摘要：目的建立一种快速、准确、特异性高的方法检测手足口病病原体。方法根据引起手足口病常见致病原肠道病毒71（EV71）、柯萨奇病毒A16（CA16）及肠道病毒（EV），设计相应的引物、探针对35例临床诊断的手足口病患儿及20例正常健康婴儿的粪便进行EV、EV71、CA16三种病原体实时荧光RT-PCR检测，同时对55分标本进行EV71病毒培养分离。结果35例临床诊断手足口病患儿粪便中EV全部阳性，EV71阳性25例，CA16阳性8例，其中3例为EV71、CA16同时阳性，与临床诊断符合率为85．71％，20例健康体检婴儿粪便中EV病毒5例阳性，EV71、CA16均阴性。结论荧光RT-PCR对手足口病病原体检测准确性高、特异性强，具有快速、廉价等特点，适合于手足口病的早期诊断。

摘要：目的建立一种灵敏度高、特异性强、检测速度快的方法检测解脲支原体。方法基于环介导恒温扩增技术(LAMP),根据解脲支原体序列特征设计3对引物进行解脲支原体DNA切口酶核酸恒温扩增,扩增过程在一对引物中标记生物素,随着扩增的进行生物素直接引入扩增片段中,扩增结束后产物在密闭装置中进行免疫试纸条显色反应,根据显色卡的颜色判定结果的阴阳性。结果该技术检测解脲支原体较实时荧光PCR技术灵敏度要高10倍以上,其它病原体检测均阴性该方法特异性与实时荧光PCR技术相当。结论恒温扩增联合试纸条技术检测解脲支原体具有较高的敏感性和特异性,检测速度快,适合各医院开展。

摘要：目的建立一种快速、灵敏度高、特异性强的核酸试纸条检测甲型H1N1流感病毒。方法根据2009年公布新型甲型H1N1流感病毒基因组序列设计合理的引物建立环介导恒温扩增体系,并在体系中加入含生物素的标记探针;在恒温下扩增45 min后产物与醋酸纤维棉片结合进行胶体金免疫试纸条显色反应,利用该方法检测76例确诊甲型H1N1流感病毒感染患者的咽部分泌物,同时采用卫生部公布的合格试剂盒进行对比试验。结果 76例确诊患者咽部分泌物经核酸试纸条检测全阳性,经对比试剂盒检测103拷贝/ml的标本进行10倍稀释后采用核酸试纸条检测结果仍能测出。结论核酸试纸条法检测甲型H1N1流感病毒具有快速、灵敏度高、特异性强的特点更适合于临床快速诊断。

摘要：HBV感染呈全球流行趋势，严重危害了人类的身心健康。目前根据HBV基因全核苷酸序列异源性≥8％或S基因区核苷酸异源性≥4％将HBV毒株分为A～I九种不同基因型，HBV毒株在不同的地域流行趋势存在明显差异，我国主要流行B、C两种基因型。HBV基因型对HBV感染者的治疗以及预后判断具有重要意义，然而目前HBV基因分型检测方法存在操作繁琐或检测灵敏度不够理想等问题。为解决上述问题，我们根据HBV基因型序列特征，设计了B、C特异型的恒温扩增引物，同时结合SYBR Green I荧光染料，建立了实时荧光恒温扩增技术检测HBV基因B、C型的实验方法。

摘要：目的建立检测甲型H1N1病毒环介导等温扩增的方法（LAMP）。方法根据已公布的甲型H1N1流感病毒HA基因序列766—995bp的6个位点设计6条LAMP引物（2条内引物，2条外引物，2条环引物），优化并建立LAMP检测体系。并对36例确诊H1N1感染患者和20例健康体检者的咽式子同时采用实时荧光RT—PCR（Real—timeRT—PCR）和LAMP进行H1N1病毒核酸的检测。结果所建立的甲型H1N1病毒核酸LAMP反应体系具有良好的特异性，采用该体系检测结果与Real—timeRT—PCR检测结果一致，对H1N1核酸阳性的标本经LAMP扩增产物电泳图为阶梯状条带，健康对照标本未见条带产生。灵敏度试验，采用10^3复制的H1N1质粒进行10倍稀释后LAMP法仍能检出。特异性试验，20例体检标本经两种方法检测全阴性，对肺炎支原体和肺炎衣原体阳性标本采用该反应体系进行检测结果为阴性。结论甲型H1N1病毒核酸LAMP检测方法简便、快捷，对实验仪器设备要求不高，适合各级实验室和现场快速诊断使用。