摘要：目的建立一种快速、灵敏、特异性高的方法定量检测丙型肝炎病毒RNA。方法根据丙型肝炎病毒基因5’UTR序列中8个基因区段设计3对特异引物同时加入SYBRGreenⅠ染料在反转录酶和BstDNA聚合酶的作用下60℃等温条件下扩增1h后根据荧光曲线进行定量。结果120例经实时荧光定量PCR检测阳性的血清样品进行检测阳性符合率100％。110例健康体检者的血清经两种方法检测均阴性。对卫生部临检中心提供10’IU／ml的质控样本采用阴性血清稀释后进行灵敏度的实验，结果显示荧光定量环介导逆转录等温扩增（RT—LAMP）技术可检出10IU／ml浓度的RNA分子颗粒。结论成功建立了荧光定量环介导逆转录等温扩增技术检测丙型肝炎病毒的方法。恢技术具有快速、灵敏度高、特异性强的特点。

摘要：HBV感染呈全球流行趋势，严重危害了人类的身心健康。目前根据HBV基因全核苷酸序列异源性≥8％或S基因区核苷酸异源性≥4％将HBV毒株分为A～I九种不同基因型，HBV毒株在不同的地域流行趋势存在明显差异，我国主要流行B、C两种基因型。HBV基因型对HBV感染者的治疗以及预后判断具有重要意义，然而目前HBV基因分型检测方法存在操作繁琐或检测灵敏度不够理想等问题。为解决上述问题，我们根据HBV基因型序列特征，设计了B、C特异型的恒温扩增引物，同时结合SYBR Green I荧光染料，建立了实时荧光恒温扩增技术检测HBV基因B、C型的实验方法。

摘要：目的了解浙江杭州地区乙型肝炎病毒(HBV)基因型分布,初步评价基因芯片技术在HBV基因分型中的应用特点。方法设计多条寡核苷酸探针,用点样仪将探针固定于芯片特定位置上,并与PCR扩增的106例HBV感染者血清HBV基因相应区段杂交,经过显色反应,分析杂交结果,判定基因类型。结果106例HBV感染者中,基因型B者37例,占34.91%,基因型C者69例,占65.09%,未发现其他基因型。结论杭州地区存在HBV基因型B、C型,基因型A、D、E、F是否存在须扩大样本,进一步深入研究。基因芯片技术在同类检测方法中具有灵敏、准确、快速的优势,适用于临床。

摘要：目的建立检测甲型H1N1病毒环介导等温扩增的方法（LAMP）。方法根据已公布的甲型H1N1流感病毒HA基因序列766—995bp的6个位点设计6条LAMP引物（2条内引物，2条外引物，2条环引物），优化并建立LAMP检测体系。并对36例确诊H1N1感染患者和20例健康体检者的咽式子同时采用实时荧光RT—PCR（Real—timeRT—PCR）和LAMP进行H1N1病毒核酸的检测。结果所建立的甲型H1N1病毒核酸LAMP反应体系具有良好的特异性，采用该体系检测结果与Real—timeRT—PCR检测结果一致，对H1N1核酸阳性的标本经LAMP扩增产物电泳图为阶梯状条带，健康对照标本未见条带产生。灵敏度试验，采用10^3复制的H1N1质粒进行10倍稀释后LAMP法仍能检出。特异性试验，20例体检标本经两种方法检测全阴性，对肺炎支原体和肺炎衣原体阳性标本采用该反应体系进行检测结果为阴性。结论甲型H1N1病毒核酸LAMP检测方法简便、快捷，对实验仪器设备要求不高，适合各级实验室和现场快速诊断使用。