摘要：目的　构建重组人白细胞介素 10 (recombinanthumaninterleukin 10 ,rhIL 10 )融合蛋白的表达载体 ,并在大肠杆菌中表达。方法　应用RT PCR方法扩增IL 10基因 ,克隆PCR产物 ,构建PCRR○T7/NT TOPOR○ IL 10重组质粒 ,以AppiedBiosystems 370 0DNA分析仪进行分析。构建成功的重组质粒转化大肠杆菌BL2 1(DE3)pLysE细胞 ,经 12 %SDS PAGE鉴定融合表达蛋白。结果　PCRR○T7/NT TOPOR○ 质粒已载入rhIL 10基因 ,其序列与理论设计完全一致 ,表达质粒在BL2 1(DE3)pLysE中得到高效表达 ,产物主要以包涵体形式存在。结论　已成功构建重组PCRR○T7/NT TOPOR○ IL 10质粒载体 ,并在大肠杆菌BL2 1(DE3)

摘要：目的:探讨SD大鼠股部血管解剖,为骨组织工程血管化动物模型的构建提供解剖学依据。方法:取15只SD大鼠行红色乳胶灌注后对双侧股部血管进行显微解剖,寻找并观测合适用于血管化模型构建的各种带血管蒂组织瓣;另取3只大鼠行活体解剖,以验证所切取组织瓣的血液循环情况。结果:大鼠股部可以同时寻找到合适的隐血管血管束、隐血管为蒂的肌骨膜瓣、腹壁浅血管为蒂的深筋膜瓣、股血管肌支为蒂的股薄肌瓣和膝最上血管为蒂的股骨骨膜瓣,以供骨组织工程血管化的研究应用。结论:SD大鼠股部可同时设计多种带血管蒂的组织瓣,非常适合于骨组织工程血管化研究动物模型的构建。

摘要：背景:中枢内催产素可作为一种神经递质或调质参与学习记忆、性行为、痛觉调节以及阿片耐受与依赖,海马内催产素能系统与阿片系统具有一定的相互作用。目的:探讨侧脑室注射催产素对大鼠脑左背侧海马CA1区神经元诱发放电的影响以及催产素与阿片受体之间可能的相互作用。设计:随机对照实验。单位:广东医学院生理教研室,武汉大学医学院生理系,武汉大学医学院病理学教研室。材料:实验于2002-09/2003-09在武汉大学医学院生理系完成,选用雄性SD大鼠36只。随机分为6组,生理盐水对照组、催产素处理组(0.2,2,20mg/L)、催产素受体拮抗剂+催产素(2mg/L)组、纳洛酮+催产素(2mg/L)组,每组6只。方法:脑海马CA1区细胞外记录采用玻璃微电极记录:用微电极推进器将电极插入脑海马CA1区。神经元放电经微电极放大器放大后,显示在示波器上进行观察。记录到神经元放电后,经双极不锈钢电极每隔5min刺激坐骨神经1次,共刺激50min10次。催产素0.2,2,20mg/L处理组通过侧脑室给药管匀速而缓慢注入催产素0.2,2,20mg/L5μL。催产素受体拮抗剂+催产素(2mg/L)组:侧脑室预先注射80mg/L催产素受体拮抗剂2.5μL,然后再注射2mg/L催产素2.5μL。纳洛酮+催产素(2mg/L)组:侧脑室预先注射400mg/L纳洛酮2.5μL,然后再注射2mg/L催产素2.5μL。以放电频率变化率为观察指标,检测不同剂量催产素对海马CA1区神经元诱发放电的影响及催产素受体拮抗剂、纳洛酮对催产素的作用。主要观察指标:各组大鼠刺激前后脑海马CA1区神经元诱发放电频率的变化率。结果:36只大鼠均进入结果分析。①侧脑室分别注射0.2,2,20mg/L催产素5μL使海马CA1神经元诱发放电频率明显降低,剂量依赖关系明显。②催产素(2mg/L)对CA1神经元诱发放电的抑制作用可被侧脑室预先注射催产素受体拮抗剂(80mg/L,2.5μL)所阻断。③侧脑室注射纳洛酮(400mg/L,2.5μL)可明显减弱催产素(2mg/L)的作用。结论:催产素通过激活催产素受体可抑制海马CA1神经元对外周传入电信号的反应,中枢内阿片系统也参与催产素的抑制作用,当用纳洛酮阻断阿片受体后,催产素的抑制作用明显减弱。

摘要：目的:为隆鼻术鼻模寻找新的组织源。方法:（1）20只成年兔作自体门齿额鼻部异位移植实验;（2）临床拔除80例完整第3磨牙作鼻模形态设计研究。结果:作自体牙异位移植的动物创口均一期愈合,移植的牙齿未见有吸收和破碎等组织排斥现象;第3磨牙不论单根还是双根形态,均可剖塑呈所需要的鼻模形态。结论:自体第3磨牙作为隆鼻术鼻模的新组织源是可行的。

摘要：目的:制备异甘草素脂质体并考察其包封率及稳定性。方法:采用超声波薄膜分散法制备异甘草素脂质体,正交设计优选制备工艺;透射电镜观察形态;激光粒径仪测定平均粒径;葡聚糖凝胶层析法分离含药脂质体与游离药物并测定包封率;离心加速实验考察脂质体的稳定性。结果:异甘草素脂质体的平均粒径为233.1nm,跨距为0.74,平均包封率为82.57%,稳定性良好。结论:该法制备异甘草素脂质体工艺可行,质量稳定。

摘要：目的探讨居家癌症患者止痛药物治疗依从性综合干预方式,提高癌痛患者居家服药依从性。方法自行设计居家癌痛患者止痛药物服用影响因素调查问卷,便利选取2016年2月至2017年12月武汉大学中南医院宁养院收治的居家癌症中、重度疼痛患者143例。调查影响止痛药物服药依从性的主、客观因素和心理因素,开展健康教育、行为干预、认知干预,心理疏导等综合干预,干预前后采用Morisky服药依从性自我报告问卷、疼痛数字分级法(NRS评分)和疼痛缓解程度的划分进行评定。采用自身对照,比较干预前和干预8周后患者服用止痛药物完全依从和非依从的数量和依从性评分。比较综合干预8周后,完全依从和非依从患者的疼痛程度、疼痛缓解程度和疼痛缓解显效率。结果影响患者止痛药物治疗依从性的主要因素排在前3位的依次是:害怕吗啡成瘾(16.37%,37/226);用药单一,药量不足(15.93%,36/226);担心药物不良反应(13.72%,31/226)。不同影响因素数量的患者NRS评分下降分值比较差异有统计学意义(F=5.367,P=0.006)。综合干预前和干预8周后完全依从和非依从的患者数量及依从性差异有统计学意义(χ2=25.583,P=0.000;t=-7.387,P=0.000)。综合干预8周后完全依从和非依从患者的疼痛程度、疼痛缓解程度和疼痛缓解显效率,差异均有统计学意义(χ2=76.572、62.998,均P=0.000)。结论针对影响中重度癌痛患者居家止痛药物服药依从性的主观因素、客观因素和心理因素等进行止痛药物治疗依从性的综合干预,提高了中重度癌痛患者居家止痛药物治疗的依从性,缓解了疼痛。

摘要：目的　预测宫颈癌细胞中人类与鼠同源乳腺转化基因(HMATI)的功能及筛选出能有效沉默该基因的干扰小RNA。方法　采用细胞原癌基因、抑癌基因分类芯片对原发性宫颈癌标本进行筛选,通过生物信息学分析HMAT1 基因,针对HMAT1基因设计了三条特异性干扰小RNA,分别与pRNAU6.1 Hygro重组后,与含有该基因的重组体瞬时共转染B16F0细胞,用逆转录聚合酶链反应(RT PCR)技术检测对HMAT1基因的干扰效果。结果　细胞原癌基因、抑癌基因分类芯片筛选出表达量明显上调的基因共四条。对其中上调明显的HMAT1基因,通过生物信息学预测其为一个调节细胞生长的看家基因,其编码的蛋白质为一个Ⅰ型跨膜蛋白,且其酪氨酸蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点可能与HMAT1 蛋白功能活化有关。半定量检测结果表明其中第一条特异性干扰小RNA有显著性抑制效果(P<0.05)。结论　初步预测HMAT1 基因很可能是与宫颈癌相关的癌基因,其编码的蛋白质可能参与细胞的信号转导,设计出针对该基因的干扰小RNA可以有效沉默HMAT1基因。

摘要：目的为设计一种新术式(带血管桥的多根肋骨瓣)修复手掌毁损伤提供解剖学依据。方法在30侧经动脉灌注红色乳胶成人背部标本上,观察第7、8、9肋肋角外侧8cm段的形态结构及肋骨间血管、神经在该段的走行、分支、分布和吻合;在2侧尸体标本上模拟手术。结果该段的肋骨高[(1.4±0.2)cm,x±s,下同],肋间隙宽(1.0±0.3)cm,肋间动脉、静脉于该段的起始外径分别为(1.4±0.2)mm、(2.1±0.4)mm,终末支外径分别为(1.0±0.2)mm、(1.3±0.3)mm。结论设计带血管桥的多根肋骨瓣修复手掌毁损伤在解剖学上具有可行性。

摘要：采用单剂量随机双周期交叉试验设计,评价6只Beagle犬口服多巴丝肼胶囊(受试制剂)和多巴丝肼片剂(参比制剂,美多芭)的生物等效性,用HPLC-MS法测定血浆中的左旋多巴浓度。受试制剂和参比制剂的主要药动学参数为:t_(max)(0.41+0.09)和(0.49±0.20)h,c_(max)(39.00±6.00)和(39.96±8.63)μg/ml,t_(1/2)(0.59±0.08)和(0.62±0.09)h,AUC_(0-1)(51.29±11.60)和(49.13±14.95)μg·h·ml^(-1),AUC_(0-∞)(51.36±11.61)和(49.21+14.95)μg·h·ml^(-1)。受试制剂中左旋多巴的相对生物利用度为(109.13±27.50)%,结果显示:两制剂生物等效。

摘要：背景:内皮细胞发生结构损伤和功能障碍的主要特征为内皮细胞活性降低或释放的一氧化氮减少,内皮缩血管肽产生增加。目的:探讨黄芪多糖抗动脉粥样硬化内皮细胞损伤的作用,并以卡托普利做标准对照。设计:随机对照观察。单位:湖北中医学院生理教研室,武汉大学医学院病理生理教研室,广东省荷塘医院外科,武汉大学人民医院内分泌科。材料:实验于2001-07/2002-11在湖北中医学院机能实验室和武汉大学医学院病理生理教研室完成。选择由武汉大学医学院实验动物中心提供的健康国产雄性家兔40只,体质量2.4～3.0kg,随机分为空白组、模型对照组、黄芪多糖组、卡托普利组(标准对照),10只/组。黄芪多糖从山西产黄芪根中提取,制成注射用粉剂,用前以生理盐水新鲜配制。方法:空白组给予正常颗料饲料,其余3组从实验第1天起给予高脂饲料(80%基础饲料中加入15%蛋黄粉、0.5%胆固醇和5%猪油),牛血清1mL/kg从耳缘静脉注射1次,用高脂饲料加免疫损伤建立兔动脉粥样硬化内皮细胞损伤模型。黄芪多糖组每天腹腔注射黄芪多糖500mg/kg;卡托普利组给予5mg/kg卡托普利,相当于临床剂量的5倍;空白组、模型对照组给予等体积的生理盐水4mL/kg,共给药50d。末次给药后24h,从上腔静脉取血后处死动物,腹主动脉形态学变化光镜下观察,并测定家兔血清中总胆固醇、三酰甘油、一氧化氮、内皮缩血管肽、超氧化物歧化酶、丙二醛、总抗氧化活力的变化。主要观察指标:①腹主动脉形态学变化。②血清中各项相关指标变化检测。结果:40只家兔全部纳入实验。①与模型对照组比较,黄芪多糖组和卡托普利组血清中总胆固醇、三酰甘油含量明显降低[(9.33±1.13),(6.60±0.61),(7.09±0.74)mmol/L,P<0.05;(3.05±0.44),(1.26±0.16),(2.17±0.46)mmol/L,P<0.01,P<0.05];且丙二醛和内皮缩血管肽含量也明显降低[(9.98±1.11),(7.10±0.68),(9.46±1.27)μmol/L,P<0.01;(741.90±34.98),(632.62±26.95),(600.74±32.59)ng/L,P<0.01]。②与模型对照组比较,黄芪多糖组和卡托普利组血清中一氧化氮、超氧化物歧化酶含量显著提高[(11.04±1.68),(19.96±6.05),(18.35±3.52)μmol/L,P<0.01,P<0.05;(159.32±5.26),(207.54±16.98),(197.59±28.41)NU/mL,P<0.01,P<0.05];同时总抗氧化活力升高[(23.8±3.5),(34.7±5.6),(30.7±6.8)%,P<0.01,P<0.05]。③黄芪多糖组无论是血清中总胆固醇、三酰甘油及丙二醛含量的降低或一氧化氮、超氧化物歧化酶及总抗氧化活力的升高均优于卡托普利组(P<0.01)。④腹主动脉形态学变化观察结果,可见空白组腹主动脉内膜表面光滑,内皮细胞连续,细胞间隙较小,内皮细胞无水肿,形态正常;模型对照组腹主动脉内膜增厚、隆起,血管内皮细胞可见部分脱落,细胞间隙增宽,内皮细胞有水肿。中膜层明显增厚,平滑肌细胞增生明显,且迁入内皮下,可见泡沫细胞;黄芪多糖组腹主动脉内膜表面基本光滑,细胞连接较紧密,平滑肌细胞增生不活跃,泡沫细胞少见;卡托普利组腹主动脉内膜表面基本光滑,内皮细胞无明显脱落,无平滑肌细胞迁入,平滑肌细胞形态基本正常,排列规则。结论:黄芪多糖可明显降低血清中总胆固醇、三酰甘油、丙二醛和内皮缩血管肽的含量,从而减轻内皮缩血管肽对血管的损伤作用;同时升高一氧化氮、超氧化物歧化酶及总抗氧化活力,应用黄芪多糖家兔光镜下可见腹主动脉内膜表面基本光滑,内皮细胞形态基本完好,提示其具有较好的对抗氧化损伤和保护血管内皮细胞的功能。