摘要：根据已发表的蓝舌病毒(bluetonguevirus,BTV)10型标准株S7基因设计合成一对与其5′ NCR(non codingregion)序列同源的引物,经反转录 聚合酶链反应(RT PCR)扩增出HbC3株和10型标准株长度分别为277bp和290bp的S7基因5′非编码区cDNA片段,以建立起dsRNA体外扩增系统.将扩增的BTV HbC3毒株的S7基因5′非编码区片段通过粘端连接克隆到pUCm T载体中,用PCR技术和限制性内切酶分析鉴定,表明获得重组质粒pUCm T BTV HbC3 S7.通过核苷酸序列分析方法分别将2个毒株的S7基因5′非编码区与呼肠孤病毒 3(reovirus 3)型比对,发现BTV HbC3株与呼肠孤病毒 3L2基因5′非编码区基因具有完全的同源性.将BTV HbC3毒株接种在不同细胞系如猴肾传代细胞(Vero)、人肝癌细胞(Hep 3B)和小鼠成纤维细胞(L929)等细胞株上,比较BTV HbC3在不同种系细胞上的增殖特征,并且用双向免疫扩散试验证实BTV HbC3和BTV 10型之间的血清学关系.结合本实验室的研究结果提示BTV HbC3株可能是蓝舌病毒的一个新的基因型.

摘要：目的:为隐神经及其营养血管为蒂的逆行皮瓣的应用提供解剖学基础。方法:在30侧经红色乳胶灌注的成人下肢标本上解剖观测隐神经及其营养血管的起源、走行、分布、吻合及外径,2侧成人新鲜下肢标本灌注1/10中国墨汁,观测营养血管的血供范围。结果:隐神经的营养血管在其神经束间及神经旁相互吻合构成丰富的血管网,并借分支与筋膜皮支所形成的皮下筋膜血管网沟通,营养筋膜皮肤。结论:以隐神经及其营养血管为蒂,可设计逆行岛状皮瓣,修复小腿下段、踝足部软组织缺损。

摘要：目的:构建抑癌基因膀胱癌相关蛋白(BLCAP)基因高效真核siRNA载体,转染人宫颈癌细胞系HeLa,构建BLCAP基因沉默细胞系,以观察靶向siRNA对BLCAP基因的表达抑制作用。方法:设计并重组靶向siRNA各3条,分别命名为pRNA-U6.1-B1,B2,B3-siRNA,重组体经脂质体转染细胞,通过荧光显微镜观察细胞内质粒表达情况,并采用RT-PCR和Western blot方法检测转染前后BLCAP基因mRNA及蛋白的表达,验证RNAi作用的特异性及时效性。结果:同对照组相比,各BLCAP siRNA均可引起靶基因表达水平的显著性下降(P<0.05),尤以pRNA-U6.1-B2-siRNA的作用效果最强(P<0.01);而空脂质体组及阴性对照siRNA组的靶基因表达水平则无明显变化。将pRNA-U6.1-B2-siRNA转染细胞后12,24,48h均可观察到靶基因表达的显著性降低(P<0.05),其中在24h后达到最强抑制效果。结论:不同序列的siRNA,对靶基因的干扰效率不同;BLCAP基因siR-NA能够特异、高效性的抑制靶基因的表达;抑制作用在24h达到高峰,并可维持到转染后48h。试验结果为进一步研究采用RNA干扰技术进行宫颈癌的生物治疗奠定了基础。

摘要：目的:大鼠输卵管特殊糖蛋白核苷酸序列的扩增、克隆及序列分析。方法:在Genebank中查找到已知的小鼠、金仓鼠、猪和人的输卵管特殊糖蛋白的基因序列并运用PrimerPremier5.0软件对这些输卵管特殊糖蛋白的基因序列进行同源性分析。依据同源性较大的保守区基因序列设计一对引物,并提取大鼠输卵管总RNA作为模板进行RTPCR,得到一条cDNA片段。将产物连接到T载体中,转化、扩增重组质粒。提取大肠杆菌中的重组质粒进行DNA测序。将DNA测序所得到的基因序列和已知的小鼠、金仓鼠、牛、羊及人的输卵管特殊糖蛋白的基因序列进行同源性分析。结果:利用RTPCR的方法扩增出一条120bp的目的基因片段,测序结果发现其和小鼠、金仓鼠、牛、羊和人的输卵管特殊糖蛋白的核苷酸序列的同源性分别为90%,90%,78%,87%。结论:本实验所获得的基因序列为目前尚未见报道的大鼠输卵管糖蛋白的基因序列的一部分。

摘要：目的克隆、表达降钙素原(PCT),制备相应的多克隆抗体。方法根据GenBank上PCT的基因序列,设计10条用于基因拼接的DNA引物,利用PCR技术扩增PCT基因并构建pGEX-KG-PCT重组质粒,在大肠杆菌中表达融合蛋白PCT-GST,然后用融合蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,Western blot法进行生物活性鉴定,并利用琼脂免疫扩散实验检测了多克隆抗体的特异性和效价。结果成功获得PCT全长基因,重组质粒pGEX-KG-PCT在大肠杆菌中成功表达,SDS-PAGE电泳显示蛋白相对分子质量(Mr)大小为36 000左右。利用纯化的蛋白同时制备了GST和PCT-GST多克隆抗体,琼脂免疫扩散实验显示多克隆抗体可以特异性识别PCT,效价为1∶4。结论成功克隆、表达并纯化出PCT蛋白,制备了相应的多克隆抗体。

摘要：[目的]了解新型冠状病毒肺炎疫情期间公众正确使用口罩的情况,为切断该病传播途径,早日控制疫情提供依据。[方法]自行设计调查问卷,通过微信平台对369名公众发放问卷进行调查。[结果]公众在“如何正确处理废弃口罩”“口罩塑形方法”“头戴式口罩摘取方式”“取口罩会闭上眼睛”等步骤的正确率为32.25%、60.16%、67.75%、49.59%;女性、年龄≤50岁、文化程度较高、医疗相关职业的人更能正确地使用口罩(P<0.05)。[结论]公众在如何正确使用口罩方面有待提高;建议相关部门加强指导,尤其对50岁以上的人员应给予针对性宣教,切断传播途径,降低新型冠状病毒的感染风险。

摘要：目的:探讨苦瓜提取液体外抗腺病毒(ADV)的作用,及抗病毒作用的机制,从而为腺病毒感染的治疗提供新的手段。方法:本实验根据病毒复制周期,设计2个药物抗病毒作用靶点,观察苦瓜提取液在不同靶点对腺病毒的作用。在Hep-2单层细胞上,通过观察细胞病变效应(CPE)、四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞活性、病毒抑制率测定,以确定苦瓜提取液体外抗病毒活性。结果:(1)苦瓜提取液对Hep-2细胞的半数毒性浓度(TC50为1004.8μg·ml-1)。(2)苦瓜提取液直接处理病毒组,对腺病毒的抑制率随药物浓度的增加而增加,其半数抑制率(IC50)为8.6μg·ml-1,治疗指数(TI)为12.18;苦瓜提取液抑制病毒组,随着药物浓度的增加而增加,细胞病变逐渐减轻,对ADV的抑制率增高,并表现出量效关系。结论:苦瓜提取液可通过直接灭活病毒和抑制病毒增殖两种方式发挥抗腺病毒作用。

摘要：目的观测小腿皮神经营养血管链与周围肌肉内血管的吻合情况，为设计远端蒂小腿皮神经营养血管肌皮复合组织瓣转位术提供解剖学资料。方法对30侧红色乳胶灌注的成人下肢标本进行解剖，系统观测小腿皮神经营养血管链与周围肌肉内血管的吻合情况。结果腓肠神经营养血管为主的浅筋膜血管网与腓肠肌内、外侧头的肌皮穿支吻合，吻合支均为2-3支，内侧头的肌皮穿支较外侧粗大，位置恒定；隐神经营养血管主要通过胫后动脉肌间隙支的肌皮支与比目鱼肌肌支吻合，肌支2-3个，管径（0．5±0．2）mm，均有1-2支静脉伴行；腓浅神经营养血管分别向内、外侧发出2，3支肌支营养趾长伸肌和腓骨长肌，肌支外径（0．4±0．2）mm，皆有一支静脉伴行，另1-2支筋膜皮支浅出营养皮肤。结论远端蒂小腿皮神经营养血管肌皮复合组织瓣血供可靠，可以为修复特殊类型踝足部软组织缺损提供良好的供区。

摘要：目的　构建重组人白细胞介素 10 (recombinanthumaninterleukin 10 ,rhIL 10 )融合蛋白的表达载体 ,并在大肠杆菌中表达。方法　应用RT PCR方法扩增IL 10基因 ,克隆PCR产物 ,构建PCRR○T7/NT TOPOR○ IL 10重组质粒 ,以AppiedBiosystems 370 0DNA分析仪进行分析。构建成功的重组质粒转化大肠杆菌BL2 1(DE3)pLysE细胞 ,经 12 %SDS PAGE鉴定融合表达蛋白。结果　PCRR○T7/NT TOPOR○ 质粒已载入rhIL 10基因 ,其序列与理论设计完全一致 ,表达质粒在BL2 1(DE3)pLysE中得到高效表达 ,产物主要以包涵体形式存在。结论　已成功构建重组PCRR○T7/NT TOPOR○ IL 10质粒载体 ,并在大肠杆菌BL2 1(DE3)

摘要：为减少空调室外机用低压轴流风轮叶片的颤振,改善音质,降低噪音和电机功率。本文设计了尾缘凹陷新型三叶轴流风轮,同时除对前缘局部加厚处理外,对叶片其他区域整体减薄。文中采用Navier-Stokes方程对新风轮和原风轮的内流及气动特性进行了三维数值模拟,同时对两者的流量压力曲线和噪音频谱进行了实验研究。研究表明:对轴流风轮叶片尾缘进行凹陷设计,对前缘以外的区域减薄设计,能够减轻风轮重量,降低电机负荷同时减弱转子尾迹;对叶轮前缘进行局部加厚处理可以减小叶尖颤振,降低叶片旋转频率峰值噪音,从整体上降低噪音,改善音质。