摘要：目的 :构建过表达生长分化因子11(GDF11)的神经胶质瘤U251稳转细胞株。方法 :合成GDF11全长序列,构建HBLV-h-GDF11-3×flag-LUC-PURO慢病毒载体。将其与质粒pAX2和pMD2G共同转染293T细胞,收集上清并浓缩,获得慢病毒浓缩液。利用该慢病毒感染U251细胞,经嘌呤霉素筛选获得稳定过表达GDF11的细胞株,通过RT-PCR鉴定稳转细胞株中GDF11 mRNA的表达水平。结果 :测序结果与设计序列一致,慢病毒浓缩液滴度为3.0×10^(8) TU/mL,RT-PCR结果显示在该稳转细胞株中GDF11表达水平上调154倍。结论 :成功构建了稳定过表达GDF11的U251细胞株,为进一步研究GDF11在神经胶质瘤中的作用奠定了基础。

摘要：目的 :构建GAS41-shRNA慢病毒载体。方法 :合成GAS41干扰序列,构建GV118-GAS41-RNAi慢病毒干扰载体,连同包装质粒p Helper1.0和包膜质粒p Helper2.0共同转染293T细胞,收集储存病毒颗粒并进行滴度测定。结果 :构建的GAS41干扰慢病毒载体GV118-GAS41-RNAi经PCR和测序鉴定,结果与设计序列相符,收获病毒颗粒,测定滴度为5×108TU/m L。结论 :成功构建了GAS41-shRNA慢病毒载体,为后续进一步研究GAS41基因在视神经胶质瘤(optic nerve glioma,ONG)中的作用奠定了基础。