摘要：在动物细胞中，抑制非同源末端连接（Non-homologous end joining, NHEJ）修复途径，可以提高同源重组（Homologous recombination, HR）修复基因组双链断裂（Double-strand brakes, DSBs）的发生概率。为了提高绵羊胚胎成纤维细胞的 HR 效率，针对 NHEJ 修复途径中的关键因子 Lig4（DNA ligase 4）基因，本文设计合成4个具有靶向性的 siRNA（Small interfering RNA）。绵羊胚胎成纤维细胞经电转染导入 siRNA，通过实时荧光定量PCR（qRT-PCR）和 Western blotting 检测，筛选出有效抑制 Lig4基因表达的2个 siRNA。应用质粒重连法检测HR 修复效率，将 I-SceⅠ酶线性化的 HR 质粒和 siRNA 共转染绵羊胚胎成纤维细胞，经72 h 培养及流式细胞仪检测，与对照组细胞比较，结果表明 HR 质粒重连效率提高了3~4倍。瞬间干扰 Lig4基因的表达可提高 HR质粒重连效率，为改善绵羊胚胎成纤维细胞基因打靶效率提供理论基础。

摘要：试验采用3头35 kg左右的美利奴绵羊研究不同蛋白饲料日粮对绵羊营养物质消化的影响。为自身对照试验设计,整个试验分4期进行,每期3头羊饲喂同一种蛋白饲料日粮。4种蛋白来源分别为棉籽粕、大豆粕、葵粕和菜籽粕。试验结果表明：绵羊采食蛋白来源为棉籽粕的日粮时,干物质、有机物和氮采食量最高,而菜籽粕采食量最低。饲喂棉籽粕日粮,干物质、有机物和纤维素十二指肠流量显著高于大豆粕日粮和菜籽粕日粮（P〈0.05）。大豆粕日粮粗蛋白在前胃的消失率最高为33%,其余3组日粮粗蛋白前胃的降解率为16%-20%。到达小肠的菌体蛋白（MCP）量各组间无差异,而到达小肠过瘤胃饲料蛋白的量（率）棉籽粕组显著高于葵粕组、菜籽粕组、大豆粕组。大豆粕组粗蛋白在小肠的表观消化率最低为48%,其余3组日粮粗蛋白小肠表观降解率均为66%。

摘要：本试验旨在探究不同留茬高度对全株玉米青贮营养成分、发酵品质、瘤胃降解率和奶牛生产性能的影响。试验玉米品种选用“东科301”,采用单因素试验设计,在同一时间和地点对处于蜡熟期的全株玉米进行收割,3组留茬高度分别为20、30和40 cm,各留茬高度重复取样3次,对全株玉米青贮前后营养成分、发酵品质及营养物质降解率和降解参数进行测定;并选择45头泌乳奶牛,根据胎次(3胎)、泌乳天数[(44.8±5.0)d]、产奶量[(43.5±1.5)kg/d]和体况评分(3.5分)将其随机分为3组(每组15头),分别饲喂含有不同留茬高度(20、30和40 cm)全株玉米青贮的全混合日粮,预试期10 d,正试期60 d。结果显示:1)40 cm组全株玉米青贮前后中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维含量显著低于20 cm组(P<0.05),淀粉、水溶性碳水化合物、非纤维性碳水化合物含量和相对饲喂价值显著高于20 cm组(P<0.05)。2)30 cm组和40 cm组全株玉米青贮的乙酸、丙酸和总挥发性脂肪酸含量显著高于20 cm组(P<0.05),丁酸含量显著低于20 cm组(P<0.05)。3)40 cm组全株玉米青贮的72 h干物质、中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维降解率显著高于20 cm组(P<0.05),干物质、中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维和淀粉有效降解率显著高于20 cm组(P<0.05)。4)40 cm组产奶量、4%乳脂校正乳、能量校正乳、饲料转化率及乳脂、乳蛋白含量显著高于20 cm组和30 cm组(P<0.05)。由此可见,提高全株玉米的留茬高度不仅提升了全株玉米青贮的营养价值、青贮品质和可消化物质含量,饲喂后还有助于提升奶牛产奶量和饲料转化率,增加牛奶中乳脂和乳蛋白含量,改善牛奶品质。本试验条件下,全株玉米的适宜留茬高度为40 cm。

摘要：选体重和脚胫颜色度接近的56日龄黄羽肉鸡共960只,随机分为16个处理组,每处理60只鸡。采用双因子4×4水平的随机试验设计,4个维生素A添加水平(0、5000、10000、20000IU/kg)和4个维生素E添加水平(0、30、60、120IU/kg)。结果表明:在维生素A0～10000IU/kg、维生素E0～60IU/kg范围内,黄羽肉鸡的日增重和饲料报酬逐渐提高;日粮维生素A添加量超过10000IU/kg,血浆中维生素E含量有下降趋势。高水平维生素A(20000IU/kg),升高血浆TBARS值,大剂量维生素E(120IU/kg),提高机体脂质稳定性。日粮添加20000IU/kg维生素A对色素的沉积有抑制作用,随维生素E水平的上升,皮肤的颜色指数呈现上升趋势。维生素A和E含量及其互作对血清新城疫抗体效价有显著影响。综合考虑,黄羽肉鸡育肥期维生素A、E的适宜添加量分别为5000～10000IU/kg,30～60IU/kg。

摘要：本试验以研究伊犁马乳铁转运蛋白(lactotransferrin,LTF)基因多态性及其与泌乳性状的关系为目标,针对伊犁马LTF基因外显子和启动子设计了17对引物,以伊犁马DNA为模板,通过PCR扩增及PCR-RFLP法检测224匹伊犁马LTF基因多态性,并与其中73匹有产奶量记录的伊犁马进行关联分析,研究该基因多态性与泌乳性状之间的关系。结果显示,在伊犁马LTF基因中检测到1个SNP:c.173G>A,该SNP位点是发生在CDS区上的错义突变,致LTF编码蛋白第58位精氨酸突变为赖氨酸。与其120d日均产奶量进行关联分析,结果显示,虽然该位点不同基因型个体的日均产奶量差异并不显著(P>0.05),但可以发现各基因型的产奶量GG>GA>AA,由此可为中国乳用马的选育提供一定的参考。

摘要：马奶具有较高的营养价值,但目前关于马泌乳性能方面的研究很少。本实验对伊犁马生长激素受体(GHR)基因外显子和启动子设计13对引物,以DNA混合池为模板,采用PCR-RFLP法检测188匹伊犁马GHR基因多态基因型,并分析有产奶量记录的73匹伊犁马GHR基因多态性与泌乳性状之间的关系。结果表明:在伊犁马中检测到GHR基因启动子T-562C突变,CC、TC、TT 3种基因型,其基因型频率分别0.309、0.676、0.016;C为优势等位基因,频率为0.646,T基因频率为0.354;虽然各基因型间产奶量并没有显著差异(P>0.05),但各基因型的产奶量依次为TT>CC>TC,基因C突变为T可使产奶量有上升趋势,研究结果可为我国乳用马的选育提供一定的参考。

摘要：【目的】从我国华东地区某省3个不同市县的疑似猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)发病猪场送检的病料中分离PRRSV毒株,并对其全基因组进行测序,进而对当前PRRSV流行毒株的分子特征和近几年我国PRRSV毒株的演化特点进行分析。【方法】采集养殖场病死猪的淋巴结和肺脏病料,处理后进行PRRSV的RT-PCR检测。对PRRSV检测呈阳性的病料进行病原分离和免疫荧光试验(IFA)鉴定,测定IFA鉴定呈阳性的PRRSV分离株的TCID50。参照NCBI基因数据库已提交的PRRSVVR-2332、CH-1a、HB-2及JXA1等毒株序列设计6对引物,对所得分离毒株分别进行全基因组序列扩增、测序,并将测序结果与LV、VR-2332、JXA1等国内外16个PRRSV毒株进行序列同源性和进化分析。【结果】试验共分离鉴定获得3株PRRSV毒株,分别命名为SDCXA/2008、SDWF、SDLY。全基因组Blast比对结果表明,这3个分离株均为北美洲型毒株。序列分析发现,3个分离株的全基因组序列与欧洲株的同源性极低(61.6%～61.8%),与2006年前分离的美洲型毒株的同源性较低(86.6%～97.1%),与2006后分离的美洲型毒株同源性较高(98.3%～99.7%)。Nsp2基因在3个易变区中变异最大,ORF5次之,ORF3相对最小;推导氨基酸序列中变异最大的亦为Nsp2。3株PRRSV毒株Nsp2基因推导氨基酸的第481和532～560位处共存在30个氨基酸缺失,与以HUN4、JXA1等为代表的国内高致病性分离株序列的同源性较高,结合进化分析将其均划为与JXA1类似的高致病性猪蓝耳病毒株(HP-PRRSV)。【结论】分离到3株HP-PRRSV毒株,其遗传特征相对稳定,但同时也发生了一定的变异,说明PRRSV还在不断地变异和演化。PRRSV的分布无明显地域性。

摘要：【目的】研究以玉米秸秆和小麦秸秆为中性洗涤纤维来源的日粮,对巴什拜羊采食量、日增重、屠宰率、器官发育及血液生化指标的变化,分析不同秸秆源的NDF对巴什拜羊生产性能和血液生化指标的影响。【方法】采用单因素试验设计,选取体重为(21. 76±4. 86) kg的羔羊20只,随机分为2个组,分别为Ⅰ组(饲喂玉米秸秆为纤维源的日粮)、Ⅱ组(饲喂小麦秸秆为纤维源的日粮),预试期为10 d,正试期为60 d。【结果】试验Ⅰ组、Ⅱ组羊平均日增重和干物质采食量、料重比、屠宰率差异不显著(P> 0. 05),两组间试验羊头、蹄、肾脏、胃重无显著差异(P> 0. 05),试验Ⅰ组肝脏和肺重量显著高于试验Ⅱ组(P 0. 05);试验Ⅰ组血清白蛋白含量、白球比、甘油三酯显著高于Ⅱ组(P <0. 05)。【结论】两种秸秆来源NDF的日粮对巴什拜羊的生长性能、屠宰性能没有显著的影响,以玉米秸秆为NDF来源的日粮对肝脏和肺部器官机体抵抗力、免疫力影响较大,以小麦秸秆为NDF来源的日粮可能更利于脂肪的消化吸收。

摘要：研究旨在筛选发酵香菇菌糠的最佳菌酶复合制剂。试验采用单因素试验,设计16个不同的菌酶复合制剂加入香菇菌糠中,筛选植物乳杆菌、黑曲霉、嗜酸乳杆菌、布氏乳杆菌、产朊假丝酵母、纤维素酶和木聚糖酶等菌酶制剂。发酵30 d后,通过对发酵产物感官指标评定、pH值及营养成分含量进行测定,利用隶属函数法对相关指标进行综合评判。结果显示,经菌酶复合制剂发酵的香菇菌糠感官指标得分均属于尚好及以上,pH值较原料明显降低,营养成分有所改善。筛选出4个最佳菌酶复合制剂:布氏乳杆菌+产朊假丝酵母+嗜酸乳杆菌+黑曲霉+木聚糖酶+纤维素酶、布氏乳杆菌+产朊假丝酵母+嗜酸乳杆菌+木聚糖酶+纤维素酶、布氏乳杆菌+产朊假丝酵母+植物乳杆菌+黑曲霉+木聚糖酶+纤维素酶、布氏乳杆菌+产朊假丝酵母+植物乳杆菌+纤维素酶。研究表明,菌酶复合制剂能够改善香菇菌糠发酵饲料的品质,提升菌糠的利用价值。

摘要：【目的】通过对巴什拜羊SNPCLPG的分子检测,期望发现CLPG基因型种羊,为今后选育肉用性状更优异的新品系奠定基础。【方法】绵羊的双肌臀(Callipyge,CLPG)基因表型为后臀肌肉增大近30%,是由位于绵羊18号染色体GTL2基因上游32.8 kb处1个A→G的单核苷酸多态性(SNP)标记(命名SNPCLPG)突变所产生的。为此,选择设计合成了1对引物,采用聚合酶链式反应一单链构象多态性(PCR—SSCP)方法,以巴什拜羊作为研究样本,进行了SNPCLPG位点的PCR检测。【结果】获得了预期的扩增片段,并检测到了基因多态性,但未检测到CLPG基因型特征的SNPCLPG突变(A→G)。【结论】被检测的巴什拜羊群体中该区域没有发现A→G的单核苷酸多态性标记突变。