摘要：计算机辅助教学 (CAI)是现代化教育技术的重要组成部分。我们利用多媒体形象、多样化表达及交互性强的特点 ,将文本、声音、图片、动画、录像等有机结合在一起 ,设计制作了卫生部CAI课件《医学微生物学图鉴》。教学实践表明 :本课件在教学中的应用提高了微生物学的教学质量 ,促进教学的整体改革 ,优化教学过程 ,取得较好的教学效果 。

摘要：背景:Hsp65和Esat6之间的Linker编码一段疏水性多肽,其具有良好的柔顺性和折叠性,有利于翻译成融合蛋白时融合蛋白之间的空间折叠,使融合蛋白保持与两个天然蛋白空间构象的一致性,从而形成正确的构型而提高它们的免疫原性。目的:从结核分枝杆菌(MTB)H37Rv株中克隆目的融合基因Hsp65-Esat6,与报告基因EGFP一起构建真核表达载体pEGHsp65-Esat6,通过免疫组织化学法分别检测细胞中Hsp65蛋白和ESAT-6蛋白的表达。设计:单一样本实验。单位:暨南大学医学院微生物免疫学教研室。材料:质粒pVAE由华南理工大学曹以诚教授惠赠,MTBH37Rv株、大肠杆菌DH5α、表达质粒pEGFP-C1为本实验室保存,Hela细胞由本教研室胡萍博士惠赠。方法:实验于2005-09/2006-06在暨南大学医学院微生物与免疫教研室和中心实验室完成。以MTB全基因组为模板经聚合酶链反应(PCR)扩增出Hsp65基因(不含终止子),与pEGFP-C1载体进行重组,构建pEGHsp65(不含终止子)重组质粒。再以pVAE质粒为模板,经PCR扩增出Linker-Esat6基因,与pEGHsp65质粒(不含终止子)进行重组,构建真核表达载体pEGHsp65-Esat6。通过限制性内切酶图谱测定pEGHsp65-Esat6融合质粒大小;对质粒pEGFP-C1的多克隆位点内的DNA序列进行序列分析鉴定;将质粒转染Hela细胞,观察荧光的表达情况及转染效率,通过免疫组织化学法分别检测细胞中Hsp65蛋白和ESAT-6蛋白的表达。主要观察指标:①pEGHsp65-Esat6融合质粒大小。②pEGFP-C1DNA序列分析。③转染后Hela细胞的荧光表达情况。④细胞中Hsp65蛋白和ESAT-6蛋白的免疫组织化学结果。结果:①质粒pEGFP-C1的大小约为4.7kb,而pEGHsp65为6.4kb,融合质粒pEGHsp65-Esat6约为6.7kb,在琼脂糖凝胶电泳图上可以分辨出泳动速度的差异。②结果与结核分支杆菌H37Rv株的Hsp65和Esat6的基因序列完全相同。③转染融合质粒24h后,使用共聚焦显微镜可观察到有部分细胞表达荧光蛋白,说明融合质粒转染成功,转染率约为30%。未转染的Hela细胞则无荧光表达。④通过免疫组织化学法证实融合质粒在Hela细胞内能正确表达出具有生物学活性的Hsp65与ESAT-6蛋白。结论:采用Hsp65和Esat6搭配作为免疫原,成功克隆并构建了结核分枝杆菌融合基因Hsp65-Esat6荧光真核表达质粒。

摘要：随着新教学模式的不断尝试，网络课程也成为了一种新的教学方法。利用多媒体形象、多样化表达及交互性强的特点，将文本、声音、图片、动画、录像等有机结合在一起，设计制作了医学微生物学网络课程。教学实践表明：本网络课程在教学中的应用提高了微生物学教学质量，促进教学的整体改革。优化教学过程。取得了较好的教学效果，从微生物学教学的实践出发，浅谈医学网络课程教学的优势和注意要点。

摘要：目的对目前临床上用于检测结核分枝杆菌(MTB)及其耐药性的传统及分子生物学方法进行系统评价,为设计合理的诊断路径提供指导意义。方法对标准菌株(H37Rv)、敏感、单耐及耐多药MTB进行梯度浓度稀释后,作为评估的实验样本,从检测结果的准确性、检测周期、最低检出限方面对不同方法进行评价。结果MTB检测方面,XpertMTB/RIF检测MTB的检出下限(3×10~2cfu)与培养法相当,比基因芯片和GenoType~ MTBDRplus的检出下限低;耐药性检测方面,在MTB含量不足(≤3×10~2cfu)的情况下XpertMTB/RIF对利福平(RFP)的检测存在假阳性结果,GenoType~ MTBDRplus检测3×10~4cfu链霉素耐药MTB时出现RFP和异烟肼(INH)耐药的假阳性结果;检测周期方面,XpertMTB/RIF在2 h内可完成报告,基因芯片和GenoType~ MTBDRplus在当天8 h内可完成报告,培养及比例法药敏需4~8周可报告结果。结论目前不同的MTB及耐药检测方法各有优缺点,在临床应用方面应综合考虑患者的病情、经济状况等选取合理的诊断路径。