摘要：本试验以牛Sry基因和Y染色体重复序列作为雄性特异性基因,分别设计引物,建立多重巢式PCR体系,比较二者在牛早期胚胎性别鉴定中的应用效果。试验结果表明,当扩增体系中的模板量为一个胚胎细胞的DNA量时,以Y染色体重复序列构建的扩增体系比Sry基因具有更高的灵敏度和稳定性,更适合用于牛早期胚胎性别鉴定。

摘要：本试验利用Y染色体重复序列作为雄性特异性引物,以肿瘤坏死因子(TNF-α)为内标引物建立多重PCR体系,进行牛早期胚胎性别鉴定。共设计四对引物—Y染色体重复序列外引物和内引物,其大小分别为534bp和480bp;肿瘤坏死因子外引物和内引物大小分别为357bp和272bp。试验结果表明,优化后的多重PCR体系的灵敏度分别达到3个胚胎细胞,准确率100%,可以满足早期胚胎性别鉴定的需要。

摘要：试验利用牛Y染色体重复序列作为雄性特异性引物,以肿瘤坏死因子(TNFα)为内标引物建立多重PCR和多重巢式PCR体系,进行牛早期胚胎性别鉴定。共设计4对引物—Y染色体重复序列外引物和内引物,其扩增片段大小分别为534bp和480bp,肿瘤坏死因子外引物和内引物,扩增片段大小分别为357bp和272bp。结果表明,4对引物均有很高的特异性和稳定性;多重PCR体系灵敏度为50pg(约8个细胞),多重巢式PCR体系灵敏度为10pg(约2个细胞),故多重巢式PCR体系更适合于牛胚胎性别鉴定。