摘要：目的:优选蚕茧中丝胶蛋白的最佳提取工艺。方法:以丝胶蛋白提取率和丝胶蛋白含量为考察指标,采用单因素试验和正交试验设计,优选蚕茧中丝胶蛋白的最佳提取工艺。结果:蚕茧中丝胶蛋白的最佳提取工艺为:30倍量1%Na2CO3溶液提取2次,每次3 h,提取温度为100℃。蚕茧中丝胶蛋白的提取率可达27.1%。结论:优化得到的提取工艺稳定、可行,可为进一步研究蚕茧中丝胶蛋白的药理药效提供参考。

摘要：目的观察Notch1基因沉默后人绒毛膜上皮癌细胞增殖及侵袭能力变化。方法查阅Gen Bank提供的Notch1序列(NM-001105721.1)设计引物,合成Notch1 siRNA。分离培养人绒毛膜上皮癌JEG-3细胞,分为A、B、C组。A组不做转染,B组转染control siRNA,C组转染Notch1 siRNA。分别于转染后12、24、36、48、60 h采用MTT法检测各组细胞增殖能力(OD值)。转染后48 h采用Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力。转染后72 h采用Western blotting法检测各组细胞中的MMP-2、MMP-9蛋白。结果转染后36、48、60 h C组OD值低于A、B组(P均<0.05)。A、B、C组穿膜细胞数分别为(109±6)、(118±7)、(59±4)个,C组与A、B相比,P均<0.05。A、B、C组细胞中MMP-2蛋白相对表达量分别为0.91±0.08、0.87±0.01、0.29±0.05,MMP-9蛋白相对表达量分别为0.85±0.04、0.79±0.03、0.35±0.05,C组MMP-2、MMP-9蛋白相对表达量与A、B组相比,P均<0.05。结论Notch1基因沉默后,人绒毛膜上皮癌细胞增殖受到抑制,侵袭能力减弱。

摘要：背景:随着机体衰老性腺功能逐渐降低,中国传统医学认为精气虚弱是导致机体衰老的主要原因。目的:观察中药天年饮对D-半乳糖致亚急性衰老大鼠血清睾酮含量、睾丸组织超氧化物歧化酶的活性及睾丸生精细胞增殖细胞核抗原表达的影响。设计:随机对照实验。单位:承德医学院基础医学研究所。材料:实验于2003-04/07在承德医学院基础医学研究所进行。选择成年雄性SD大鼠40只,随机分为4组,每组10只。正常组不做任何处理,模型组、用药组、阴性对照组采用D-半乳糖连续腹腔注射200mg/(kg·d)制备亚急性衰老动物模型,模型组大鼠于造模成功后不再作任何处理。用药组大鼠于造模成功后每天用天年饮灌胃,1次/d,共30d;阴性对照组大鼠在造模成功后每天灌胃同等剂量的生理盐水,时间同用药组大鼠。方法:各组大鼠血清中睾酮的含量采用酶联免疫吸附方法检测,睾丸组织中超氧化物歧化酶的活性采用黄嘌呤氧化酶法检测,增殖细胞核抗原的表达情况采用免疫组织化学法观察。主要观察指标:①血清中睾酮的含量。②睾丸组织中超氧化物歧化酶的活性。③睾丸生精细胞增殖细胞核抗原的表达情况。结果:40只大鼠均进入结果分析。①血清中睾酮的含量:模型组大鼠低于正常组(P<0.05),用药组高于模型组(P<0.05)。②睾丸组织超氧化物歧化酶的活性:模型组明显低于正常组(P<0.01),用药组明显高于模型组(P<0.01)。③睾丸生精细胞增殖细胞核抗原的表达情况:模型组低于正常组(P<0.05);用药组明显高于模型组(P<0.05)。结论:天年饮可延缓生殖功能的退化,具有一定的延缓衰老的作用。

摘要：背景:国外小鼠局灶性脑缺血模型技术已经成熟,由于条件限制国内现多以大鼠制作脑缺血模型。目的:建立小鼠局灶性脑缺血再灌注模型,以适应在基因水平进行脑缺血和再灌注损伤分子机制的研究。设计:随机对照实验。单位:承德医学院基础医学研究所。材料:实验于2002-09／2003-05在承德医学院基础研究所完成。选择 18只昆明小鼠2-3月龄,体质量20-25 g,雌雄兼用。分为假手术缎、缺血3 h再灌18 h和24 h组,每组6只。干预:通过神经病学评分,红四氮唑染色及病理形态学的观察,对造模的可靠性进行评价。选用尼龙钓丝(φ0.128mm)经过液体石蜡浸泡后, 从颈外动脉向颈内动脉插入,阻断小鼠右侧大脑中动脉3 h后,拔出线栓再灌注18 h和24 h。主要观察指标:小鼠脑梗死体积及神经学评分。结果:实验共18只小鼠均进入结果分析。①假手术组未出现神经缺损症状。②手术组小鼠神经症状表现为提尾悬空时头向左歪,左前肢内收、肩内旋,左前肢肌张力降低,不能完全伸直,自主活动时,以左后腿为圆心向左旋转,左前肢压在腹下与右前肢交叉成剪刀状,左侧肢体瘫痪更为明显,尤其是前肢,神经症状随再灌注时间延长而加重。③红四氨唑染色可清晰地显示出脑梗死范围,缺血3 h再灌18 h梗死体积为(13+2.3)mm3,缺血3 h再灌注24 h梗死体积为(16+4.5)mm3,并相对稳定,光学显微镜下可见脑缺血后的病理改变。阻断3 h再灌18,24 h 后病理损伤性改变随时间延长加重。结论:插线法制作小鼠脑缺血再灌注模型无需开颅,创伤小,缺血的部位较恒定、可以准确控制缺血和再灌注时间,此模型可做为观察脑血管疾病的病理生理改变、预后及药物治疗作用的理想实验动物模型。

摘要：背景:黄芪具有保护缺血再灌注细胞损伤的作用,黄芪预处理是否对缺血再灌注心肌细胞凋亡有保护作用?目的:探讨黄芪预处理对缺血再灌注大鼠心肌细胞凋亡及其相关基因的影响。设计:以Wistar实验大鼠为实验对象的随机分组对照。单位:承德医学院基础医学部及附属医院老年病科。材料:实验于2004-02/12在承德医学院基础医学研究所免疫组化实验室完成。选用雄性Wistar大鼠30只,将动物随机分为黄芪预处理组(黄芪组)、缺血再灌注组、假手术对照组(对照组),每组10只。方法:黄芪组术前给予腹腔内注射黄芪注射液,缺血再灌注组、对照组术前给予等量生理盐水注射。1周后制备缺血再灌注模型,术后即取缺血再灌注边缘区的心肌,对照组取相对应部位心肌。应用脱氧尿嘧啶缺口末端标记法测定心肌凋亡细胞指数的改变,应用免疫组化ABC法检测心肌细胞bcl-2(抑凋亡基因)及bax(促凋亡基因)基因的改变。主要观察指标:①各组凋亡细胞数。②bcl-2和bax基因表达情况。结果:①心肌凋亡细胞数:黄芪组低于缺血再灌注组[(14.06±9.97)%,(19.34±12.30)%,t=1.863,P0.05]。③bax基因表达:黄芪组低于缺血再灌注组[(12.65±7.23)%,(18.12±7.92)%,t=2.096,P<0.05]。结论:黄芪预处理可使促凋亡基因bax的表达明显下调,从而使心肌细胞凋亡减少,保护缺血再灌注心肌细胞。

摘要：目的研究靶向敲除CDK2对人黑素瘤移植瘤中miRNA表达谱的影响。方法设计CDK2的sgRNA靶向序列,构建含有sgCDK2-108的重组CRISP/Cas9慢病毒质粒并转染至HEK293T细胞进行重组慢病毒的包装和纯化。在SPF级的BALB/c-nude小鼠右前肢腋下皮下注射1×10^7个人黑素瘤细胞A375进行体外移植瘤小鼠模型构建。移植瘤成瘤第35天时,瘤内注射1×10^7 TU的重组sgCDK2-108和sgCDK2-NC慢病毒并继续培养30 d后收集样本。miRNA高通量测序检测靶向敲除CDK2后移植瘤内miRNA表达谱的改变、进行miRNA靶基因、GO富集分析、KEGG通路分析、新型miRNA鉴定及二级结构预测。结果sgCDK2-108慢病毒感染组与sgCDK2-NC阴性慢病毒感染组相比,共鉴定出762个miRNA,其中上调表达35个miRNA、下调表达13个miRNA;与移植瘤组相比,共鉴定出754个miRNA,其中上调表达28个miRNA、下调表达4个miRNA。miR-1a-3p、miR-133a-3p、miR-133b-3p和miR-375-3p为共同差异表达miRNA且具有多个潜在靶分子。GO分析显示miRNA靶基因功能主要为细胞代谢调控等,KEGG通路分析显示主要涉及RNA降解和自噬等。共鉴定出290个新型miRNA且具有“V”型或“直线”型两种结构。结论靶向敲除CDK2能够改变人黑素瘤移植瘤内的miRNA表达谱。

摘要：为获得具有高抗氧化活性的黄芩提取物,本试验对比水提和醇提两种提取方式,并将提取物冻干后复溶成水提水溶、醇提醇溶、醇提水溶三种状态,以胃肠模拟消化后产物的DPPH自由基清除率、总抗氧化能力、·OH自由基清除率、总还原能力和超氧阴离子清除率五种抗氧化活性指标的综合秩和比(RSR值)为判断标准,确定出最佳的提取溶剂。并在此基础上采用单因素试验初步确定其提取工艺的主要影响因素及水平,再结合析因设计试验分析提取工艺各因素之间的交互作用,最终获得最佳的提取工艺参数。通过RSR值排序的结果表明:两种冻干粉在复溶后的抗氧化活性从大到小的顺序为:水提水溶、醇提水溶、醇提醇溶。单因素试验最佳提取工艺为:温度保持微沸,提取时间120 min,液料比50:1(mL/g)。析因设计试验最佳提取工艺为:温度保持微沸,提取时间120 min,液料比60:1(mL/g)。优选的工艺提取液其经过消化后DPPH自由基清除率为39.48%、ABTS+自由基清除率为58.85%、·OH自由基清除率为48.63%、总还原能力为0.49、超氧阴离子清除率为28.87%,可为黄芩抗氧化活性物质的提取提供重要参考依据。

摘要：机能实验学是将生理学、病理生理学和药理学的实验课综合为一体,更新教学内容,如删除重叠性实验、压缩验证性实验、增加综合性和设计性实验,形成的独立的实验课程.机能实验学课程单独制订教学计划,确定授课内容,独立对学生进行考核.开设机能实验学课程旨在加强学生综合能力的培养,完成学科间的交叉渗透和教学内容的协调统一,实现资源共享,完成实验教学由单纯验证理论到能力培养的根本转变.

摘要：机能实验学线上资源共享课程建设,能够充分利用当前的课程资源,启动线上教学模式,在网络技术时代探索线上线下混合教学的有效开展,基于此文章基于教学课程技能实验学线上资源共享。进行课程设计,利用虚拟仿真实验平台制定线上线下的混合教学模式,探索一套完整的资源共享机制,适合教学课程改革的发展方向,匹配智能的实验设备,并且优化课程内容,录制实验教学视频,从而满足现代化教学的实际需求。

摘要：“医学微生物学”课程作为连接临床的桥梁基础课程,在培养学生形成正确的世界观、人生观和价值观方面发挥着至关重要的作用。“医学微生物学”课程思政建设旨在将思想政治教育与专业知识相结合,全面促进学生发展。课程团队以《高等学校课程思政建设指导纲要》为指导,结合“医学微生物学”课程特点,明确课程思政目标及内容,阐述课程思政的实施途径以及多元化的评价方式。探讨课程思政建设中的问题与改进措施,强调教学反思和改进的重要性,力求将思政元素与专业知识完美结合,充分发挥课程思政立德树人的作用。