摘要：目的研究RNA干扰技术（RNAi）沉默Hedgehog（Hh）信号转导途径中核心转录因子Glil基因表达后对U251细胞增殖与凋亡以及下游因子Bcl-2、Bax、cycinD1表达的影响。方法合成、转染4对针对GlilmRNA不同位点序列的siRNA（s8、59、60、61）至人胶质瘤U251细胞．RT-PCR检测细胞Glil mRNA的表达，筛选最有效抑制Glil mRNA表达的siRNA干扰片段（siRNA-Gill）；RT-PCR、Western blotting分别检测转染***后不同时间U25l细胞Glil mRNA和蛋白的表达，确定转染干扰的时间规律；实验分为3组：siRNA-Gli1组（转染筛选后siRNA-Gli1片断）、siRNA-NC组（转染阴性对照siRNA片断1、siRNA-N组（空白对照）。RT-PCR、Western blotting分别检测各组转染48h后U251细胞cyclin D1、Bcl-2及BoxmRNA和蛋白的表达，MTT、流式细胞术分别检测细胞增殖、凋亡及细胞周期的变化。结果干扰片断58、59、60、61、NC的转染效率均达69．2％；RT—PCR检测显示转染后48h U251-60细胞无明显GlilmRNA表达，选择60作为最佳干扰片段siRNA-Glil转染U251细胞，48h时无明显Glil mRNA和蛋白表达，确定48h为转染干扰的最佳时间；转染48h后与siRNA-N和siRNA-NC组相比，siRNA-Glil组U25l细胞Bcl-2、cyclin D1 mRNA和蛋白表达下调、Boxm RNA和蛋白上调，差异均有统计学意义（P〈0．05）。MTT检测显示24、48和72h时siRNA—Glil组细胞增殖抑制率均明显高于siRNA-NC和siRNA-N组，差异均有统计学意义（P〈0．05）。流式细胞术结果显示siRNA-Glil组细胞凋亡率高于siRNA-NC和siRNA-N组，差异有统计学意义（P〈0．05），且***组Gl／G0期细胞比例增加，S期细胞明显减少。结论针对Glil基因设计合成的siRNA-Glil能明显抑制人胶质瘤U251细胞生长并能诱导其凋亡，其机制可能与下调cyclin D1、Bcl-2的表达，上调Bax的表达有关。

摘要：目的通过研究复发胶质瘤与初发胶质瘤肿瘤组织中细胞增殖核抗原KI-67表达水平的变化,了解胶质瘤复发后肿瘤的侵袭性的变化规律。方法回顾性分析免疫组化发检测的20例复发胶质瘤患者的首次手术及复发后再次手术的胶质瘤组织中KI-67表达水平,自身前后配对设计t检验;两次手术间隔时间与KI-67之间相关性以Pearson相关分析。结果复发胶质瘤肿瘤组织中KI-67较首次手术肿瘤组织的明显增加,差异具有统计学意义(P0.05)。结论本研究表明:复发胶质瘤的侵袭性较初发胶质瘤明显增高且增高的幅度不受两次手术间隔时间影响。