摘要：目的研究bs-5-YHEDA铁螯合肽联合索马鲁肽对D-半乳糖诱导的阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)模型小鼠认知能力和病理特征的影响。方法将40只8周龄昆明小鼠随机分为5组,分别为健康对照组、PBS组、bs-5-YHEDA铁螯合肽组、联合治疗组和阳性对照组,每组8只,雌雄各半。除健康对照组外,其他各组注射D-半乳糖连续6周诱导构建AD小鼠模型。从第4周开始连续3周,bs-5-YHEDA铁螯合肽组每隔1 d尾静脉注射200μL bs-5-YHEDA(1 mg·mL^(–1))1次;联合治疗组每天交替给予200μL bs-5-YHEDA铁螯合肽(1 mg·mL^(–1))和索马鲁肽(25 nmol·kg^(–1)·d^(–1))1次;阳性对照组,每隔1 d灌胃给药美金刚(3.3 mg·kg^(–1)·d^(–1))1次;健康对照组和PBS组注射同等剂量PBS。治疗结束后通过Morris水迷宫法检测小鼠学习记忆能力,解剖取全脑和全血,HE染色观察海马区病理改变,免疫组织化学、酶联免疫吸附、免疫印迹检测Aβ表达和Tau蛋白磷酸化水平。结果在Morris水迷宫空间探索试验结果显示,与健康对照组比较,PBS组小鼠穿越平台次数、目标象限游泳路程比和时间比的差异均具有统计学意义(P<0.05);与PBS组相比较,联合治疗组目标象限游泳路程比增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。HE染色结果显示,与健康对照组小鼠相比,PBS组海马区锥体细胞层次减少,排列紊乱,细胞水肿,细胞核固缩深染,药物治疗后各治疗组海马区细胞排列紊乱、胞核固缩深染及细胞凋亡情况明显改善。免疫组织化学染色和Western blotting结果显示,与健康对照组小鼠相比,PBS组小鼠Aβ表达水平和Tau蛋白磷酸化水平明显升高,药物治疗后各组小鼠Aβ表达水平和Tau蛋白磷酸化水平明显降低,差异具有统计学意义(P<0.01或P<0.001)。结论bs-5-YHEDA铁螯合肽联合索马鲁肽能够有效改善AD小鼠学习记忆能力和病理特征,但从免疫组织化学和免疫印迹实验结果来看,相较于单一bs-5-YHEDA铁螯合肽组,联合治疗组对AD模型小鼠病理特征的改善并不明显,提示设计的双靶点联合治疗对AD模型鼠认知改善可能存在阈值效应,多靶点组合治疗效果的优化及验证有待进一步的研究。

摘要：为了提升深度卷积神经网络设计的自动化程度,并进一步提高细粒度花卉图像的分类准确率,提出了一种改进的基于DARTS的神经网络搜索方法,用于自动构建细粒度花卉图像分类模型。首先,通过构建注意力-卷积模块,形成全注意力-卷积搜索空间,增强网络对可判别特征的关注度。其次,通过构建具有更多浅层特征输入节点的密集连接缩减单元(DCR cell),保留更多的浅层特征信息,减少可判别特征信息的损失并促进多尺度特征融合。最后,在堆叠最佳cell时调整DCR cell的位置,构建参数量大小不一的网络模型,以便在更多的终端设备上部署。结果表明,该方法耗时4.5 h搜索到了最佳神经网络模型,在Oxford 102和Flower 17上的分类准确率分别为96.14%和94.12%。与AGNAS等方法相比,在Oxford 102上提高了1.40百分点,在Flower 17上提高了3.09百分点。

摘要：目的 设计并构建靶向Tsc1和Tsc2基因的CRISPR/Cas9基因编辑系统,并在细胞水平验证基因编辑效力。方法针对小鼠Tsc1和Tsc2基因分别设计3个sgRNA导向序列,构建sgRNA表达载体,与Cas9表达质粒共转染小鼠N2a细胞,经药物筛选获得阳性细胞后,PCR扩增打靶位点的DNA片段,利用TA克隆测序验证打靶效率。结果 Tsc1基因Tsc1-M-sgRNA2、Tsc1-M-sgRNA3及Tsc2基因Tsc2-M-sgRNA1、Tsc2-M-sgRNA2、Tsc2-M-sgRNA3这5个靶点均发生基因编辑,编辑效率分别为40%、80%、30%、30%和20%。结论 成功构建了有编辑效力的靶向小鼠Tsc1和Tsc2基因的CRISPR-Cas9基因编辑系统。

摘要：为了提高构建深度卷积神经网络(CNN)的自动化程度并进一步提高目标检测精度,提出了一种改进的基于DenseNAS的神经网络架构搜索方法以自动构建铭牌检测CNN。首先,基于改进DenseNAS的Head层,设计了可搜索的、融合深浅层特征的子网模块(CSP-Block1和CSP-Block2)。然后,基于CSP-Block1和CSP-Block2构建的搜索空间,搜索铭牌检测CNN的Backbone和Head。实验结果表明,该方法在一个铭牌5分类的数据集上,耗时约9.35 GPU hours搜索出了最佳神经网络,在测试集上检测精度mAP≈97.3%,比YOLOv5等SOTA方法更高。

摘要：目的使用CRISPR/Cas9系统靶向小鼠ATP7B基因,建立高效的ATP7B基因CRISPR/Cas9编辑系统,模拟人ATP7B基因突变,为更深入地开展威尔逊病(WD)分子机制研究和疾病干预奠定基础。方法选择我国WD的热点突变,对应小鼠ATP7B基因上的突变区域,设计单向导RNA(sgRNA),构建表达质粒,并与Cas9表达质粒共转染到小鼠N2a细胞,采用药物(嘌呤霉素和杀稻瘟菌素)筛选阳性细胞并提取gDNA,将目标位点的DNA片段进行聚合酶链式反应(PCR)扩增,然后通过TA克隆序列结果分析对目标基因的打靶效率。结果成功设计sgRNAs序列,并使用CRISPR/Cas9系统编辑了小鼠ATP7B基因,编辑效率为53.85%,创建了ATP7B基因突变细胞模型。结论通过靶向小鼠ATP7B基因,成功构建CRISPR/Cas9系统,这对深入研究WD的致病机制、探讨WD的治疗具有重要意义。

摘要：《模拟电路与数字电路》是一门非常重要的基础课程,其教学的基本目的和任务是使学生通过本课程的学习,获得电工技术、电子技术必要的基本理论、基本操作技能,为学生学习后续课程或从事专业工程技术和科研工作打下一定的基础。在对以学生为教学主体的课程教学改革探索中,提出了基于翻转课堂结合OBE的教学理念,以成果为导向,探索并实践了老师及时反馈、学生积极参与的混合式教学模式,并将其应用到《模拟电路与数字电路》课程中,在日常教学过程强调学生的主体地位,在授课前授课中授课后这三个教学阶段合理设计混合式课程教学内容,从理论性和实践性两个方面改进综合评价考核方式,实施过程性考核,将传统知识型授课转变为混合式学习的教学方法,逐渐提高学生的动手能力和创新能力,从而切实改善教学效果。

摘要：黏多糖贮积症(mucopolysaccharidosis,MPS)是一种遗传代谢病。人IDUA基因编码的α-L-艾杜糖苷酶(α-L-iduronidase,IDUA)功能异常是导致Ⅰ型MPS的主要病因。本研究拟构建特异性靶向小鼠Idua基因的CRISPR/Cas9编辑系统,用以模拟人IDUA基因突变,为建立精准模拟Ⅰ型MPS的细胞模型和动物模型提供高效基因编辑系统。本研究筛查了人类IDUA基因的致病突变,并将候选突变位点定位于小鼠Idua基因上,作为拟突变位点。然后通过sgRNA的设计、表达质粒构建、转染、药物筛选、TA克隆测序等步骤证明了设计的sgRNA具有高效的打靶效力。本研究结果对深入研究MPS的致病机制和探讨MPS的治疗具有重要意义。

摘要：GALT基因突变是人类I型半乳糖血症的主要病因。拟通过CRISPR/cas9系统打靶小鼠Galt基因以模拟人GALT基因突变,从而为建立精准模拟I型半乳糖血症的动物模型奠定基础。首先分析了我国I型半乳糖血症GALT基因的致病突变位点,并将其定位在小鼠Glat基因上,作为小鼠Galt基因的拟突变位点,然后根据拟突变位点区域的序列设计了sgRNA导向序列,构建sgRNA表达质粒,将其与cas9表达质粒共转染小鼠3T3细胞,通过嘌呤霉素和杀稻瘟菌素筛选阳性转染细胞,提取阳性细胞基因组DNA,PCR扩增打靶位点的DNA片段,通过TA克隆测序鉴定基因编辑情况并分析编辑效率。结果表明,3个sgRNA导向序列均可以通过CRISPR/Cas9系统高效编辑小鼠Galt基因,编辑效率为100%。

摘要：目的 探讨超重环境对骨组织生物力学性能及骨组织形态结构的影响,为航天员和飞行员安全飞行训练及最大耐受高重力值的确定提供理论支撑。方法 采用本课题组自主设计的超重加载平台构建超重动物模型,加载方式为腹背方向承受向心加速度,加速度分别为5、10、20 g,离心45 s, 1次/d, 5 d/周,连续4周。使用Instron 5865材料力学试验机对离体骨组织进行三点弯曲试验,通过测量力学参数的变化,分析超重环境对骨组织生物力学性能的影响;通过双能X线骨密度仪扫描、Micro-CT扫描、骨组织染色等技术,检测骨矿物质含量、骨密度及骨小梁等形态学参数的变化,观察超重环境对骨组织形态结构的影响。结果 超重加载可显著降低小鼠胫骨的断裂应力及弹性模量。超重环境导致骨组织中骨体积分数下降,骨小梁厚度以及骨小梁数量显著降低,骨小梁排列紊乱。结论 超重环境对骨组织生物力学性能及骨组织形态结构的影响与超重载荷的强度密切相关。低(5 g)强度超重载荷能够降低骨小梁厚度,但对其力学性能的影响很小。中(10 g)、高(20 g)强度超重载荷能够显著触发骨流失以及骨力学性能的下降。随着超重载荷的增加,机体的生理调节无法阻止骨量和力学性能下降的趋势。

摘要：目的 GAA基因突变是人类II型糖原贮积病的遗传学病因,目前尚无根治方法。文章拟设计可模拟人类GAA基因强致病位点突变的靶向小鼠Gaa基因的CRISPR/Cas9系统,并在细胞水平验证其打靶效力。方法检索OMIM、ExAC以及ClinVar等数据库筛查人类Ⅱ型糖原累积病致病基因GAA的强致病位点。通过人和小鼠GAA蛋白序列比对分析将筛查到的强致病位点定位于小鼠基因组上。根据定位区域的小鼠基因组DNA序列,设计了3个向导RNA序列(Small Guide RNA,sgRNA)序列。然后构建了3个sgRNA表达载体,并将3个sgRNA表达载体分别与cas9表达质粒共转染小鼠N2a细胞。通过嘌呤霉素和杀稻瘟菌素进行药物筛选,收取阳性转染细胞。PCR扩增打靶区域DNA片段,利用T7EN I酶切反应和sanger测序初步分析打靶情况。随后通过高通量测序分析基因型和打靶效率。结果根据筛查结果判定人GAA蛋白的***609位点为强致病位点,与小鼠Gaa蛋白的***609位点相对应;根据小鼠Gaa蛋白***609位点的DNA序列,成功构建了3个靶向该位点的sgRNA表达质粒;药筛阳性细胞打靶位点的PCR扩增产物测序及T7EN I酶切反应表明3个位点均发生了DNA变异;高通量测序结果表明3个位点的突变效率分别为49.45%、71.23%和70.91%。结论成功构建了靶向小鼠Gaa基因的高效CRISPR/Cas9系统,为深入研究Gaa基因的功能以及建立Gaa基因编辑小鼠模型进而探讨疾病的机制和治疗方法奠定基础。