摘要：以云南紫稻细胞质无花粉型水稻樱香不育系和保持系为材料，构建了不育系和保持系的线粒体基因组BAC文库．每个文库均保存2304个菌落，外源插入片段介于10～20kb之间．将两个文库的2304个克隆分别集中于96孔板中，根据已发表的水稻线粒体序列对atp6、atp9、cob、cox2等4个基因设计特定引物，对96孔板中的菌落进行了PCR鉴定，均能筛选得到阳性克隆，通过对96孔板中阳性克隆的位置进行推导，可以得到文库中含有相应基因克隆的大致位置及数目．PCR筛选结果显示两个文库均包含用于检测的目的线粒体基因，说明文库典型性良好，并且PCR法用于文库基因筛选具有快速简便的优点．

摘要：利用MISA软件对烟草EST公共数据库中的简单重复序列(SSRs)进行了分析。结果表明,在133523条EST序列中,共获得81757条SSR序列,SSRs之间的距离约为0.92 kb。其中,六碱基重复丰度最大,占60.3%,而单碱基、三碱基、四碱基、二碱基和五碱基重复丰度分别为20.0%、11.0%、4.2%、2.8%和1.7%。在单碱基、二碱基、三碱基和四碱基重复模体中,丰度最大的分别是A/T、AG、AAG和AAAT,而CG在编码区内丰度很低。用CAP3软件进行冗余分析表明,在这6种类型的重复模体中,冗余与非冗余的烟草EST之间没有显著差异。在得到的SSR序列中随机选择10个序列设计引物,在7个烟草品种中进行PCR扩增。结果表明,10对引物全部扩增出PCR产物,其中8对引物扩增出预期片段。用这8组扩增出预期片段的PCR产物进行变性PAGE凝胶电泳检测,结果表明,其中有4对引物(EB4、EB5、EB6和EB8)扩增出多态性条带。

摘要：利用差异显示技术从烟草中分离到一个受乙烯利诱导表达的cDNA片段,结合RACE扩增技术获得该基因的全长序列。该全长cDNA共含1350个碱基,编码区有1170bp,通过GenBank同源性比较发现它与一条已知的烟草S-腺苷甲硫氨酸合成酶(SAMS1,EC2.5.1.6)的基因编码区存在90%的同源性,编码的氨基酸顺序96%同源,而在cDNA的5'及3'非编码区同源性很低,且有一些短片段的缺失。设计合适的引物分别对这两个SAMS基因进行RT-PCR分析表明,SAMS1基因受高温诱导表达增强,但不受甲基紫晶诱导的氧化胁迫及盐胁迫影响,而新分离到的这个基因(SAMS2)的表达同时受高温、甲基紫晶及高盐3种胁迫的诱导。

摘要：采用磁珠富集法FIASCO，设计生物素标记的寡核苷酸Biotin-（AG）13作探针，分离莲藕（Nelumbo nucifera Gaertn．）的微卫星分子标记，从所获得的阳性克隆中选取42个测序，结果36个克隆（85．0％）含有微卫星序列，其中23个（63．9％）重复数在10以上，19个（52．8％）为完美型。设计并且合成24对微卫星引物，经筛选其中16对为有效引物（66．7％），能扩增出多态性条带。

摘要：蜘蛛香(Valeriana jatamansi)在我国西南和东北地区作为一种传统的草药用来治疗消化不良和风湿病。蜘蛛香在化学活性成分和药效方面都与缬草属其他药用植物存在较大差别。为了研究缬草属植物之间的亲缘关系以及寻找一种能够有效方便地将蜘蛛香与其他缬草属植物区别开的方法,本文对5种缬草属药用植物的5S rDNA序列进行了扩增和测序。测序的结果表明扩增的5S rDNA片断,长度在307bp到355bp之间。系统发育分析表明,在所测试的5种缬草属植物中,中国缬草(***)与宽叶缬草(*** ***)亲缘关系最近,而长序缬草(***)与其他4种材料的遗传距离最远。根据蜘蛛香5S rDNA序列的SNP位点设计了6条诊断型引物,通过等位基因特异PCR(amplification refractory mutation system,ARMS)分析,其中一条引物可以将蜘蛛香与其他4种缬草属植物区别开。此外,利用这条特异引物,ARMS技术还能够成功地鉴别出复方中药中是否含有蜘蛛香。由此可见,这种方法不仅可以用以鉴别蜘蛛香的基原植物,同时还能用于蜘蛛香商业产品的鉴别。

摘要：膨胀素是一类存在于植物细胞壁上,并能快速缓冲张力,使植物细胞壁松驰的蛋白质。以中国莲幼叶总RNA反转录所得的cDNA为模板,设计简并引物,用PCR方法成功扩增出expansin部分序列,经克隆测序,得到长度在531￣532bp的序列共3个,编码177个氨基酸,而且均存在expansin的保守区域。与其它物种,如杂交杨树、烟草、杂交葡萄、野马铃薯、樱桃等物种的expansin相比,核苷酸相似性为84%￣85%,氨基酸序列相似性为86%￣99%。莲expansin的成功克隆为研究莲的生长发育以及莲品种的改良等打下了良好的基础。

摘要：通过检索NCBI核苷酸数据库获得orf 138和orf 224开放阅读框序列,依据其保守序列设计2对引物,对几种来源不同的小白菜和菜薹细胞质不育系及其保持系进行PCR扩增。orf 138引物在小白菜和菜薹细胞质雄性不育系中均扩增出573 bp的片段,orf 224引物只在一个菜薹雄性不育系中扩增出653 bp的片段。同源性比对发现orf 138引物在雄性不育系中扩增的片断与orf 138基因同源度达100%,表明这几个雄性不育系类型分别为萝卜细胞质不育类型;orf 224引物在雄性不育系中扩增的片断与orf 224基因同源度达100%,表明这一雄性不育系类型为甘蓝型油菜不育类型。