摘要：目的建立一种以单链抗体为基础的酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)快速检测畜禽产品中西马特罗(cimaterol,CIM)药物残留。方法以重氮化法合成的西马特罗完全抗原CIM-牛血清白蛋白(bovine albumin,BSA)免疫新西兰大白兔,用兔脾细胞总RNA反转录合成c dNA第一链,设计引物扩增兔源抗体重链可变区(heavy chain variable region,VH)和轻链可变区(light chain variable region,VL),通过45 bp的连接肽(Linker)使用新型重叠延伸聚合酶链式反应技术(splicing by overlap extension polymerase chain reaction,SOE-PCR)连接成VH-Linker-VL并大量制备;利用噬菌体表面展示技术将单链抗体(single-chain variable fragment,Sc Fv)片段与噬菌体展示载体p CANTAB-5e连接,电转化至大肠杆菌TG1感受态细胞,得到兔源噬菌体Sc Fv抗体库。通过聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SdS-PAGE)判断是否偶联成功,用紫外(ultraviolet,UV)扫描及基质辅助激光解析串联飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption tandem time-of-flight mass spectrometry,MALdI-TOF-MS)测定人工抗原的偶联比。用ELISA测定免疫兔血清质量。鉴定合成抗体库并对抗体库进行4轮淘选,取最优的CIM-Sc Fv进行氨基酸序列分析。结果CIM-BSA及CIM-鸡卵清白蛋白(ovalbumin,OVA)偶联比分别为8:1及10:1,免疫血清校价为1:32000,半数抑制浓度为9.77 ng/m L,标准曲线的拟合度为0.997。抗西马特罗兔源噬菌体Sc Fv免疫库的插入率为92%,库容为1×1010 pfu,多样性为83.3%,经淘选获得一株与CIM有结合活性的噬菌体Sc Fv菌。结论西马特罗完全抗原的合成效果良好,可用于建立西马特罗检测方法,兔源噬菌体抗体库为快速获得CIM单链抗体奠定基础,为西马特罗快速检测提供了新思路。

摘要：3d打印作为增材制造技术综合了快速成型、立体建模、数字设计、信息控制等多项技术,利用粉末状金属或光敏树脂等可黏合材料,通过逐层打印的方式来构造物体。3d打印技术助力肢体、听力、视力残疾人的康复及发展,为实现残疾人无差别生活及阳光就业奠定基础,为残疾人发展提供参考依据。

摘要：由于“物联网安全技术”的课程特点及课程内容,传统的教学方式,很难达到理想的教学效果。OBE工程教育理念结合立德树人的教育目的,以学生为中心的思想,符合“物联网安全技术”的教学目标。本文通过分析“物联网安全技术”的课程特点和知识内容,在教学模式中引入OBE思政理念,对教学模式上,加大了课程的设计,以过程考核为主要手段,开展教学模式的研究。并在教学活动中进行了尝试,从实施的效果来看,这种教学模式可以显著提高课堂教学氛围,提高学生课堂的专注度,使得教学效果得到了明显的改善。