摘要：为建立可同时检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)保守区和类NADC30毒株的双重TaqMan探针荧光定量PCR方法,分别针对保守的N蛋白基因和Nsp2基因设计特异性引物和探针,通过优化反应体系及反应条件对该方法的灵敏度、特异性、重复性进行评估。结果显示,双重标准曲线的相关系数(R^(2))均大于0.990,具有良好的线性关系;最低检测限分别为5.27 copies/μL和3.00 copies/μL,具有较高的灵敏度;不与其他常见猪病病原发生非特异反应,且重复性良好,批内批间变异系数均小于3%。对168份临床样本的检测结果显示,PRRSV总阳性检出率为68.45%(115/168),其中类NADC30检出率为32.14%,混合感染率为20.24%,与临床诊断结果相一致。结果表明,本方法可用于检测PRRSV和鉴别类NADC30毒株以及猪繁殖与呼吸系统综合征的流行病学调查。

摘要：[目的/意义]通过对国外阅读推广品牌化运作特色的分析,为我国阅读推广品牌化建设提供借鉴与参考。[方法/过程]使用网络调研法和文献调研法,基于品牌化视角,对国外阅读推广典型案例进行分析、梳理和总结。[结果/结论]国外阅读推广的品牌化运作具有下列特点:良好的品牌形象设计、清晰的品牌定位、全方位的品牌传播和相应的品牌维系措施。借鉴国外阅读推广品牌化运作模式,推进我国阅读推广的品牌化建设,需要强化阅读推广的品牌化意识,并从品牌的设计、定位、传播、维系方面进行系统化运作,从而实现我国阅读推广层次与水平的提升。

摘要：文章从地方特教职业教育办学实际出发,研究以交叉、互溶的方式将地方高等职业教育资源介入特教职教中,探讨介入的行为、策略、创新机制,以期建立现代特教职业教育的结构和体系,完善特教职业教育的目标效益。

摘要：【目的】试验旨在获得分子质量小、溶血性低、稳定性好的抗菌肽。【方法】以牛血红蛋白β亚基的氨基酸序列为基础,以抗菌肽的构效理论为指导,筛选出1条多肽(YKK-18),并以其为模板肽设计了3条长度为18个氨基酸残基的改造多肽(LJ-1、LJ-2和DLK-3),通过最小抑菌浓度的测定反映4条多肽的抗菌活性,采用琼脂糖扩散法分析有抗菌活性多肽的热稳定性、酸碱稳定性、盐离子稳定性和反复冻融稳定性,用分光光度法测定有抗菌活性多肽的溶血性。【结果】设计的4条多肽均为带正电荷的亲水性多肽,与APD3数据库中收录的抗菌肽氨基酸序列相似性均低于50%,二级结构中均有较高含量的α-螺旋,改造多肽的两亲性程度均高于模板肽,模板肽对测试菌株没有抗菌活性,而改造多肽对测试的大肠杆菌、沙门菌、绿脓假单胞菌、葡萄球菌、白色念珠菌等均有不同程度的抗菌活性,其中DLK-3和LJ-1的抗菌活性优于LJ-2,但对奇异变形杆菌均没有抗菌活性,在100℃高温、pH 4.0~10.0、生理浓度的盐离子(Na~+、K~+、Ca、Mg、Fe、Cu)和14次反复冻融等条件下仍有较好的抗菌活性,DLK-3的溶血作用呈剂量依赖性,在200μg/mL时的溶血率已超过50%,而LJ-1和LJ-2的溶血率在高浓度(200μg/mL)时仍低于5%。【结论】本研究结果为抗菌肽的分子设计和改造提供了参考,获得的抗菌肽LJ-1和LJ-2具有成为抗生素替代物的潜力。

摘要：ERP是一个好的企业管理工具。机械制造企业实施ERP项目的关键在于生产管理流程的设计。从分析机械制造企业的生产加工过程入手,系统地介绍了ERP项目实施过程中生产系统的总体设计思路和设计要点。

摘要：英特网艺术家有相近的创作基础思维:材质媒介必须是一种能将经验转化成新形式的隐喻方式,并可将之转换传达给观众。网络空间对他们而言是最好的包容的民主的媒介材质。网络作为一种全新的艺术媒介的诞生同时,可能预示着一个网络艺术家将会是程序设计师工程师以及其他相关知识混合新概念的作者。网络艺术的出现,在对原有艺术的材料媒介的解构同时,不得不面临新的建构。未来的艺术家最关心的是什么?未来的艺术家会是怎样?未来的艺术家需要掌握何种技艺?这将是未来英特网艺术必须给自己明确的前行方向。

摘要：锚下预应力筋对筏板基础产生的水平预压应力的计算,关系到有效预压应力的计算和筏板的抗冲切设计,现行混凝土结构设计规范有关预压应力的计算公式没有考虑预应力在锚下的扩散问题。文中分析了锚下预压力作用下筏板的应力分布规律。基于级数法的思想,导出预应力筏板的预压应力理论解并讨论边柱有效预压应力计算问题。在考虑应力扩散的影响对抗剪有效作用下,提出了预应力筏板基础边柱合理的抗冲切承载力计算公式。

摘要：促卵泡激素(follicle stimulating hormone,FSH)作为调节家禽卵泡发育重要的候选基因,但FSH在生物体内的半衰期非常短,本试验将具有延长基因半衰期作用的CTP序列添加到鹅FSH基因各亚基的C末端进行基因融合,以期获得pET32a-FSHα-CTP、pET32a-FSHβ-CTP和pET32a-FSHβ-CTP-α重组蛋白。设计去除目的基因信号肽和含有酶切位点的特异性引物,经融合PCR扩增获得了目的基因FSHα-CTP、FSHβ-CTP和FSHβ-CTP-α,通过构建原核表达载体pET32a-FSHα-CTP、pET32a-FSHβ-CTP和pET32a-FSHβ-CTP-α,将重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导,SDS-PAGE检测,蛋白纯化。结果显示,3个融合蛋白FSHα-CTP、FSHβ-CTP和FSHβ-CTP-α的IPTG最佳诱导时间分别为4、5和5h,最佳诱导浓度分别为0.2、0.8和1.5mmol/L,且都是以包涵体形式存在,相对分子质量分别为32 000、35 000和46 000,与预期大小一致。结果表明,本试验成功构建了鹅pET-32a-FSHα-CTP、pET-32a-FSHβ-CTP和pET-32a-FSHβ-CTP-α的原核表达载体,并对它们的重组蛋白进行了纯化,为开展鹅FSH的基因免疫研究和鹅rFSH生物制剂研发奠定基础。

摘要：为探究二花脸猪隐睾组织学特点和PCNA/CD31的差异性表达,本试验以二花脸猪隐睾和正常睾丸组织作为研究对象,通过组织特殊染色观察分析猪隐睾组织学特点,同时利用蛋白免疫印迹、免疫组织化学和免疫荧光等实验,检测PCNA/CD31蛋白在隐睾和正常睾丸组织中的差异性表达,为研究隐睾的发生机制和种公猪睾丸发育的检测提供实验数据和理论依据。组织学分析结果显示,HE染色观察隐睾组织睾丸小叶界限不清、间质细胞多而散乱分布、曲精小管直径明显减小,管腔内可见大量精原细胞及支持细胞;VG和Ag NOR染色观察睾丸结缔组织和曲精小管基膜中呈红色的胶原纤维较少,且胶原纤维分布紊乱,核分裂相细胞较少。蛋白免疫印迹检测PCNA/CD31在隐睾组织中的表达均显著高于正常睾丸组织(P<0.01)。免疫组织化学结果显示,PCNA/CD31在隐睾和正常睾丸组织中都存在阳性表达,PCNA在隐睾和正常睾丸结缔组织的血管壁和间质细胞的胞质中强阳性表达,在胞核中也可见少量阳性表达;CD31表达于隐睾和正常睾丸组织间质细胞的胞质中,而在细胞膜和胞核中未见表达。结果表明,PCNA/CD31参与了睾丸间质细胞的增殖和分布、血管的生成及曲精小管的发育,是诱导猪隐睾发生的关键因子。

摘要：在一般人的印象里，数学和文学是两个互相排斥，互不相容的对立学科，数学家和文学家是迥然不同的两类人。说的更直白些，文学是生活的艺术，是形象化思维的产物；数学是数与形的科学，是理性化思维的产物，两者之间的差别是显而易见的。不过耐人寻味的是，历史上许多大数学家都对文学有着浓厚的兴趣和极高的素养，这又反映出艺术和科学的碰撞和交汇。