摘要：目的:探讨沉默HeLa细胞的ClC-3氯通道基因后细胞周期分布的变化及其作用机制。方法:依照siRNA设计原则构建沉默ClC-3基因的ClC-3 siRNA并转染HeLa细胞;实验分为空白对照组(control组)、转染试剂对照组(Lipo组)、阴性对照组(negative siRNA组)和ClC-3 siRNA组。采用real-time PCR检测ClC-3 siRNA的沉默效率;流式细胞术检测细胞周期分布情况;Western blot检测ClC-3蛋白及相关细胞周期蛋白(cyclin)D1、细胞周期蛋白依赖激酶(cyclin-dependent kinase,CDK)4、CDK6、P21和P27等表达。结果:CIC-3 siRNA成功沉默HeLa细胞的ClC-3基因。和其它组相比,ClC-3 siRNA组的细胞周期被阻抑在G_0/G_1期。CIC-3 siRNA组的cyclin D1、CDK4和CDK6蛋白表达水平明显下降,P21和P27蛋白表达水平明显上升。结论:沉默HeLa细胞ClC-3氯通道基因可影响cyclin D1、CDK4、CDK6、P21和27蛋白的表达水平胆抑HeLa细胞周期停滞在G_0/G_1期。

摘要：病理生理学是一门理论性极强的学科,合理的将网络的新型教育模式应用于教学可以达到提高教学效果的目的。但在实际操作中若没能正确地认识多媒体技术或缺乏经验,多媒体教学效果反而不够理想。因此,在教学中正确的运用多媒体技术,处理好与传统教学的结合,以期达到事半功倍的效果。(1)发挥教师在教学中的主导地位和作用。教师不能简单地播放和照"屏"宣读,应正确处理好多媒体和粉笔、黑板、普通教具、语言表达之间的关系,调动学生积极参与。(2)多媒体模拟实验教学不能替代实际操作。"模拟"实验不等于真实,实际操作可更好地培养学生实验技能。(3)多媒体教学是教育性、科学性、艺术性的体现,但不能华而不实。充实的教学内容与完美的外在形式的有机结合,才能真正达到传授知识、调动学生积极性的目的。(4)利用网络教学平台开展病例讨论教学。本教研室基于学校引进的Blackboard网络教学平台,开展教师与学生以及学生之间围绕临床病例交流讨论、辅导答疑的病例讨论模式。既有助于教师全面指导学生,又培养学生综合能力,发挥病理生理学作为桥梁课程的作用。

摘要：目的:探索定向转染内源性光感受蛋白黑视素(melanopsin/opsin 4,Opn4)基因进入给光型双极细胞后,视网膜变性小鼠模型中视网膜神经元的光反应以及整体视觉行为的改变。方法:选用由甲基亚硝基脲(N-methyl-N-nitrosourea,MNU)诱导的成年CD1小鼠作为视网膜变性模型。于P0～P1 CD1乳鼠视网膜底注射Grm6-Opn4-GFP质粒,Grm6-GFP作为阴性对照。通过电转进行基因转染。术后5周对基因转染小鼠腹腔注射MNU诱导视网膜感光细胞变性,对照组注射生理盐水,共设计5个实验组:正常对照组(normal)、生理盐水Grm6-Opn4-GFP对照组(NS+melanopsin)、MNU诱导模型Grm6-Opn4-GFP治疗组(MNU+melanopsin)、MNU诱导模型Grm6-GFP对照组(MNU+GFP)和MNU诱导组(MNU)。诱导后连续7 d进行明暗箱测试,统计动物在暗箱中的活动时间比。随后进行视网膜电图(electroretinogram,ERG)测试,计算体现给光双极细胞光反应的b波峰值、潜伏期和反映视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)光反应的明视负波反应(photopic negative response,PhNR)。利用免疫荧光法检测动物视网膜黑视素基因转导效果。结果:黑视素可以被定向转染进入视网膜给光双极细胞。明暗箱实验显示MNU诱导7 d后Grm6-Opn4-GFP转染的CD1小鼠滞留在黑箱的时间显著长于未转染组(P<0.05),ERG测试显示Grm6-Opn4-GFP转染的CD1小鼠的b波也有明显恢复(P<0.05)。结论:定向转染内源性光感受蛋白黑视素基因进入给光型双极细胞可部分恢复视网膜变性模型动物视觉。

摘要：目的:筛选高效沉默单纯疱疹病毒1型(HSV-1)US12基因的siRNA,研究siRNA沉默US12基因后对HSV-1增殖的影响。方法:构建pEGFP-N1-US12融合表达质粒,设计并化学合成3对靶向US12基因的siRNA,与pEGFP-N1-US12融合表达质粒共转染Vero细胞,流式细胞术筛选高效抑制pEGFP-N1-US12融合蛋白的siRNA,实时荧光定量PCR检测siRNA对细胞内US12 mRNA表达水平的抑制效果,空斑减数实验评价siRNA对HSV-1增殖的抑制效果。结果:共转染实验筛选出高效抑制pEGFP-N1-US12融合蛋白的siR-NAS121、siRNAS122及siRNAS123。3对siRNA均能显著降低感染细胞US12 mRNA的表达水平,但空斑减数实验均未发现3对siRNA对HSV-1的增殖有显著抑制效果。结论:成功构建pEGFP-N1-US12融合表达质粒,筛选到高效抑制US12基因表达的3对siRNA,但是对病毒的体外增殖无显著影响,表明US12表达的立即早期蛋白ICP47的功能可能与HSV-1体外增殖无直接相关。

摘要：目的调查孕妇对剖宫产的选择意愿,为孕妇学校提供科学的建议。方法采用前瞻性调查设计,对广州军区广州总医院、南方医科大学珠江医院、南方医科大学第三附属医院3所医院产前待产或产检的无剖宫产指征孕妇通过问卷调查了解孕妇对剖宫产的选择意愿及相关的影响因素。结果 244例孕妇中选择剖宫产37例(15.2%),顺产165例(67.6%),顺产或剖宫产都可以42例(17.2%)。孕妇的年龄、职业、文化程度、家庭收入、是否有孕期合并症、是否有参加孕妇学校是影响孕妇剖宫产意愿的因素。结论加强科普知识宣教,增加孕妇对顺产的信心,加强助产人员指导,有利于降低剖宫产率。