摘要：目的探讨Bcl-2siRNA和10．羟基喜树碱（HCPT）联合对小鼠H22肝癌移植瘤的治疗作用。方法设计并合成针对Bcl-2mRNA序列的siRNA，将Bcl-2siRNA转染人小鼠H22肝癌移植瘤内并联合HCPT治疗，观察肿瘤体积和小鼠体重的变化以及小鼠的生存情况。对肿瘤组织进行石蜡切片，采用HE染色观察移植瘤组织的形态变化。采用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）检测移植瘤组织中Bcl-2mRNA的表达。采用流式细胞术检测移植瘤组织中H22细胞的细胞周期和凋亡变化。结果用药21d后，siRNA干扰联合HCPT治疗组H22荷瘤小鼠的肿瘤体积为（571．47±67．31）mm3，明显小于HCPT治疗组[（880．47±107．31）mm3，P〈0．05]、siRNA干扰组[（1119．55±158．60）mm3，P〈0．01]和生理盐水组[（1357．64±197．92）mm3，P〈0．01]。siRNA干扰联合HCPT治疗组小鼠的生存时间为26d，明显长于HCPT治疗组（14d，P〈0．05）、siRNA干扰组（21d，P〈0．05）和生理盐水组（12d，P〈0．05）。siRNA干扰联合HCPT治疗组移植瘤组织中H22细胞坏死明显，Bcl-2mRNA表达下调，s期细胞比例减少，凋亡率升高。结论与单一治疗组比较，Bcl-2siRNA与HCPT联合对小鼠H22肝癌移植瘤的生长有明显的抑制作用，并可延长小鼠的生存时间。

摘要：天然氨基酸(NAA)是一种具有良好生物相容性的材料,对其进行功能化设计是近年来的热门研究领域。本文中将基于蚕丝蛋白的特征氨基酸序列(Gly-Ala)与离子互补多肽序列(Arg-Ala-Asp-Ala)混编,设计了多肽RAG-16。采用原子力显微镜、旋转流变仪、傅立叶变换红外光谱仪、倒置荧光显微镜等技术对多肽RAG-16的自组装结构、流变学性能以及细胞相容性等性质进行了表征。结果表明:多肽RAG-16在溶液中具有自组装特性,能够形成纳米级三维网络结构,所形成的水凝胶力学性能较佳。通过分析得知,多肽二级结构中Silk I结构比例增加是其力学性能增强的主要原因。荧光染色显示,绝大多数接种于多肽水凝胶中的MC3T3-E1细胞能够存活,且能在不同的三维平面上生长增殖,表明该材料具有良好的细胞相容性。综上所述,本实验中设计的NAA材料在生物医学领域有较大的应用潜力。

摘要：目的探索适用于***1938菌株简并PCR的基因组DNA模板制备方案。方法采用微波法、石英沙法、氯化苄法、CTAB法、尿素法提取DNA,并通过特异PCR和简并PCR评价各种方案的优弊。结果 5种方法制备的DNA含量差异无统计学意义(F=2.355,P>0.05);DNA制备效率相近;特异性PCR结果一致,但氯化苄法制备的DNA经简并PCR扩增出的条带较多,目的条带更清晰。结论 5种方法均适于特异性PCR所需DNA模板的制备,但氯化苄法更适于***1938菌株简并PCR模板DNA的制备。

摘要：利用天然蛋白质氨基酸序列设计生物仿生材料是近年来兴起的一个热门研究领域.本文中将蚕丝蛋白特征氨基酸序列(Gly-Ala-Gly-Ala-Gly-Ser)部分引入离子互补型多肽RADA16-Ⅰ中,设计了新型多肽RAGA16.采用原子力显微镜(AFM)、旋转流变仪(Rheometer)、傅立叶变换红外光谱仪(FTIR)、倒置荧光显微镜等技术对多肽RAGA16的自组装结构、肽链的二级结构、流变学性能以及细胞相容性等进行研究.结果表明,蚕丝蛋白多肽序列引入后,多肽RAGA16具有自组装特性,能够自组装形成致密的纳米级三维网络结构,所形成的水凝胶力学性能明显提高,通过分析得知这可能是由于多肽二级结构中Silk I结构成分比例增加所致.荧光染色显示,绝大多数接种于多肽水凝胶中的小鼠前成骨细胞MC3T3-E1能存活,且在不同的三维平面上生长增殖.综上,利用蚕丝蛋白特征序列对RADA16-Ⅰ进行仿生改性后,对拓展多肽材料在生物医学领域的应用具有重要意义.

摘要：目的探索灭蚊真菌***1938菌株凝胶剂剂型的制备方案。方法根据蚊虫的变态发育特点和***1938菌株的生物学特性,结合保藏、运输和使用的便捷性,以含海藻糖抗逆保护剂的1/2KPYG2定型固体培养基为载体、以菌丝体为活性物质,加工制成"菌丝体-1/4KPYG2凝胶剂"新剂型,在实验室和模拟野外环境下观察其灭蚊效果。结果在实验室和模拟野外环境,每100ml水体使用2块1.51.5×1.0cm3凝胶剂,7d致倦库蚊幼虫致死率均可达到28%。4～8℃条件下凝胶剂品相稳定,储存6个月药效无明显变化。结论 ***1938菌株"菌丝体-1/4KPYG2凝胶剂"具有杀灭蚊幼虫作用。该凝胶剂生产工艺简单,独立包装,贮存方便,使用时不需要专用器械,拆开包装袋直接投放或捏碎后投入水体中,不污染环境,具有较好的应用前景。

摘要：自然界中广泛存在着天然蛋白质的自组装行为,而多肽的自组装研究近年来已成为纳米科学以及生物医学研究的一个热点。本研究中将氨基酸序列(GAGA)与离子互补型多肽RADA16-I序列进行部分替换,设计了双亲性多肽RAGA16。采用原子力显微镜(AFM)、透射电子显微镜(TEM)、圆二色谱(CD)等技术对多肽RADA16-I、RAGA16的自组装行为、肽链的二级结构进行了表征。结果表明,RAGA16在水溶液中形成纳米纤维结构,其在自组装过程中由无规卷曲结构转变为β-折叠结构。进一步研究发现,与RADA16-I的自组装模不同,RAGA16纳米纤维采取一种稳定的反平行螺旋自组装结构。最后,本文对RAGA16的自组装模式进行了推测,并对两种多肽的自组装模式进行了对比。

摘要：为适应我校实验教学改革，尝试构建集实验准备、实验过程、综合性设计性实验、实验技能及期末笔试为一体的新考核体系。其中，实验准备考核是对学生课前提交的“预习与自评报告”进行评分；实验过程考核是对学生的课堂表现及实验报告进行评估；综合性设计性实验考核是对学生参与全程的表现进行评价；实验技能考核由口试答题和实验操作考核两部分组成；期末笔试以主观题为主，注重考查学生对知识的灵活运用程度和解决实际问题的能力。这种以考促学、以考促教的考核体系，不仅可充分引起学生对实验课的重视，而且可让教师更为客观、真实地了解学生学习情况和教学效果。

摘要：针对27个吡啶杂环类抑制剂采用Topomer COMFA方法进行了三维定量构效关系分析,新建模型的拟合、交互验证及外部验证的复相关系数分别为r2=0.982,q2=0.857,r2pred=0.829,结果表明模型具有良好的预测能力和可信度.采用基于R基团搜索Topomer Search技术对ZINC数据库进行R基团的虚拟筛选,获得了6个高活性的新抑制剂分子,其预测活性均优于训练集中活性最高分子.运用Surflex-dock分子对接法研究吡啶杂环类抑制剂与mTOR靶点的作用模式.研究结果表明,Topomer search可有效地用于分子设计,结合分子对接结果,新抑制剂分子为mTOR靶向药物设计提供参考.

摘要：为了探索提取贵阳腐霉Pythiumguiyangense菌株总RNA简便而有效的方法，我们分别采用石英沙研磨、超声波破碎、液氮研磨、液氮加石英沙研磨和溶菌酶消化5种方法破碎真菌细胞壁，再用市售RNAsimpletotal RNAkit试剂盒提取总RNA，最后通过对提取物进行琼脂糖凝胶电泳定性、紫外比色定量及PCR检测来评价各种破壁方法的优弊。结果显示液氮加石英沙研磨破壁法提取的真菌总RNA在5种方法中效率最高，OD260／OD280=2．093±0．264，RNA浓度为（0．134±0．021）μg／μL，RNA制备效率为（26．76±4．10）μg／g菌丝体，并且该方法操作简便，重复性最好，是制备***菌株总RNA的首选破壁方法。

摘要：目的建立适用于检测人胱抑素C(Cystatin C)的IgG与IgY双抗体夹心ELISA检测体系。方法以人Cystatin C作为抗原免疫产蛋的罗曼鸡和新西兰兔,纯化抗Cystatin C的鸡抗体IgY和兔抗体IgG,并分别建立三种ELISA夹心检测体系,I:捕捉抗体IgG+检测抗体IgY+抗鸡IgY酶标抗体;Ⅱ:捕捉抗体IgG+检测抗体IgY+兔F(ab')2抗鸡酶标抗体;Ⅲ:捕捉抗体IgY+检测抗体IgG+抗兔IgG酶标抗体。通过比较Cystatin C的最低检测浓度和阴性对照的OD值评价三种夹心法的灵敏度和特异性。结果体系I的Cystatin C最低检测浓度为7.5ng/mL(阴性对照OD值为0.737),体系Ⅱ的Cystatin C最低检测浓度为13ng/mL(阴性对照OD值为0.313),体系Ⅲ的Cystatin C最低检测浓度为10ng/mL(阴性对照OD值为0.31)。结论成功建立了Cystatin C的双抗体夹心ELISA检测体系,体系I的灵敏度最高但其特异性差,体系Ⅱ和Ⅲ的检测灵敏度和特异性均较好,可以用于Cystatin C的检测。