摘要：目的观察应用小分子干扰RNA（siRNA）技术抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞中Survivin表达对细胞凋亡和细胞增殖的影响。方法设计、合成特异性抑制Survivin表达的siRNA，转染瘢痕疙瘩成纤维细胞，通过半定量逆转录一聚合酶链反应（RT—PCR）及Western blot检测24h和48h后成纤维细胞内Survivin mRNA和蛋白变化，流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率，噻唑蓝（MTF）测定成纤维细胞的增殖。结果重组质粒成功转染瘢痕成纤维细胞，转染效率为67．0％；阳性质粒转染24h后，Survivin mRNA和蛋白表达明显降低，抑制率分别为52．2％和54．8％（P〈0．05），48h后抑制率增至75．7％和76．7％。阳性质粒转染24h凋亡率为11．9％，48h增加至21．2％，显著高于阴性对照组和未处理组；细胞周期检测阳性质粒干扰组s期细胞减少，G2／M期所占比例增高，出现了G2／M期阻滞现象；MTF测定阳性质粒干扰组细胞生长曲线平缓。结论特异性siRNA可以有效干扰瘢痕疙瘩成纤维细胞内Survivin mRNA和蛋白的表达，诱导细胞的凋亡和抑制细胞的增殖。

摘要：背景：骨组织工程支架材料中PDPB是一种较为理想的骨移植材料，目前多采用体外培养的骨髓基质干细胞与支架材料构建组织工程骨后修复骨缺损。目的：实验拟验证骨髓基质干细胞与PDPB体外构建组织工程骨的最佳浓度及移植入体内的最佳时机。设计．时间及地点：随机分组设计，对照观察，于2007—10／12在中国科学院动物研究所完成。材料：2周龄日本大耳兔，体质量2．0kg左右，用于培养骨髓基质干细胞。取新鲜的猪椎骨制备PDPB。方法：传代培养骨髓基质干细胞，矿化液对兔骨髓基质干细胞进行分化鉴定后，取不同浓度（1×10^10L^-1、5×10^9L^-1、1×10^9L^-1、5×10^8L^-1）的兔骨髓基质干细胞与PDPB复合体外构建组织工程骨。主要观察指标：倒置显微镜下观察细胞的生长形态：扫描电镜观察骨髓基质干细胞在PDPB上的黏附情况：四甲基偶氮唑盐法检测各浓度骨髓基质干细胞在PDPB上的生长情况。结果：①原代培养24h部分细胞开始贴壁，6d后贴壁生长的细胞数量增多，10--12d集落逐渐增大，并融合为单层。经矿化液诱导培养21d后，行矿化沉积茜素红染色及碱性磷酸酶细胞化学染色，可见大量细胞呈碱性磷酸酶阳性及大量钙结节形成。②扫描电镜观察骨髓基质干细胞在PDPB上黏附良好，第8天时细胞和材料结合紧密。第10天细胞呈梭形生长，部分细胞突起翘起。③各浓度组骨髓基质干细胞在PDPB上的生长曲线形态基本相同，呈“S”形。2-6d细胞开始在支架材料上大量增殖，第6天后细胞活力逐渐降低，其中5×10^9L^-1浓度骨髓基质干细胞复合PDPB后细胞可以很好的黏附，细胞活性好。结论：骨髓基质干细胞和PDPB复合的最佳浓度是5×10^9L^-1，移植的最佳时机为6d。

摘要：背景:少数民族体质研究小组已对云南省傣族、彝族、拉祜族、傈僳族等15个少数民族头面部器官进行微机测量,而布朗族头面部器官的微机测量还未进行。目的:对云南省双江县邦丙乡布朗族头面部器官41个测量项目和17个头面部指数进行全面系统的测量。设计:横断面调查。单位:昆明医学院第二附属医院口腔颌面整形外科。对象:选择2002-05/10在云南省临沧地区双江县邦丙乡世居布朗族人为观察对象,随机选取布朗族155人,均为纯布朗族血统,父母三代以上均为布朗族。其中男96人,女59人,头颅及颌面部器官形态及功能正常。方法:令被测者端坐,用头颅固位仪将被测者头颅固定,使其眶耳平面(或称法兰克福平面)与水平面平行,用记号笔在头面部对测量点进行标记;在距被测者5m处用摄像机摄录被测者头面部图像;将所取图像输入计算机存盘备用;采用自行编制的微机测量软件对所取图像进行头面部指数的测量。观察项目的判定标准:唇峰间距、单侧唇长、眼裂高、鼻小柱宽和鼻孔宽参照许彪等的定位点,额鼻角、鼻唇角和鼻角参照马延豪等的定位点外,还自定了上睑高的定点法,其余各项均参照《人体测量学手册》和《人体测量方法》的要求设定。主要观察指标:①41个测量项目:颧最小宽、面宽、两眼内宽、瞳孔距、眼裂宽、口裂宽、唇峰距、单唇长、眼裂高、容貌额高、容貌面高Ⅰ、容貌面高Ⅱ、形态面高、容貌面高Ⅲ、容貌上面高、鼻高、唇高、全上唇高、全下唇高、面下1/3高、颏高、上睑高、鼻宽、鼻柱宽、鼻孔宽、两下颌角间宽、外耳宽、鼻长、鼻深、容貌耳长、容貌耳宽、额鼻角、鼻唇角、鼻角、头最大宽、两耳屏宽、头最大长、头耳高、全头高、头水平围。②17个头面部指数:头长宽、头长高、头宽高、额顶宽、容貌面、形态面、容貌上面、鼻指数、鼻宽深、口指数、容貌耳、额面高、面上面高、颧下颌宽、颧额宽、头面高、头面宽。结果:参加调查的151人全部进入结果分析。①头面部器官各测量项目:除容貌耳长、鼻额角两个项目所测值女性大于男性,其余所测项目均是男性大于女性。经统计学分析,除上睑高、鼻柱宽、容貌耳宽、鼻额角、鼻角、两耳屏宽、全头高、头水平围8个项目所测值男女两性比较差异无显著性(P>0.05),其余各项所测值男女两性比较差异显著。②头面部器官各指数:除头长宽指数、头宽高指数、额顶宽指数、容貌面指数、形态面指数、鼻指数、容貌面指数、额面高指数、颧下颌宽指数、颧额宽指数、头面高指数男女两性比较差异无显著性(P>0.05),其余各项所测值男女两性比较差异显著。结论:双江县邦丙乡布朗族头面部器官41个测量项目中多数测量项目存在差异,表现为男性测量值大于女性测量值和17个头面部指数中多数指数无差异。

摘要：背景:长波紫外线与人体皮肤光老化关系密切,线粒体的损伤是细胞衰老和死亡的分子基础。目的:观察长波紫外线照射对体外培养的皮肤成纤维细胞的线粒体脱氧核糖核酸缺失损伤的影响,以及转化生长因子β1对长波紫外线引起的线粒体DNA缺失有无保护作用。为皮肤光老化研究提供实验依据。设计、时间及地点:实验于2007-03/2008-04于解放军第四军医大学西京医院全军整形外科研究所完成。材料:转化生长因子β1为PerProtech公司产品;线粒体DNA 4977 bp引物由上海生工合成;长波紫外线光源为北京光学仪器厂生产;紫外线辐照计为北京师范大学光电仪器厂生产。方法:收集20～23岁成年男性包皮环切术后的皮肤组织12例,体外培养成纤维细胞。将细胞分组为对照组、长波紫外线累计照射达到30,60,90J/cm2组,半定量PCR检测DNA 4977 bp缺失情况。不同质量浓度转化生长因子β1(0.1,1,10μg/L)干预长波紫外线累积照射达90J/cm2的皮肤成纤维细胞。主要观察指标:观察不同累积照射剂量产生的DNA 4977 bp缺失;观察累积照射剂量90J/cm2后不同浓度转化生长因子干预对DNA 4977 bp缺失的影响。结果:体外培养的皮肤成纤维细胞经长波紫外线照射,长波紫外线累积剂量为长波紫外线60J/cm2后发生线粒体DNA 4977 bp缺失,长波紫外线90J/cm2时缺失加重。吸光度值和PCR产物电泳及条带密度扫描结果显示,在照射前2h加入不同剂量转化生长因子处理后,大剂量组(10μg/L)线粒体DNA表达降低,中、小剂量组与长波紫外线照射组比较,差异无显著性意义。结论:一定剂量(10μg/L)转化生长因子对体外培养的成纤维细胞线粒体DNA缺失起到保护作用。

摘要：背景:尽管骨髓来源和脂肪来源的间充质干细胞均具有向骨和软骨分化潜能,但终究带有各自来源组织的特点,那么是否意味着两者在非基因影响下成骨特性存在一定差异呢?目的:比较大鼠骨髓和脂肪来源的间充质干细胞在体外成骨分化中的特性区别。设计、时间及地点:细胞学体外对照观察,于2007-07/2008-03在中国科学院昆明动物研究所国家级重点实验室完成。材料:6周龄和18周龄SD大鼠各2只,分别用于制备骨髓间充质干细胞和脂肪间充质干细胞。方法:选取第3代骨髓间充质干细胞和脂肪间充质干细胞,按5×107L-1接种后各分为2组:诱导组加入含10-8mol/L地塞米松、10mol/Lβ-甘油磷酸、50mg/L维生素C的成骨诱导培养基1.5mL,未诱导组不加入成骨诱导培养基。主要观察指标:碱性磷酸酶染色与茜素红染色结果,碱性磷酸酶和骨钙素定量分析结果。结果:成骨诱导7,14d,经诱导的骨髓基质干细胞和脂肪间充质干细胞呈碱性磷酸酶阳性,有钙结节形成,未诱导组呈阴性。成骨诱导3,7,10d,未诱导组间比较碱性磷酸酶及骨钙素含量均基本相似(P>0.05);与未诱导组比较,脂肪间充质干细胞诱导组碱性磷酸酶及骨钙素含量均明显升高(P<0.05),骨髓间充质干细胞诱导组升高幅度更为显著(P<0.001)。结论:大鼠骨髓来源间充质干细胞体外成骨性能强于脂肪来源间充质干细胞,在骨组织工程种子细胞的选用中应优先考虑前者。