摘要：目的构建人多梳家族环指蛋白1(PCGF1)基因的慢病毒载体,建立稳定表达PCGF1基因的细胞系。方法根据人PCGF1序列设计并合成引物,以A549细胞c DNA为模板,PCR扩增目的基因。双酶切目的基因并插入p LVXIRES-puro质粒,对重组质粒进行慢病毒包装,用包装好的病毒感染A549细胞系,通过嘌呤霉素筛选阳性表达细胞,Western blotting验证PCGF1表达情况。结果重组质粒经测序分析正确,瞬时转染293T细胞后,Western blotting验证PCGF1表达明显升高。包装慢病毒颗粒后感染A549细胞,经嘌呤霉素筛选后,Western blotting验证得到PCGF1稳定过表达的A549细胞系。结论成功构建了p LVX-IRES-PCGF1-puro慢病毒过表达载体和PCGF1稳定过表达的A549细胞系,为进一步研究PCGF1的功能奠定了基础。

摘要：随着医药卫生体制改革的不断深入，对医院的内部系统管理与协调，流程组织与设计提出了更高的要求。健全完善医院内部决策和制约机制，是当前医改关于探索现代医院管理制度的重要工作任务之一。

摘要：防暴枪的口径是防暴枪设计和使用的重要参数。从弹药角度考虑,口径对内外弹道有着决定性的影响;从枪械设计角度考虑,口径制约影响着枪械的整体,包括性能和结构;从使用者角度考虑,口径是重量和使用方便以及通用化和可靠化勤务性的重要参数;从使用对象角度考虑,口径和杀伤效果以及打击威力有着决定性的研究。该文首先对警用防暴枪的现状进行了分析,接着是对其弹道性的研究。

摘要：漆酶是一种多铜氧化酶,利用铜离子特性催化氧化底物,消耗氧分子最终生成水,其特征底物为酚类、芳胺类等物质。由于漆酶氧化电势较低、空间阻碍等因素限制了其应用范围。后来研究者发现,在漆酶中加入一类小分子物质在一定程度上拓宽了其作用底物范畴,且提高了其催化效率。加入的小分子称为"介质",漆酶与介质共同构成漆酶-介质体系(LMS)。目前,LMS在环保、纺织、造纸等领域显示出潜在的应用价值。本文将对近年来LMS中介质的结构特点、作用方式、催化机制及其应用等多方面的研究进展进行综述。

摘要：为深入研究漆酶-介质体系中漆酶与介质间的相互作用,基于分子对接技术计算模拟了变色栓菌漆酶与5种典型介质之间的结合模式,并在分子水平阐明了漆酶与介质的相互作用机制。结果表明,漆酶活性位点的Leu164、Asn264、Phe265、Gly392、Ala393、Ile455等氨基酸残基与介质发生疏水作用,Asp206与介质中的羟基发生氢键作用;漆酶与介质作用时His458远离了T1Cu,对漆酶氧化电势的提高具有较大贡献。为漆酶与介质结构的进一步改造以及从天然资源中挖掘新介质提供了理论指导。

摘要：【目的】构建PCGF1(Polycomb Group Ring Finger 1)基因敲除的MCF-7稳定细胞系。【方法】以PCGF1序列为模板,设计sgRNA干扰序列,两端加入载体连接序列。通过DNA片段合成所需sgRNA序列。退火形成oligo二聚体序列后,使用T4 DNA连接酶重组干扰序列与pCAG-T7-Cas9-pgk-Puro-T2A-GFP质粒。测序鉴定后,将pCAG-T7-Cas9-gRNA-pgk-Puro-T2AGFP重组载体通过脂质体转染MCF7细胞系。通过嘌呤霉素进行阳性克隆筛选,Western blotting检测PCGF1表达。【结果】测序结果显示构建的重组载体序列正确。转染筛选后,western blotting验证构建的MCF7细胞系PCGF1表达明显降低。【结论】利用pCAG-T7-Cas9-pgk-Puro-T2A-GFP质粒,成功构建PCGF1敲低载体。转染MCF7细胞系,通过嘌呤霉素筛选和western blotting验证得到PCGF1稳定敲低的MCF7细胞系。

摘要：【目的】通过对武警部队某高校大学生卫生服务需要现状的研究,分析其存在的问题,并提出对策及建议。【方法】参考《2008年中国卫生服务调查》相关内容,自行设计卫生服务需要情况调查问卷。对武警部队某高校1 908名1～4年级所有大学生进行现场问卷调查,内容包括人员基本情况、基本健康状况、卫生服务需要等情况,进行一般描述性分析及多因素logistic回归分析。【结果】调查对象自评健康状况好的学生有1 356人（71.07%）,一般的有484人（25.37%）,差的有68人（3.56%）。两周患病人数为546人,患病人次为740人次,两周患病率为38.78%,高于全国平均水平24.10%（P〈0.05）。两周患病率按照不同人口学特征进行统计分析,结果显示男生两周患病率（34.25%）显著低于女生（51.72%）（P〈0.05）;一年级学生两周患病率（45.38%）显著高于其它年级（P〈0.05）;非医学专业学生两周患病率（47.87%）显著高于医学专业学生（31.58%）（P〈0.05）;经多因素分析,性别、年级、专业是影响大学生患病的主要因素。【结论】武警部队某高校大学生的两周患病率较高,其中性别、年级、专业是影响大学生患病的主要因素,该武警高校的整体卫生服务保障能力与学生的期望之间还存在一定差距。

摘要：【目的】通过研究与肌肉收缩密切相关蛋白-肌巨蛋白(Titin)的结构特征,探索肌肉收缩的分子结构基础。【方法】采用随机构象搜索和分子动力学模拟退火等分子模拟方法,对Titin蛋白PEVK富含域中的PXXP基序(PVAP、PKKP、PEVP)进行构象搜索和构象分析研究。【结果】构象分析发现,上述PXXP基序的稳定构象集可分为折叠式和伸展式两组,且均以折叠式为优势构象,其中脯氨酸残基为反式构型,满足聚脯氨酸Ⅱ型(PPⅡ)左手螺旋的结构要求,具有可延展性。【结论】PXXP基序的可延展性是Titin蛋白PEVK富含域产生弹性,继而使肌肉产生弹性的分子结构基础。

摘要：【目的】构建ZFP580基因的原核表达质粒,转化大肠杆菌,诱导表达并分离纯化大鼠锌指蛋白ZFP580。【方法】根据ZFP580 cDNA序列的开放阅读框设计引物,利用PCR技术扩增ZFP580的开放阅读框cDNA序列,将PCR扩增的目的片段与载体pET30a分别双酶切、回收纯化后做定向连接,Nco I、Xho I双酶切电泳筛选、鉴定并测序。将构建的重组质粒pET30a-ZFP580转化大肠杆菌BL21(DE3),由异丙基-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达并纯化目的蛋白。【结果】成功扩增ZFP580基因并构建了表达质粒pET30a-ZFP580,测序结果表明与GeneBank公布的序列一致。含有该质粒的大肠杆菌BL21(DE3)经IPTG诱导表达后,产物蛋白分子量约为19 kDa。【结论】成功表达并纯化了大鼠ZFP580蛋白,为进一步研究锌指蛋白ZFP580的功能奠定了基础。

摘要：为从天然产物中寻找廉价、低毒、高效的漆酶新介质,利用分子模型和分子对接技术在分子水平研究木质素降解产物在漆酶-介质体系中与漆酶活性位点的结合模式与反应能力,以探明其结构特征。结果表明,10种木质素降解产物小分子介质酚羟基邻位取代基可保持与漆酶作用过程中介质构象的稳定,邻位取代基的给电子能力可增强介质自由基中间体的稳定性,介质酚羟基对位取代基的吸电子性有利于加强与Phe265间的π-π堆积作用,但对位取代基吸电子性过强反而不利于提高介质反应活性及苯氧自由基稳定性。该研究为新介质的发现及介质结构的改造与修饰奠定了理论基础与研究方向。