摘要：程序性死亡因子-1(PD-1)作为调节或平衡机体外周和中枢免疫功能的重要分子,其在不同的抗原刺激、炎症环境、细胞种类及分化阶段的表达受复杂、多样的分子机制调控。为深入理解PD-1表达调控的分子机制,本文分别从顺式作用元件、转录调控因子及相关信号通路、表观遗传因素、转录后调控等几个方面,将已有关于PD-1表达调控分子机制的相关研究进展进行综述,以期为更精确、有效的免疫检查点疗法或治疗方案的设计提供新的信息和思路。

摘要：为了获得猪T细胞表面抑制性受体PD-1的全长基因,本研究根据猪T细胞表面抑制性受体PD-1的c DNA序列,设计合成2对引物P1/P2、P3/P4,并在P1和P2的5'端分别引入Eco RⅠ和XhoⅠ酶切位点。应用巢式PCR技术从感染猪瘟病毒(CSFV)石门株的猪外周血单个核细胞中,扩增获得了大小为866 bp的基因片段。将扩增的目的基因回收、纯化,克隆至p MD-18 T克隆载体,转化宿主菌DH5α。菌液PCR和质粒PCR选择可疑阳性重克隆质粒,抽提质粒,然后用Eco RⅠ、XhoⅠ双酶切鉴定,最后进行基因序列测定。结果表明,成功构建猪PD-1全长基因的重组质粒(p MD-PD1)。

摘要：为提高米曲霉产氨肽酶的活性,对影响氨肽酶液态发酵的因素进行单因素实验,利用Plackett-Burman实验设计在单因素实验的基础上选取对氨肽酶活性影响最大的3个因素进行Box-Behnken实验,建立数学模型进行响应面分析得到最大值的预测以及对预测值进行验证。最终结果确定为温度为36℃,pH值6.6,牛肉膏的添加量1.82 g/L时,氨肽酶活性最大预测值为485.88 U/mL,验证酶活性为479.22 U/mL,较未优化前提高了298%,为氨肽酶的工业化提供了理论支持。

摘要：为获得高活性的鸡传染性法氏囊病病毒(infectious bursal disease virus,IBDV)VP2蛋白的重组蛋白,本试验对IBDV VP2蛋白基因与能进行自我组装的幽门螺杆菌(Hp)铁蛋白基因进行融合PCR扩增,获得其融合基因。根据成熟VP2蛋白基因cDNA序列和Hp铁蛋白基因的碱基序列,设计合成2对引物,应用融合PCR技术扩增获得融合基因片段VP2-Fe。将目的基因克隆至pMD18-T载体筛选阳性重组克隆质粒,然后将目的基因亚克隆至真核表达载体pPICZaC后转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,筛选获得阳性表达质粒。结果显示,通过两轮PCR扩增出长度为1 824 bp的融合基因VP2-Fe,亚克隆至pMD18-T载体,测序结果显示,融合基因无任何碱基的突变,筛选的阳性质粒命名为pMD-VP2-Fe。双酶切回收目的基因大小为1 824 bp,亚克隆至pPICZaC,PCR和双酶切鉴定出现预期大小的片段,将获得的阳性表达质粒命名为pPICZaC-VP2-Fe。本研究为后期利用真核表达载体获得其融合重组蛋白奠定基础。