摘要：目的建立一种快速、准确诊断人呼吸道合胞病毒(hRSV)早期感染的实时荧光定量PCR检测方法。方法以hRSV最保守的N基因序列为参考,设计两对特异的引物和一条TaqMan荧光探针,在LightCycler定量PCR检测仪上对93例下呼吸道感染患儿进行hRSVRNA检测,并与病毒分离培养、常规PCR、巢式PCR方法和ELISA法相比较。结果以PCR模板浓度来定义,该方法线形范围为1×102￣1×107cDNAcopies/μl,灵敏度达1×102cDNAcopies/μl,和巢式PCR相同,比常规PCR高10倍。用人脊髓灰质炎病毒Ⅰ型、柯萨奇病毒2型、甲型、乙型流感病毒、腺病毒7型作对照,均无预期扩增产物和荧光的产生;该方法在LightCycler和Rotor-Gene两种仪器上的定量结果具有一致性;采用该法对93例患儿行FQ-PCR检测出阳性44例(43.9%),ELISA方法检测阳性4例(4.3%),两者相关性不高。hRSV浓度的高低与患儿临床症状之间的关系不是很明显。结论该方法可快速、灵敏、特异、定量检测hRSV,在hRSV感染的早期诊断和疗效监测方面具有良好的应用前景。

摘要：参考GenBank核苷酸序列库中的HBV的核苷酸序列设计合成了一对对应于HBx基因的引物,从原发性肝癌(hepatocellularcarcinoma,HCC)患者的血清中提取HBV基因组DNA作为模板,扩增HBx编码区并测定了核苷酸序列.将该编码区克隆到酵母双杂交系统的诱饵蛋白表达载体pGBKT7中,转入酵母细胞AH109,进行表型鉴定.然后通过Mating实验从已制备好用于酵母双杂交系统的肝cDNA表达文库中筛选与HBx相互作用的细胞蛋白,并用体外免疫共沉淀实验进一步验证.研究表明,分离得到的与HBx基因编码的蛋白相互作用的4种新的细胞蛋白,分别是醛缩酶B、C8α亚基、一种丝氨酸蛋白酶Hepsin和一种未知蛋白.

摘要：蚀斑实验是研究病毒感染动力学最常用的方法,也是研究病毒与细胞相互作用的方法之一.但是,病毒颗粒在溶液中的随机分布导致蚀斑在细胞层上的形成位置难以确定,因此难以对蚀斑进行长时间的示踪观察.本文通过设计微流控芯片内微通道的结构和尺寸,实现了对样品的定点微注射,研究了喷嘴尺寸和流体流速对微注射的影响.将该芯片与开放的细胞培养区域结合,成功实现了牛痘病毒的定点微注射;对牛痘病毒侵染宿主细胞形成的蚀斑及蚀斑的变化进行长时间示踪,研究了牛痘病毒在宿主细胞之间的传播速率.本文中设计的微注射芯片解决了长期示踪蚀斑的难题,为病毒感染动力学研究及病毒与细胞相互作用研究提供了一个新的方法和平台.

摘要：研究了一系列钌(II)多吡啶配合物对pBR322DNA的光断裂作用,并与光谱法和粘度法的研究结果进行了对比.实验结果表明,钌(II)多吡啶配合物光断裂DNA的能力不仅与配合物与DNA相互作用的结合模式和结合强度有关,还与配合物自身的电子结构有关;钌(II)多吡啶配合物对DNA的光断裂存在立体选择性;其断裂机理是激发态的配合物与溶液中的氧分子发生能量转移生成单线态氧活性氧化物种,将鸟嘌呤碱基氧化而导致DNA断裂.本研究对于遗传工程中的化学核酸酶以及以DNA为靶标的药物设计有重要的意义.

摘要：目的 :研究空心莲子草类盐注射液治疗汉滩病毒 (HTNV)感染乳鼠的疗效。方法 :应用正交设计 ,选择空心莲子草类盐注射液剂量为 2 0 0mg·kg-1·d-1对感染HTNV 76 / 118株的乳鼠进行治疗 ,采用微量细胞培养结合直接免疫荧光法和逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)检测治疗后乳鼠不同组织中的病毒滴度和病毒核酸。结果 :空心莲子草类盐注射液能减轻乳鼠发病症状 ,降低死亡率 ,延长平均生存天数 ;乳鼠脑、心、肺、脾、肾等脏器中感染性病毒滴度下降 ;空心莲子草类盐能加快血液中HTNV76 / 118的清除。同时研究结果也显示空心莲子草类盐注射液抗HT NV 76 / 118株的作用类似病毒唑。结论 :空心莲子草类盐注射液在体内对HTNV感染乳鼠有治疗作用。