摘要：目的构建编码大鼠NgR（Nogoreceptor）细胞外功能区的慢病毒载体，转染大鼠骨髓基质细胞（BMSCs），使其能高表达NgR的细胞外功能区。方法体外分离培养大鼠BMSCs、293FT包装制备病毒，用包装好的慢病毒颗粒感染BMSCs，问接免疫荧光及Western blot方法检测BMSCs表达NgR的情况。结果筛选阳性重组载体plenti6-NgR，酶切后得到930bp的条带，与设计的NgR基因片段大小一致，表明载体构建成功。转染BMSCs48h后，间接免疫荧光法可见胞质内明显荧光表达，Westernblot得到相对分子质量为37×10^3的条带，与NgR蛋白相对分子质量一致。结论ViraPower^TM慢病毒表达系统可将NgR（310）eeto基因转染入骨髓基质细胞表达，后者可以作为种子细胞拮抗脊髓损伤局部形成的抑制性微环境。

摘要：背景:国内外不少学者运用异体骨移植椎间融合进行椎体切除与重建,骨融合时间优于单纯自体骨移植,其在融合早期能提供支撑稳定作用,但制备异体骨移植材料时,易破坏基质中的骨诱导因子,不利于骨质生长。目的:课题创新性设计并验证自体红骨髓复合自体松质骨填充同种异体皮质骨环重建兔颈椎的能力。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2004-10/2006-03在武汉大学人民医院骨科实验室完成。材料:健康成年新西兰大耳白兔60只,雌雄不限,体质量2.0～2.5kg。其中12只兔用于同种异体皮质骨环的制备;剩余48只兔随机分为3组,每组16只。自体红骨髓于髂前上棘穿刺抽取红骨髓;自体松质骨从兔髂嵴处取得三面皮质骨。将自体红骨髓与自体松质骨复合,填充在自制的同种异体皮质骨环中。方法:3组兔采用第4颈椎切除模拟肿瘤切除模型。联合移植组植入同种异体皮质骨环-自体红骨髓-自体松质骨复合物;自体骨移植组植入自体骨;同种异体皮质骨环移植组植入同种异体皮质骨环。主要观察指标:以X射线检查、组织形态学检查、血清碱性磷酸酶及扫描电镜观察各组重建颈椎的效果。结果:术后8周,联合移植组、自体骨移植组植骨材料与上下颈椎融合,有大量骨痂,同种异体皮质骨环移植组可见少量骨痂生长,融合不牢。各组血清碱性磷酸酶开始均升高,4周时联合移植组、自体骨移植组血清中碱性磷酸酶浓度都高于同种异体皮质骨环移植组(P0.05)。8周时,3组碱性磷酸酶比较差异无显著性意义(P>0.05)。组织学观察联合移植组、自体骨移植组形成大量成熟骨基质,骨小梁及骨髓腔。扫描电镜观察示联合移植组、自体骨移植组有大量新骨形成。结论:联合自体红骨髓+自体松质骨+同种异体皮质骨环移植和自体骨移植均有效地重建颈椎,自体红骨髓与自体松质骨复合填充的同种异体皮质骨环可明显促进同种异体皮质骨环重建椎体的作用,可以作为有效椎体重建材料。