摘要：蛋氨酸亚砜还原酶(Msr)是一类很好的抗氧化酶和蛋白修复酶,在生物体氧化还原体系中扮演着重要的角色.本文依据其反应特异性及分子探针发光机制,设计合成了可用于检测蛋氨酸亚砜还原酶活性的探针Msr-TFMCM,并详细研究了其与Msrs的相互作用及反应机理.在此基础上,将Msr-TFMCM进一步用于活细胞内Msrs活性的可视化检测.在培养的细胞中预先加入Msrs的底物蛋氨酸亚砜可以显著抑制荧光信号,说明了探针可以实现对Msrs的专一性检测.

摘要：目的建立评价研究性课程学习效果的方法,分析课程学习与医学专业学习之间的联系。方法87名临床医学三年级学生选修了研究性课程,参加了笔试、项目申请书提交和答辩;80名同年级未选课学生自愿参加了笔试考核。选课学生完成了调查问卷,并参加了学校统一组织的毕业考试。结果笔试成绩表明,选课学生研究设计能力明显高于未选课学生。选课学生笔试成绩与项目申请书评级之间无相关性。76%的选课学生赞同课程激发了研究兴趣。学生的研究能力与其专业知识的掌握程度无相关性。结论研究性课程有助于提升医学生的研究能力和研究意识,将成为医学专业课程体系的重要补充。

摘要：为顺应现代外科发展的需要，提高医学生特别是临床医学硕士研究生的外科技能，我们设计并在2007级硕士研究生中开设了显微外科和腔镜技术课程。此教学的设计紧跟未来外科学发展显微化、替代化、局限化的趋势，教学实践的效果良好。

摘要：背景:前期实验已证实当归注射液能改善再生障碍性贫血小鼠骨髓微环境,促进造血细胞增生。能增加细胞周期蛋白D2表达,促进细胞从G1→S期的转换。目的:拟证实当归注射液对免疫诱导再生障碍性贫血小鼠CD34+细胞及其Fas抗原表达的影响。设计、时间和单位:完全随机区组设计的细胞分子学实验,于2005-11/2006-04在武汉大学人民医院儿科研究所进行。材料:选用8～12周龄雌性(H-2a、MLSb)Balb/c小鼠作为受体,制作再生障碍性贫血模型。选用DBA/2小鼠(H-2a、MLSa)8～10周龄作为供体。方法:将雌性Balb/c小鼠随机分为3组:对照组、模型组和治疗组,每组8只。模型组和治疗组动物建立再生障碍性贫血模型。对照组不经照射。于造模当天开始,模型组和对照组腹腔注射无菌生理盐水10mL/(kg·d),治疗组腹腔注射当归注射液10mL/(kg·d),1次/d,连续12d。主要观察指标:于第12天每只小鼠采集尾静脉血测外周血白细胞计数,取出股骨,计数骨髓单个核细胞。酶联免疫法检测肿瘤坏死因子α表达水平,经流式细胞仪检测骨髓单个核细胞CD34+细胞及CD34+细胞Fas抗原表达。结果:模型组和治疗组小鼠外周血白细胞及骨髓单个核细胞计数均明显低于对照组,治疗组明显高于模型组(P<0.01)。模型组CD34+抗原表达水平明显低于对照组,治疗组CD34+抗原表达水平明显高于模型组(P<0.01),已接近对照组水平。对照组CD34+细胞Fas抗原表达最低,模型组Fas抗原表达明显升高,与对照组比较差异有显著性意义(P<0.01),表明细胞增殖受影响。治疗组Fas抗原的表达低于模型组(P<0.01)。模型组小鼠肿瘤坏死因子α表达明显高于对照组,治疗组明显低于模型组(P<0.01)。结论:当归注射液可能通过降低负调控因子肿瘤坏死因子α水平,减少细胞凋亡,促进再生障碍性贫血小鼠造血细胞的增殖。

摘要：目的了解本地区乙型肝炎病毒(HBV)流行株基本核心启动子(BCP)和前C(PreC)基因的变异热点,为临床提供诊疗信息。方法通过设计3条特异性引物进行半巢式聚合酶链反应(PCR)扩增患者血清中HBV BCP和PreC基因序列,回收和纯化PCR产物,用引物P1、P2直接进行正反测序,然后进行比对分析。结果BCP变异主要集中在TATA样盒(TATA-like box)中的TA1、TA2、TA3区,而TA4极为保守,TA1-TA4未见插入或缺失突变,PreC变异主要集中在nt1896位G→A。另外,发现1例新奇的插入突变。结论BCP和PreC变异可使HBeAg阴转。

摘要：目的:构建葡萄糖苷酶Ⅰ(glucosidaseⅠ, GluⅠ)特异性siRNA真核表达载体。方法:根据 siRNA靶序列选取原则,设计并合成针对鼠葡萄糖苷酶ⅠcDNA的寡聚DNA,退火并连接至载体 pSilencer1.0 U6,再将 U6 启动子及下游插入片断一起切下,克隆至真核表达载体 pEGFP C1,通过限制性酶切和测序对重组表达载体进行鉴定,最后将该质粒转染至HeLa细胞,共聚焦荧光显微镜观察其表达。结果:①限制性酶切和测序结果表明成功构建了带有EGFP基因的鼠GluⅠ特异性的siRNA真核表达载体 pC 1U6glu; ②共聚焦荧光显微镜观察结果表明p C1U6glu成功转染至HeLa细胞。结论:pC 1U6glu的成功构建及表达为进一步利用 siRNA研究葡萄糖苷酶Ⅰ的功能和治疗肿瘤奠定基础。

摘要：目的构建炎症性肠病相关基因(major histocompatibility complex class I chain-related gene A,MI-CA)逆转录病毒表达载体pCLXSN-MICA,为进一步研究MICA基因的功能奠定基础。方法根据MICA基因的核苷酸序列,设计并合成引物,通过RT-PCR方法,从含有MICA基因的Hela细胞中,扩增该基因外显子片段,与逆转录病毒表达载体pCLXSN连接,构建MICA基因的逆转录表达载体,并进行鉴定。结果构建的新质粒经PCR、酶切鉴定和DNA测序,证实新质粒构建成功。结论重组MICA逆转录病毒表达载体的构建为进一步研究MICA在炎症性肠病等自身免疫性疾病的作用奠定了基础。

摘要：目的　对分离自湖北省不同地区的 30株汉坦病毒 (HV)RNAM片段进行分析 ,以了解湖北省不同地区HV的基因特征及基因组功能。方法　参考HV的基因文库软件设计M片段G1 区型特异性引物 ,用适合于湖北省HV分型的逆转录 -半巢式聚合酶链反应 (RT -heminestedPCR) ,并结合限制性内切酶酶切图谱分析 ,对湖北省不同地区分离的 30株HV进行分型、酶切。结果　分离于湖北省不同地区的 30株HV的分型结果为汉滩型 2 1株、汉城型 9株。 2 1株汉滩型靶基因被HinfⅠ、HaeⅢ消化的图形与标准株 76/ 1 1 8株的图形一致 ,未见与H - 1 1 4株相似的图形 ,其中武汉和洪湖各有l株靶基因HaeⅢ消化只见 1个片段 ;应城、江夏、黄陂和麻城各有 1株靶基因HinfⅠ消化有 3个片段。另外 2 1株汉滩型靶基因除前述的应城毒株外均被HincⅡ消化。 9株汉城型靶基因不能被HaeⅢ消化 ;HinfⅠ消化只见 2个片段 ,而EcoRⅠ消化却见 2个片段 ,与R2 2 株消化的图形不一致。结论　湖北省HFRS流行为混合疫区 ;汉城型M片段基因稳定 ,汉滩型M片段基因不稳定 ,且在湖北地区具有一定的地理聚族性。

摘要：肩胛冈血供丰富,有多条营养血管分布,其供骨量在肩胛骨中居首位,是自体带血管蒂三大供骨源之一,仅次于腓骨和髂骨.多年来我们为之进行了系统的研究,共设计5条带不同血管蒂的肩胛冈骨瓣,为显微骨移植开拓新供区,为临床提供更多可选择术式[1～11].

摘要：背景:复方缬芎提取物中缬草提取物为天然的γ-氨基丁酸受体激动剂,可以松弛脑血管痉挛;川芎提取物通过血脑屏障并增进组织微循环、抑制血小板聚集及5-羟色胺释放。目的:探讨由有效组分配制成的复方缬芎提取物对脑缺血损害的防治效果。设计:完全随机、阴性和阳性对照实验。单位:华中科技大学同济医学院老年医药学研究所。材料:实验于2003-03/2004-05在华中科技大学同济医学院老年医药学研究所完成。动物:①脑组织营养血流灌注实验:选择昆明种小鼠50只,随机分为正常组、溶剂对照(模型)组、川芎嗪50mg/kg组、复方缬芎170mg/kg组及复方缬芎85mg/kg组,每组10只。②动-静脉旁路法血栓形成实验:选择Wistar大鼠50只,随机分为溶剂对照(模型)组、复方丹参5g/kg组、复方缬芎156mg/kg组、复方缬芎94mg/kg组及复方缬芎31.3mg/kg组,每组10只。③大脑中动脉阻断法实验:选择Wistar大鼠60只,随机分为假手术组、溶剂对照(模型)组、川芎嗪10mg/kg组、复方缬芎156mg/kg组、复方缬芎94mg/kg组及复方缬芎31.3mg/kg组,每组10只。④急性广泛性脑缺血实验:选择昆明种小鼠50只,随机分为正常组,溶剂对照(模型)组、川芎嗪10mg/kg组、复方缬芎200mg/kg组及复方缬芎40mg/kg组,每组10只。方法:①脑组织营养血流灌注实验中各组小鼠分别预先腹腔注射复方缬芎(85,170mg/kg)、川芎嗪(50mg/kg)或等容积助溶剂(0.2mL),20min后静脉注射垂体后叶素(2.5u/kg),10min后尾静脉注射同位素99Tcm+亚锡双半胱氨乙酯3.7×1010Bq/L(0.1mL/只)。注射15min后用放射免疫计数仪计取血和大脑组织脉冲强度。②动-静脉旁路法血栓形成实验,术前分别灌胃给复方缬芎156,94,31.3mg/(kg·d),复方丹参注射液[相当生药5g/kg·d)]和生理盐水,连续给药7d,1次/d,停药24h后戊巴比妥钠腹腔麻醉下以体外导流管(内置手术丝线)连接颈总静脉与颈总动脉。体外导流15min后称取血栓质量。③大脑中动脉阻断法实验,水合氯醛腹腔麻醉下,线栓法阻断一侧大脑中动脉,假手术组除不插入线栓外其他手术处理同试验组。各组分别于术前1h、术后3,12h灌胃给复方缬芎(156,94,31.3mg/kg),川芎嗪(10mg/kg)或等容积的助溶剂。手术造模24h后进行神经功能损害行为评分,测定脑质量指数和脑梗死指数。④小鼠急性广泛性脑缺血实验采用胶原蛋白+肾上腺素尾静脉注射造模。各给药组鼠造模注射前30min、注射后1h分别灌胃给予复方缬芎(200,40mg/kg),川芎嗪(10mg/kg)或等容积的助溶剂。观察注射造模后5min内死亡鼠数,15min内偏瘫鼠数,8h后处死测取脑质量指数和紫外分光光度法检测脑组织匀浆的乳酸水平。主要观察指标:①各组小鼠大脑组织/血γ-射线脉冲强度比。②各组大鼠颈总动-静脉体外导流管血栓质量。③各组大鼠神经功能损害行为评分。④各组小鼠脑质量指数。⑤各组大鼠脑梗死指数。⑥各组小鼠死亡率。⑦各组小鼠偏瘫率。⑧各组小鼠脑组织匀浆的乳酸含量。结果:小鼠急性广泛性脑缺血实验中,溶剂对照组造模过程中死亡3只,其余207只实验鼠进入结果分析。①在小鼠脑组织营养血流灌注实验中,脑与血的γ-射线脉冲强度比值:复方缬芎85mg/kg组,复方缬芎170mg/kg高于模型组(0.53±0.09,0.55±0.08,0.45±0.08,t=2.2346,2.7933,P<0.05)。②在大鼠血栓法血小板聚集性实验中,血栓质量:复方缬芎156mg/kg组、复方缬芎94mg/kg组及复方缬芎31.3mg/kg组明显低于模型组([12.66±4.79),(13.31±3.97),(13.49±4.09),(19.21±5.76)g,(t=2.6670,2.5604,2.7649,P<0.05)]。③在大脑中动脉阻塞实验中,复方缬芎31.3mg/kg组、复方缬芎94mg/kg组及复方缬芎156mg/kg组的行为评分明显低于模型组[(5.9±1.9),(6.0±2.0),(5.8±2.2),(8.7±0.9)分],脑梗死指数低于模型组[(16.52±5.78)%,(16.54±3.00)%,(14.18±6.13)%,(24.03±4.85)%,(t=3.1189～4.2118,P<0.01)]。④在小鼠急性广泛性脑缺血实验中,复方缬芎40mg/kg组及复方缬芎200mg/kg组的脑质量指数明显低于模型组[(0.91±0.20)和(0.82±0.24)%,(1.40±0.32)%],脑组织乳酸水平低于模型组[(17.44±6.71),(14.43±2.81),(29.0