摘要：在全面推进高校课程思政建设的背景下,为落实立德树人的根本任务,各高校纷纷开展专业课程思政建设。以成都医学院的《生物化学与分子生物学》课程为例,文章深度挖掘该门课程所蕴含的思政元素,最终确定了7个典型的思政元素,并进行了相应的课程设计,采用案例式教学方法将其在实践中教学。课后,对成都医学院2019级临床医学、麻醉学、儿科学、医学影像学、药学和中药学等6个专业的888名学生发放调查问卷,检测其实施效果。结果表明,所开展的案例式思政教学能够较好地增强学生对该门课程的认可度,帮助学生树立良好的价值观念,初步达到了专业课思政教学的目的。最后,结合实施效果,本文从教学内容和方法的改进、课程思政教学团队的打造和思政教学评价机制的完善等方面展开了积极的探索,以期为专业课程全面实施课程思政提供借鉴。

摘要：目的探索适用于***1938菌株简并PCR的基因组DNA模板制备方案。方法采用微波法、石英沙法、氯化苄法、CTAB法、尿素法提取DNA,并通过特异PCR和简并PCR评价各种方案的优弊。结果 5种方法制备的DNA含量差异无统计学意义(F=2.355,P>0.05);DNA制备效率相近;特异性PCR结果一致,但氯化苄法制备的DNA经简并PCR扩增出的条带较多,目的条带更清晰。结论 5种方法均适于特异性PCR所需DNA模板的制备,但氯化苄法更适于***1938菌株简并PCR模板DNA的制备。

摘要：为建立一种以灭蚊真菌Pythium ***1938菌丝体为原材料的快速制备总蛋白的方法,分别采用7种方法对菌丝体进行破壁处理,于镜下观察比较破壁的效果,再通过SDS-PAGE蛋白质电泳和考马斯亮蓝染色分析,比较各种方法对细胞破壁后释放蛋白质效果的差异。结果显示,以石英沙作为助磨剂的液氮研磨法制备总蛋白效果最佳,蛋白显带最多,也最清晰;该方法还兼具快速、简便、经济等优点,是该真菌菌丝体蛋白制备的首选方法,为其后续蛋白质组学研究奠定基础。

摘要：为了探索提取贵阳腐霉Pythiumguiyangense菌株总RNA简便而有效的方法，我们分别采用石英沙研磨、超声波破碎、液氮研磨、液氮加石英沙研磨和溶菌酶消化5种方法破碎真菌细胞壁，再用市售RNAsimpletotal RNAkit试剂盒提取总RNA，最后通过对提取物进行琼脂糖凝胶电泳定性、紫外比色定量及PCR检测来评价各种破壁方法的优弊。结果显示液氮加石英沙研磨破壁法提取的真菌总RNA在5种方法中效率最高，OD260／OD280=2．093±0．264，RNA浓度为（0．134±0．021）μg／μL，RNA制备效率为（26．76±4．10）μg／g菌丝体，并且该方法操作简便，重复性最好，是制备***菌株总RNA的首选破壁方法。

摘要：目的建立适用于检测人胱抑素C(Cystatin C)的IgG与IgY双抗体夹心ELISA检测体系。方法以人Cystatin C作为抗原免疫产蛋的罗曼鸡和新西兰兔,纯化抗Cystatin C的鸡抗体IgY和兔抗体IgG,并分别建立三种ELISA夹心检测体系,I:捕捉抗体IgG+检测抗体IgY+抗鸡IgY酶标抗体;Ⅱ:捕捉抗体IgG+检测抗体IgY+兔F(ab')2抗鸡酶标抗体;Ⅲ:捕捉抗体IgY+检测抗体IgG+抗兔IgG酶标抗体。通过比较Cystatin C的最低检测浓度和阴性对照的OD值评价三种夹心法的灵敏度和特异性。结果体系I的Cystatin C最低检测浓度为7.5ng/mL(阴性对照OD值为0.737),体系Ⅱ的Cystatin C最低检测浓度为13ng/mL(阴性对照OD值为0.313),体系Ⅲ的Cystatin C最低检测浓度为10ng/mL(阴性对照OD值为0.31)。结论成功建立了Cystatin C的双抗体夹心ELISA检测体系,体系I的灵敏度最高但其特异性差,体系Ⅱ和Ⅲ的检测灵敏度和特异性均较好,可以用于Cystatin C的检测。

摘要：目的:研究存活素(Survivin)反义寡核苷酸对人结肠癌SW480细胞增殖的影响。方法:针对Sur-vivin mRNA序列设计了反义寡核甘酸,转染SW480细胞;RT-PCR检测细胞中Survivin基因的mRNA的表达,Western blot显示Survivin蛋白水平,以MTT法检测细胞增殖。结果:Survivin反义寡核苷酸可明显降低SW480细胞中Survivin的mRNA和蛋白水平;MTT比色法结果说明人Survivin反义寡核苷酸抑制SW480细胞增殖,抑制率远高于反义寡核苷酸组和空白对照组。结论:Survivin反义寡核苷酸能有效的下调SW480细胞Survivin的表达,同时抑制细胞增殖,有望应用于人结肠癌辅助治疗之中。

摘要：目的探讨真核延伸因子-1A2(eEF1A2)基因对宫颈癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法设计eEF1A2基因的siRNA干扰片段分别转染宫颈癌SiHa细胞、HeLa细胞和C33A细胞,实验组包括:转染Si-eEF1A2-1和SieEF1A2-2的细胞组,未转染的细胞和非干扰转染细胞(NC组)为对照组。采用Western blot方法检测eEF1A2和E-cadherin在宫颈癌细胞中蛋白质表达水平,通过划痕实验和基质胶包被transwell实验分析细胞迁移能力,通过CCK-8实验和平板克隆实验检测细胞增殖。结果宫颈癌细胞中,siRNA干扰的细胞与对照组相比eEF1A2蛋白质表达水平降低,E-cadherin蛋白质表达水平升高,差异具有统计学意义(P<0.05);划痕实验si-eEF1A2转染的细胞与对照组相比较,愈合间隙宽,差异有统计学意义(P<0.05);Transwell迁移实验,RNA干扰的细胞与对照组相比,穿过小室基底膜的细胞明显少于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);si-eEF1A2干扰的细胞CCK8增殖实验、细胞克隆形成实验中可以抑制宫颈癌细胞增殖,差异有统计学意义(P<0.05)。结论降低宫颈癌SiHa、HeLa和C33A细胞eEF1A2基因表达水平,可以抑制癌细胞的侵袭和迁移。