜的细胞数[（92．91±53．25）个]，与阴性对照组[（7．50±7．95）个]比较侵袭力明显减弱，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论Pit-1siRNA能够有效地抑制GH3细胞的生长、促进其凋亡，降低侵袭力。

摘要：随着肿瘤分子生物学的发展,尤其是对肿瘤细胞增殖生长和转移过程中的信号转导通路作用机制研究的不断深入,继而为其特异性靶点而设计的分子靶向药物的开发,使肿瘤治疗已经进入了一个全新的时代。酪氨酸激酶受体HER家族中的HER2和EGFR在许多肿瘤中的过表达和（或）突变与许多肿瘤发生发展及预后密切相关,而以HER2和EGFR为靶向的胃癌治疗和针对其信号转导通路的信号转导干预治疗又备受关注。

摘要：目的重组构建hING4(人ING4)氨基酸序列。方法运用定点突变技术,在鼠ING4的基础上,设计两对突变引物P1、P2和P3、P4及全长ING4上下游引物P5、P6,通过四轮PCR,将mING4基因序列进行人源化改造,获得了编码hING4氨基酸的基因序列。将获得酶切目的基因片段,连接到转移载体pAdTrack-CMV上,形成重组转移载体pAdTrack-CMV-ING4。重组转移载体经PmeI酶切后与pAdEasy-1腺病毒载体在BJ5183大肠杆菌中同源重组,得到重组腺病毒载体pAdeasy-1-pAdTrack-CMV-ING4,经PacI酶切后脂质体转染QBI-293A包装细胞,获得重组腺病毒Ad-ING4。结果测序和RT-PCR结果表明hING4基因构建成功。结论hING4基因重组腺病毒载体构建成功。