摘要：本文研究了云芝菌株在模拟废水中生长,获得对废水较高的漂白效果以及最大菌丝体产量的培养基成份为:模拟废水培养基中初始外加碳源-葡萄糖添加量为1%、氮浓度范围是6～12mmol/L、CaCl2浓度为0.05mol/L、RS为消泡剂。利用均匀实验设计结果表明氮浓度是影响云芝对废水脱色率的主要因素,氮源与VB1含量的交互作用项对生物量的影响最为显著。

摘要：目的:设计构建和表达新型融合蛋白谷胱甘肽-碱性成纤维细胞生长因子(Glutathione-basic fibroblast growth factor,GSH-b FGF),并检测其体外抗氧化、抗衰老能力.方法:采用RT-PCR,酶切,连接,转化等分子克隆技术构建新型融合蛋白GSH-b FGF,并通过镍柱亲和层析、阳离子交换层析纯化该目的蛋白.通过CCK-8试剂盒检测GSH-b FGF对鼠源成纤维细胞NIH-3T3的促增殖活性.同时,经总抗氧化检测试剂盒检测GSH-b FGF的抗氧化能力.结果:克隆表达并纯化获得融合蛋白GSH-b ***-8促增殖结果显示质量浓度为20 ng/m L的GSH-b FGF可显著促进鼠源成纤维细胞NIH-3T3增殖.体外抗氧化结果显示GSH-b FGF有显著的抗氧化活性,纯化得到的GSHb FGF蛋白的GSH浓度约为(0.06±0.02)μmol/L,抗氧化能力为(0.56±0.23)mmol/g.结论:新型融合蛋白GSHb FGF有显著的体外促增殖能力及抗氧化活性.

摘要：引导序列GSs(GuideSequences)是能与mRNA互补 ,引导核酶RNaseP催化核心M1RNA对互补区域特异切割的小片段游离RNA。针对人巨细胞病毒HCMV(humancytomegalovirus)DNA聚合酶mRNA序列设计GS ,共价结合到大肠杆菌来源M1RNA中 ,构建成M1GS T7核酶。通过对巨细胞病毒DNA聚合酶亚克隆片段转录产物体外切割实验 。

摘要：目的构建对HCV基因组具有特异切割作用的新型靶向性核酶-M1GS。方法针对HCV基因组的保守区（5′UTR）设计并合成一段引导序列,通过PCR扩增直接将该引导序列连接于大肠杆菌核糖核酸酶P的催化亚基（M1 RNA）的3′末端,从而构建一类靶向性M1GS核酶。结果体外切割实验表明,所构建的核酶（M1GS-HCV/C67）对HCV5′UTR具有明显的切割作用,切割的位点在靶序列67~68 nt之间,属于特异性切割。结论构建了一种对HCV5′UTR具有靶向切割活性的M1GS核酶,为胞内反义效应及动物模型内抗病毒效应的评价提供了实验材料,为新型抗HCV药物的研究奠定了基础。

摘要：根据EDN1第 4内含子设计相应引物 ,建立检测EDN1第 4内含子TaqI多态性PCR +RFLP技术。利用该技术 ,扩增到具有特异性的PCR产物 ,长为 3 5 8bp。经限制性核酸内切酶TaqI酶酶切检测中国汉族人群该片段多态性状况。实验显示中国汉人群中存在该位点的多态性。基因T1的频率为 0 .664;T2 基因型频率为 0 .3 3 6;T1Tl 基因型频率为 0 .4 18;T1T2 基因型频率为 0 4 92 ;T2 T2 基因型频率为 0 0 90。

摘要：为提高抗菌肽的表达 ,设计在抗菌肽基因的N端融合一段编码酸性肽的片段以减轻表达产物对宿主的毒性 ,通过含有酶切位点的接头将该融合肽基因以同向串连的方式连接成多拷贝基因 ,克隆至pUC19载体。为此 ,分段设计合成了编码天蚕素A -蜂毒素杂合肽和酸性肽的DNA片段。首先将其连接成融合肽全基因 ,然后分别与含相同粘性末端的前后接头连接。通过控制基因和接头加入的量及次序 ,可得到两侧有EcoRⅠ和SalⅠ酶切位点的同向串连的多拷贝基因。选取合适拷贝数的基因 ,将其克隆至pUC19载体 ,PCR扩增和DNA测序证明多拷贝基因构建成功且基因方向相同。结果表明 ,该方法能简捷高效地获得所需的多拷贝基因 。

摘要：目的确定中国澳门地区产超广谱B内酰胺酶（ESBLs）的大肠埃希菌的ESBLs基因型，并与沈阳地区产ESBLs的大肠埃希菌的ESBLs基因型进行比较。方法分别收集澳门与沈阳地区分离的大肠埃希菌209株、150株。按美国临床和实验室标准协会（CLSI）2006年所定标准确定ESBLs表型，并对ESBLs表型阳性的菌株测试其等电点（pI）值，根据pI值范围设计引物，对其进行PCR扩增，扩增产物测序，测序结果与GenBank比对，确定ESBLs的基因型。结果（1）澳门与沈阳地区产ESBLs大肠埃希菌阳性检出率分别为30．1％（62／209）、54．0％（81／150）。（2）57株（90．5％）澳门产ESBLs的大肠埃希菌基因型为CTX-M，以CTX-M-14为主、占76．2％，并同时发现CTX-M-9、CTX-M-22、CTX-M-27、CTX-M-15、CTX-M-24型，分别占4．8％、3．2％、1．6％、1．6％、3．2％；6株未分型。（3）74株（91．4％）沈阳地区产ESBLs的大肠埃希菌基因型为CTX-M，以CTX-M-14为主、占65．4％，发现CTX-M-3、CTX-M-24、CTX-M-22、CTX-M-15、CTX-M-9、CTX-M-28型，分别占13．6％、4．9％、2．5％、2．5％、1．2％、1．2％；7株未分型。结论澳门产ESBLs大肠埃希菌基因型为CTX-M型，以CTX-M-14为主，同时存在CTX-M-15、CTX-M-22、CTX-M-24、CTX-M-9、CTX-M-27型，基因型与沈阳地区菌株基本相同，未发现CTX-M-3、CTX-M-28型。沈阳地区菌株未发现CTX-M-27型。