摘要：目的　探讨L 精氨酸对任意型皮瓣的成活的影响。方法　以Wistar大鼠为实验对象 ,在其背部设计 7cm×2cm任意型皮瓣 ,于术后给予腹腔注射L 精氨酸 30 0mg/kg ,对照组给予 0 9%生理盐水。术后 7d ,通过图像分析技术观察皮瓣成活率 ;通过生物化学技术、组织学和免疫组织化学技术对不同时间皮瓣组织中一氧化氮含量、组织形态学变化、白细胞计数以及ICAM 1的表达进行观测。结果　外源性L 精氨酸可提高皮瓣组织一氧化氮含量 ,L 精氨酸组ICAM 1表达呈弱阳性、术后 12h皮瓣组织真皮中性粒细胞计数减少 ,L 精氨酸组皮瓣成活率明显高于对照组 (P <0 0 1)。结论　外源性L 精氨酸可提高皮瓣组织NO含量 ,ICAM 1表达下调 ,中性粒细胞浸润减少 ,提高任意皮瓣成活率。

摘要：目的探讨线粒体酸5(mitochonic acid-5,MA-5)是否可以减轻脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的脓毒症急性肾损伤以及可能的机制。方法细胞实验:将肾小管细胞分为正常组、MA-5(10μmol/L)组、LPS(10 mg/L)刺激组和LPS+MA-5治疗组,通过细胞计数试剂盒8法评估细胞活力、流式细胞术评估细胞凋亡率;活性氧(reactive oxygen species,ROS)检测试剂盒检测ROS含量;三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)检测试剂盒检测ATP水平;蛋白质印迹法(western blot,Wb)检测沉默信息调节因子3(silence information regulator 3,SIRT3)蛋白、线粒体动力学相关蛋白[动力相关蛋白1(dynamin-related protein 1,DRP1)、视神经萎缩因子1(optic atrophy 1,OPA1)]和细胞凋亡相关蛋白[B细胞淋巴瘤2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)]的表达水平。动物实验:将32只成年雄性小鼠按照统计学中完全随机设计的方法分为正常组、MA-5组、LPS组和LPS+MA-5组,每组8只。LPS(10 mg/kg)腹腔注射建立脓毒症急性肾损伤模型,随后腹腔注射MA-5(50 mg/kg)治疗,24 h后进行取材。通过检测血肌酐(serum creatinine,Scr)、血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)评估肾功能;分别应用HE染色观察肾组织病理变化,透射电镜观察肾组织线粒体超微结构,二氢乙锭荧光染色观察肾组织ROS水平,免疫组化法检测肾组织中Sirt3表达水平以及Wb检测肾组织中Sirt3、OPA1、Drp1、Bcl-2和Bax蛋白的表达水平。结果在体外,相较于LPS(10 mg/L)刺激组,LPS+MA-5治疗组肾小管上皮细胞凋亡率[(9.21±0.34)%比(16.49±0.52)%]显著减少(P<0.05);凋亡相关蛋白Bcl-2[(0.972±0.066)比(0.691±0.051)]表达水平明显升高,Bax[(0.908±0.560)比(1.210±0.062)]表达水平明显降低(均P<0.05);Sirt3蛋白[(0.945±0.049)比(0.744±0.042)]表达水平明显升高(P<0.05);线粒体分裂蛋白Drp1[(0.819±0.047)比(1.032±0.054)]表达水平显著下降,融合蛋白OPA1[(0.846±0.051)比(0.567±0.060)]表达水平及细胞ATP[(4.82±0.16)μmol/L比(3.47±0.28)μmol/L]含量均显著增加(均P<0.05)。在体内,与LPS组小鼠比较,LPS+MA-5治疗组小鼠BUN[(29.05±1.54)mmol/L比(49.05±2.07)mmol/L]、Scr[(27.83±1.39)μmol/L比(56.51±2.21)μmol/L]水平均降低(均P<0.05);凋亡相关蛋白Bcl-2[(0.862±0.052)比(0.601±0.048)]表达水平明显升高,Bax[(0.744±0.051)比(1.047±0.054)]表达水平明显降低(均P<0.05);Sirt3蛋白[(1.004±0.053)比(0.685±0.041)]表达水平明显升高(P<0.05);线粒体分裂蛋白Drp1[(0.716±0.051)比(1.057±0.055)]表达水平显著下降,融合蛋白OPA1[(0.838±0.055)比(0.534±0.046)]表达水平显著增加(均P<0.05),线粒体形态改善。结论MA-5减轻LPS诱导的脓毒症急性肾损伤,其作用机制可能与促进Sirt3表达,改善线粒体功能障碍和细胞凋亡有关。这表明MA-5可能是脓毒症急性肾损伤的一种有效的治疗策略。

摘要：背景:创伤修复期间胃肠道存在再灌注损伤和灌注不全,引起肠黏膜损伤。目的:观察人用等效剂量参附注射液对创伤修复期间家兔肠pH、肠黏膜一氧化氮、丙二醛、Ca2+含量、血清双胺氧化酶的影响。设计:以实验动物为观察对象的随机对照实验。单位:武汉大学人民医院麻醉科。材料:实验于2003-08/10在武汉大学人民医院麻醉学研究室完成,选择健康家兔24只随机分为3组:参附注射液治疗组、单纯创伤修复组和对照组,每组8只。干预措施:通过股动脉放血犤2mL/(kg·min)犦,平均动脉压降至40mmHg并持续60min,回输自体血及等量平衡盐液制备兔创伤修复模型;参附注射液组于回输自体血同时先静注参附注射液2.1mL/kg,随后持续注入参附注射液5mL/(kg·h)。主要观察指标:分别于实验前,创伤修复1h,及再灌注1,3h检测乙状结肠黏膜内pH、肠黏膜一氧化氮、丙二醛及钙含量、血清双胺氧化酶活性。结果:24只家兔均进入结果分析。①参附注射液治疗组再灌注1,3h肠黏膜pH为7.171±0.102,7.194±0.106,高于单纯创伤修复组(6.920±0.155,6.971±0.165,P<0.05,P<0.01)及对照组(7.329±0.038,7.322±0.101,P<0.05)。②参附注射液治疗组再灌注1,3h血清双胺氧化酶为(35.090±1.184),(32.440±2.884)μkat/L,显著高于单纯创伤修复组犤(50.994±2.684),(52.377±1.217)μkat/L,P<0.01犦及对照组犤(15.970±1.734),(16.620±0.767)μkat/L,P<0.05犦。③再灌注3h肠黏膜一氧化氮、丙二醛含量参附注射液治疗组均显著低于单纯创伤修复组犤(61.8±5.3,72.2±5.8)μmol/g,(68.2±4.9,96.9±8.5)μmol/L,P<0.05犦。再灌注3h肠黏膜Ca2+含量参附注射液治疗组为(2.43±0.27)μmol/L,低于单纯创伤修复组犤(2.93±0.34)μmol/L,P<0.05犦,高于对照组犤(2.26±0.31)μmol/L,(P<0.05)犦。结论:给予家兔人用等效剂量的参附注射液,增加了肠黏膜灌注及氧合作用,抑制了肠黏膜一氧化氮活性和清除氧自由基及减轻钙超载,对创伤修复期间肠黏膜具有良好的保护作用。

摘要：目的 利用RNA干扰（RNAi）技术沉默宫颈癌细胞系HeLa细胞中乙酰肝素酶（HPA）基因的表达,并探讨其对宫颈癌细胞侵袭力的影响.方法 根据GenBank数据库提供的HPA基因核苷酸序列,设计4对针对HPA基因的短发夹状RNA（shRNA）特异性寡核苷酸序列（即shRNA-HPA-592、shRNA-HPA-995、shRNA-HPA-1351、shRNA-HPA-1658）,并设计1条随机无关序列作阴性对照,分 别克隆到pYr-1.1质粒中.用脂质体法将上述质粒转染入HeLa细胞,以未转染质粒者为空白对照,采用逆转录（RT）-PCR技术、免疫荧光法分别检测转染后HeLa细胞中HPA mRNA和蛋白的表达,筛选出其中对HPA基因沉默效果最佳的质粒.将该质粒转染入HeLa细胞,采用穿膜（transwell）小室体外侵袭实验检测转染后HeLa细胞侵袭力的变化.结果 RT-PCR技术检测显示,转染shRNA-HPA-592、shRNA-HPA-995、shRNA-HPA-1351、shRNA-HPA-1658质粒后,HeLa细胞中HPA mRNA的表达水平分别为0.54±0.05、0.89 ±0.18、0.82±0.22、0.91 ±0.47,阴性对照和空白对照细胞中HPAmRNA的表达水平分别为1.31 ±0.72和1.09±0.16；免疫荧光法检测显示,转染上述不同质粒后HeLa细胞的胞质中均可见绿色荧光,HPA蛋白均呈阳性表达,其中转染shRNA-HPA-592质粒后HeLa细胞的胞质中绿色荧光强度最弱.故筛选出的对HPA基因沉默效果最佳的质粒即为shRNA-HPA-592质粒.体外侵袭实验检测显示,转染shRNA-HPA-592质粒后HeLa细胞的穿膜细胞数为（44±4）个,明显低于空白对照、阴性对照[分别为（182±6）、（258±17）个],差异有统计学意义（P＜0.01）；而阴性对照与空白对照比较,差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 本研究成功筛选出了靶向HPA基因的shRNA表达质粒,转染宫颈癌HeLa细胞后可高效抑制其HPA基因的表达,明显降低宫颈癌细胞的侵袭力,为进一步研究HPA基因的表达与宫颈癌侵袭的机制奠定了基础.

摘要：目的优化钩藤碱缓释片处方,为该制剂的工业化生产提供参考。方法在单因素考察的基础上以释放度为指标,采用星点设计-效应面法,考察骨架材料羟丙甲基纤维素(HPMC)、阻滞剂乙基纤维素(EC)、黏合剂聚乙烯吡咯烷酮(PVP)的质量比对释放度的影响,筛选钩藤碱缓释片最优处方。结果最优处方:钩藤碱:9.5%,HPMC:19%,EC:7%,PVP:2.2%,淀粉:61.5%,滑石粉:0.8%,按优化后的处方工艺制备的钩藤碱缓释片无突释效应且12 h释放度>84%。结论钩藤碱缓释片处方合理,能满足缓释制剂的要求,可为制剂工业化提供参考。

摘要：慢性便秘指慢性功能性胃肠病所致的便秘，是一种常见的临床症状。有调查指出，相当一部分便秘患者就诊前曾受广告影响、他人介绍而自行选择泻剂治疗其便秘，这种没有专业基础作指导的用药，常常发生不合理用药的情况，引起一些原本可避免的副反应，同时也耗费了相当的医疗资源；另一方面，迄今为止，由于尚缺乏高质量关于慢性便秘治疗的循证医学研究，

摘要：Leber遗传性视神经病变(LHON)是一种由线粒体DNA突变引起的致盲性疾病,是研究线粒体异常的经典疾病模型,其主要突变位点为m11778G.A、m.3460G.A和***细胞模型主要通过淋巴母细胞、成纤维细胞、细胞杂种和诱导多能干细胞等产生,LHON动物模型主要通过鱼藤酮和ND4突变体诱导小鼠产生。尽管对于LHON模型的研究已取得不错成果,但构建理想的实验模型仍存在较多困难,严重限制了对LHON发病机制和治疗药物的探索。详尽了解现有模型在LHON中的应用及特征,有助于完善实验设计和构建新模型。

摘要：目的观察慢性中心性浆液性脉络膜视网膜病变(cCSC)脉络膜血管改变,并分析其与中央黄斑厚度(CMT)的相关性。方法采用横断面研究设计,纳入2018年3月到2019年12月在武汉大学人民医院就诊的单眼cCSC患者38例76眼,并纳入30名年龄、性别、等效球镜度(SE)匹配的正常对照者30人30眼。采用海德堡增强深度成像光学相干断层扫描拍摄所有受检者的脉络膜图像,测量CMT、中心凹下脉络膜厚度(SFCT)、脉络膜血管指数(CVI)、脉络膜总面积(TCA)、脉络膜基质面积(SA)和脉络膜血管腔面积(LA)。比较cCSC患眼、cCSC对侧眼与正常对照眼间SFCT、LA、SA、TCA、CMT和CVI的差异,并分析SFCT与CVI、SFCT与CMT、CVI与CMT之间的相关性。结果cCSC患眼、cCSC对侧眼与正常对照眼间CVI分别为(71.67±5.60)%、(68.33±3.85)%和(64.70±1.88)%,SFCT分别为483.82(409.01,550.87)、444.66(351.25,505.15)和373.46(327.98,405.48)μm。cCSC患眼CMT、SFCT、TCA、LA、CVI显著高于cCSC对侧眼和正常对照眼,cCSC对侧眼SFCT、TCA、LA、CVI高于正常对照眼,差异均有统计学意义(均P0.05)。相关性分析显示,cCSC患眼SFCT与CVI呈显著正相关(r s=0.703,P<0.001),CMT与SFCT、CVI均无明显相关性(r s=0.181,P=0.278;r=0.231,P=0.164)。结论cCSC患眼及对侧眼SFCT和CVI均较正常人高,cCSC患眼SFCT和CVI稍高于对侧眼,cCSC患者脉络膜血管存在显著扩张。cCSC患眼CMT与SFCT、CVI均无明显相关性。

摘要：目的利用缺血指数(ISI)定量评估糖尿病视网膜病变(DR)患眼超广角荧光素眼底血管造影(UWFA)图像中不同区域视网膜缺血情况,并分析其与糖尿病黄斑水肿(DME)的相关性。方法采用横断面研究设计,纳入2017年9月至2020年10月于武汉大学人民医院眼科初诊为DR的患者79例79眼,其中男44例44眼,女35例35眼;年龄31~73岁,平均(55.95±8.80)岁,所有患者均行UWFA检查及频域光相干断层扫描(SD-OCT)检查。根据黄斑区OCT图像将患者分为DME组37眼和无DME组42眼。将UWFA检查中期图像分为后极部、中周部、远周部并计算各区域内ISI。应用OCT设备自带软件自动计算黄斑中心凹视网膜厚度(CMT)。采用Spearman秩相关检验分析DME组视网膜各区域ISI与CMT的相关性。结果所有DR患眼全视网膜、后极部、中周部、远周部ISI分别为2.460(0.603,5.640)%、2.670(1.062,9.574)%、1.382(0.245,4.378)%和0.000(0.000,1.262)%,总体比较差异有统计学意义(χ^(2)=65.307,P0.05)。结论DR眼的视网膜无灌注区主要位于后极部和中周部,且DME患眼后极部及中周部视网膜ISI明显高于无DME患眼。DME患眼视网膜各区域内的ISI均与DME的严重程度无明显相关性。

摘要：目的评估23G玻璃体切除联合黄斑前膜剥离术治疗特发性黄斑前膜后视力与黄斑区结构变化的关系。设计回顾性病例系列。研究对象2015年至2017年在武汉大学人民医院接受23G玻璃体切除联合黄斑前膜剥离的特发性黄斑前膜患者78例(82眼)。方法根据患者术前OCT的黄斑形态,分为以下四组:中心凹结构基本正常组(24眼)、黄斑区弥漫性水肿组(39眼)、黄斑区囊样水肿组(9眼)、黄斑裂孔组(10眼)。观察并记录患者的临床特征、手术方式,手术前、术后7天的最佳矫正视力(LogMar)、黄斑区中心凹厚度、旁中心凹区厚度、中心凹周厚度及术后并发症。并随防至术后1个月。主要指标最佳矫正视力、黄斑区中心凹厚度、旁中心凹区厚度、中心凹周厚度。结果特发性黄斑前膜患者在行玻璃体切除手术后7天,最佳矫正视力由术前0.26±0.16提高到0.36±0.16(P=0.000),黄斑区中心凹厚度由术前(506.41±112.67)μm降低到(442.39±82.10)μm(P=0.000),旁中心凹厚度由术前(453.66±79.36)μm恢复至(409.95±61.63)μm(P=0.000),中心凹周厚度从(365.93±50.84)μm降低至(356.76±54.20)μm(P=0.092);四组患者术后的最佳矫正视力均明显提高(P均<0.05),其中中心凹结构基本正常组患者术后视力的提高较其它组更佳(F=3.118,P=0.031)。与术后7天相比,术后1个月的黄斑区厚度降低,但视力变化不显著。术后BCVA与术前BCVA(r=0.850,P=0.000)、术前中心凹厚度(r=0.7386,P=0.000)、旁中心凹区厚度(r=0.811,P=0.000)、中心凹周厚度(r=0.799,P=0.000)均呈正相关;与术后中心凹厚度(r=-0.335,P=0.035)、旁中心凹区(r=-0.376,P=0.017)具有明显相关性,但与中心凹周厚度(r=-0.310,P=0.052)无明显相关性。结论 23G玻璃体切除手术剥除黄斑前膜可显著提高患者的视功能,同时改善黄斑区结构。术后中心凹厚度变化与视力恢复程度有关,且术后1周的变化即可决定预后;术前黄斑结构正常者视力预后较好。