摘要：为了建立一种快速鉴别诊断弗氏柠檬酸杆菌(Citrobacter freundii)的环介导恒温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)检测方法,根据OmpA基因保守序列设计1套LAMP特异性检测引物,以弗氏柠檬酸杆菌DNA为模板、羟基萘酚蓝为显色剂,建立弗氏柠檬酸杆菌可视化LAMP检测方法,并优化反应体系和反应条件,检测该方法的特异性及灵敏度。结果显示:所建立的弗氏柠檬酸杆菌可视化LAMP检测方法与大肠杆菌(Escherichia coli)、鲁氏不动杆菌(Acinetobacter lwoffi)、鲁氏耶尔森氏菌(Yersinia ruckeri)、蜂房哈夫尼亚菌(Hafnia alvei)、迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)、温和气单胞菌(Aeromonas sobria)、杀鲑气单胞菌(Aeromonas salmonicida)、维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)和嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)均无交叉反应,最低检测量为1.43×10^(2) copies。为了进一步缩短检测该菌的过程,将HNB染料添加到LAMP反应体系中建立可视化弗氏柠檬酸杆菌LAMP检测方法,55 min内在可见光下通过肉眼直接观察颜色变化来判断结果。本研究建立的弗氏柠檬酸杆菌可视化LAMP检测方法操作简便、快速、特异性及灵敏性高,对弗氏柠檬酸杆菌引起的水产动物疾病的快速诊断具有重要的实践意义。

摘要：该文设计了一个涉及兽医传染病学、兽医分子生物学等兽医学科专业的探索性实验——鸡马立克病毒meq基因克隆及遗传进化分析实验。实验内容包括通过全自动核酸提取仪、荧光定量PCR仪对鸡组织病料中马立克病毒核酸进行检测,在确定病毒核酸阳性的基础上通过分子生物学手段扩增特征毒力基因meq序列,通过与Genbank已报道的30多株参考毒株序列进行比对,分析该病例马立克病毒的分子特征及遗传进化特点。该实验可锻炼学生的实验动手能力,加深对兽医学相关内容的理解,激发对专业知识的兴趣。