摘要：金黄色葡萄球菌可以在人体内外寄生或污染食物,导致皮肤溃烂、免疫力下降和食物中毒等一系列症状,对人体健康构成危害。重组酶聚合酶扩增技术具有反应温度低、反应速率快和特异性高的特点,在不需要精密仪器的情况下能够更准确、高效、快速地检测出金黄色葡萄球菌。本文主要通过综述重组酶聚合酶扩增技术在金葡菌检测中的国内外现状以及其反应机理、引物设计方法等内容,探讨了其中的意义和存在的问题,并展望了该领域未来的发展前景,旨在为公共卫生和食品安全领域提供可行的解决方案。

摘要：目的:探究高校大学生用眼卫生现状,了解大学生的用眼卫生情况并进行用眼的健康干预方案设计,为改善大学生用眼卫生,提供科学方法,以培养大学生良好的用眼习惯及生活方式。方法:采用电子问卷的形式,利用简单随机抽样方法,在2022年7月~10月向本校健康与护理学院学生发放用眼卫生调查问卷。此次研究对象分为两组:将参与2022年3月~6月线上课程的学生列为线上课程组;参与2022年9月~10月线下课程的学生列为线下课程组。分别调查线上课程与线下课程中用眼卫生的基本情况。结果:线上课程与线下课程期间大学生都存在不良的用眼行为,用眼卫生情况不理想。由于网课学习,大学生对屏幕的使用增多,对用眼时长、距离、环境、姿势均产生更多的影响,但大学生对眼睛的重视程度反而变高。结论:无论哪种时期都需要一定的用眼健康教育,当代大学生要培养良好的用眼习惯,重视对眼睛的保护。

摘要：肌肉生长抑制素(myostatin,MSTN)是一种骨骼肌生长发育的负调控因子,可以抑制成肌细胞的增殖,是动物品种改良的重要候选基因,该基因突变能够引起骨骼肌的广泛性增生与肥大,产生“双肌”症状,导致动物脂肪分化减少、肌肉含量增加,从而满足市场动物肉品质消费的需求。为了获得“双肌”表型的MSTN基因突变克隆山羊,本研究在山羊MSTN基因第一外显子序列设计并构建TALENs表达载体,转染山羊胎儿成纤维细胞,经嘌呤霉素筛选获得抗性细胞株,通过PCR检测和基因测序筛选MSTN基因突变细胞株作为供核细胞进行山羊体细胞核移植,并鉴定MSTN基因突变类型;通过组织切片分析MSTN基因突变山羊肌肉组织形态结构,监测不同月龄克隆山羊体重并分析其不同生长发育阶段的体重增长趋势。结果表明,共获得109株MSTN基因突变细胞株,突变效率达到79.0%(109/138),其中46株为双等位基因突变,占细胞株总数的33.3%(46/138)。选取4株生长状态较好的MSTN基因突变细胞株(1株为双等位基因纯合突变,3株为非纯合突变)进行体细胞核移植至12只受体山羊,30 d时B超检查出受孕母羊4只,受孕率为33.3%(4/12),妊娠到期分娩2只克隆山羊,测序结果表明M-1克隆山羊MSTN双等位基因中的一个等位基因未产生突变,另一个等位基因缺失3 bp;M-2克隆山羊MSTN双等位基因中的一个等位基因产生1 bp碱基插入,另一个等位基因缺失13 bp,两种突变均造成MSTN在突变位点之后的蛋白序列丢失。此外,M-1克隆山羊肌纤维排列紧密且粗大,每月体重均高于普通野生型山羊,但与普通野生型山羊生长趋势一致,且能够健康发育至成年。本研究利用TALENs技术成功介导山羊MSTN基因定点修饰,并获得MSTN基因突变的山羊胎儿成纤维细胞,将其作为供核细胞成功生产MSTN基因突变克隆山羊,为培育“双肌”表型山羊新品系奠定了技术基础,也为将来其他转基因动物的制备提供了参考方法。

摘要：【目的】探究同源臂长度对CRISPR/Cas9系统介导人乳铁蛋白基因(hLF)打靶山羊β-乳球蛋白基因(BLG)座位点效率的影响,为今后体细胞核移植制备BLG-/hLF+基因打靶山羊提供科学依据,也为CRISPR/Cas9基因编辑系统介导BLG基因或其他基因座位点定向精准分子修饰的遗传育种提供借鉴。【方法】针对山羊BLG基因第一外显子区域设计构建sgBLG/Cas9载体,电转染山羊胎儿成纤维细胞,PCR验证BLG基因座位点致突变活性;以BLC14乳腺特异性表达载体为基础构建3种同源臂长度(6.0、3.5和1.2 kb)的hLF基因打靶载体,分别与sgBLG/Cas9载体共转染山羊胎儿成纤维细胞,经500μg/mLG418筛选后,采用PCR检测基因打靶情况。【结果】sgBLG/Cas9载体在山羊胎儿成纤维细胞BLG基因座附近切割DNA双链的致突变活性效率在30%~35%。构建获得3种同源臂长度的hLF基因打靶载体(BLC14-1、BLC14-2和BLC14-3),对应的同源臂长度分别为6.0、3.5和1.2 kb;将3种hLF基因打靶载体与sgBLG/Cas9载体共转染山羊胎儿成纤维细胞,经5次电转染和G418筛选,分别获得83、77和86株药物抗性细胞,经PCR同源重组检测最终获得42、38和44株BLG-/hLF+基因打靶细胞株,即hLF基因在山羊胎儿成纤维细胞BLG基因座的平均打靶效率分别为50.6%(42/83)、49.4%(38/77)和51.2%(44/86)。3种不同长度同源臂构建的hLF基因打靶载体在山羊BLG基因座位点的打靶效率在统计学上无显著差异(P>0.05),表明同源臂长度对CRISPR/Cas9介导hLF基因打靶山羊BLG基因座位点无显著影响。【结论】利用CRISPR/Cas9系统介导hLF基因打靶山羊胎儿成纤维细胞BLG基因座位点能成功获得多株hLF+/BLG-基因打靶细胞株(BLG基因座定点打靶hLF基因),但打靶载体同源臂长度对CRISPR/Cas9系统介导BLG位点定向整合hLF基因的打靶效率无明显影响。

摘要：为研究山羊乳蛋白基因编辑,实现羊乳"人源化"改造。利用CRISPR/Cas9系统敲除山羊乳中致敏原β-乳球蛋白(BLG)基因,同时在BLG基因座定点敲入人乳铁蛋白(hLF)基因。针对山羊BLG基因第一外显子设计构建sgBLG/Cas9表达载体经电转染山羊胎儿成纤维细胞验证其编辑活性;将打靶载体BLC14与sgBLG/Cas9载体共转染山羊胎儿成纤维细胞,经筛选检测获得BLG^-/hLF^+打靶细胞株作为供核细胞用于山羊体细胞核移植;通过剖宫产获取克隆胎儿并验证其中靶情况。结果表明:sgBLG/Cas9编辑山羊BLG位点致突变率约为30%~35%;共筛选72株药物抗性细胞株,其中有37株为基因打靶细胞,打靶效率为51.4%(37/72);挑取形态较好的7株打靶细胞用于核移植,共制备416枚重构胚,移植30只受体山羊;30-35日龄B超诊断有13只受孕,妊娠率为43.3%(13/30);剖宫产获取3只35日龄克隆胎儿均验证为BLG^-/hLF^+基因型,并建立了BLG^-/hLF^+靶向性修饰细胞系。因此,利用CRISPR/Cas9系统可以获得BLG基因座定点打靶hLF基因的转基因克隆山羊,该研究为培育羊乳中低致敏原和富含hLF功能营养成分的转基因山羊新品系提供了科学依据。

摘要：为研究“雨课堂”智慧教学模式形成性评价体系在组织学与胚胎学课程教学中的应用,以2018级护理专业一个班的学生(52人)为实验组,对照组为2018级护理专业另外1个班(50人)的学生。对照组采用传统的一次性终结性评价,实验组采用形成性评价和终结性评价相结合的教学考核体系,基于“雨课堂”进行形成性评价设计调查问卷,掌握学生对形成性评价的满意度。实验组最终期末成绩均显著高于对照组。实验组96.2%的学生认为形成性评价提升了学习能力,超过90%的学生认为形成性评价促进了学习,提升了实验素养,而且只有1名学生认为形成性评价增加了学习负担,96.1%的学生赞成形成性评价的考核方式。本次在学生中开展的组织学与胚胎学教学的形成性评价制定了详细而操作性强的评价体系,为后续开展教学奠定基础。将“雨课堂”作为同步反馈形成性评价的工具,体现了“雨课堂”的优势,其作为先进的教学工具,值得推广。

摘要：目的:了解无锡市家禽从业人员对H7N9禽流感知识知晓情况、个人防护现状以及疫苗接种情况,以针对性地开展预防措施,提高家禽从业人员对H7N9禽流感的预防意识.方法:对禽类从业人员采用自行设计的禽流感知识认知水平调查问卷进行面谈式调查,使用Stata14.0软件进行数据统计分析,率的检验采用χ2 检验和Fisher精确检验.结果:共调查全市禽类从业人员105名,H7N9禽流感传染源为甲型流感病毒知晓率为28.57%;调查对象接种过流感疫苗的占45.71%.活禽市场从业人员每次都戴手套的概率要高于私人养殖户,且差异具有统计学意义.家禽从业人员中接种过流感疫苗的占45.71%,流感疫苗接种率与年龄、文化程度及职业场所有关,差异有统计学意义.结论:对禽类从业人员需进一步加强禽流感相关知识健康教育,职业防护和提高疫苗接种率.

摘要：混合式教学模式已经成为高等教育改革的重要内容和发展方向。如何构建可迁移的教学策略,将原有的混合式学习有效地迁移到当前的课程当中,是教学改革的关键步骤。文章从理论、模型、策略等方面深入研究,以建构主义和奥苏贝尔学习理论作为基础,提出了T-PBL(Transfer Problem-Based Learning)混合式教学方式和应用策略,主要包括教学方式设计和混合式学习环境搭建等,并通过课程实施验证该理论在实际教学中对学生指导的重要作用。