摘要：目的建立镶囊包封率的测定方法,以包封率为指标,对积雪草苷脂质体镶囊的处方和工艺进行考察。方法建立HPLC法测定积雪草苷,用薄膜分散法制备脂质体,采用层层自组装法制备镶囊。采用低速离心法测定积雪草苷镶囊的包封率,并对方法进行验证。通过单因素实验,考察一系列处方及制备工艺对镶囊包封率的影响,选择影响较大的3个因素进一步采用星点设计-效应面法优化处方工艺。结果低速离心法测定镶囊包封率准确、可靠。通过单因素实验,确定十八胺用量为磷脂量的4%,海藻酸钠(ALG)和壳聚糖(CS)溶液的质量浓度为1 mg/m L,脂质体混悬液的pH值为7.9,前体层为2层,包埋层为1层。星点设计-效应面法优化得到的最优处方为ALG和CS溶液pH值7.00,反应转速450 r/min,反应时间0.30 h,通过拟合方程计算得到的最优处方的包封率为81.21%。激光共聚焦显微镜显示脂质体成功地包埋在聚电解质微囊的囊壁中。结论所得积雪草苷镶囊的包封率较高,粒径均匀,激光共聚焦显微镜下形态良好。

摘要：目的探讨高重力对前成骨细胞MC3T3-E1形态和成骨功能的影响。方法将MC3T3-E1细胞按不同高重力分为对照组、5 g组、10 g组、15 g组、20 g组,实验组每次加载30 min连续加载3 d,对照组同步置于除g值外相同的环境中。鬼笔环肽染色考察细胞骨架蛋白形态;碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性检测试剂盒检测ALP含量;实时定量PCR检测ALP、Ⅰ型胶原(collagenⅠ,ColⅠ)、骨钙素(osteocalcin,OC)、runt相关转录因子(runt-related transcription factors,Runx2)的基因表达;Western blotting检测ColⅠ、OC蛋白表达。结果高重力条件下成骨细胞胞体变薄,细胞表面积明显增大;细胞骨架排列结构变得疏松、松散,微丝肌动蛋白束状结构减少,微丝呈弥散状,有序性降低。成骨分化相关指标ALP、ColⅠ、OC、Runx2的基因均显著上调;ColⅠ和OC蛋白亦呈现高表达。对照组茜素红染色只有极少量面积很小的桔红色结节,高重力加载后各组细胞明显形成面积大小不一的桔红色结节。结论高重力下成骨细胞可通过骨架结构发生重排引起细胞形态的改变,并进一步通过上调分化相关基因和蛋白表达,有效刺激成骨细胞成熟分化。

摘要：在高校尝试贯彻"以学生为主体"的教学观,努力实现高校教育由应试教育向素质教育转变。以高等医学药理学局部麻醉药的课堂教学为具体案例,从分析教学、设计教学和实施教学等多个方面,剖析高校教学中突出学生主体性的具体实践,为广大从事基础医学教育的高校教员提供参考和借鉴。

摘要：目的体外模拟成骨细胞在体内的生存环境,探讨淫羊藿苷(ICA)对高重力下成骨细胞MC3T3-E1增殖与凋亡的影响。方法将成骨细胞随机分为三组:高重力组、高重力+ICA组(以下简称"联合组")和对照组,其中,高重力组予以20G高重力,联合组将20G高重力和10μg/L ICA同时应用于细胞,对照组正常培养,不进行任何附加操作。采用MTT法检测细胞增殖,流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡,实时定量PCR(qRT-PCR)检测细胞凋亡相关基因,透射电镜(TEM)检测细胞亚细胞结构变化。结果 MTT法检测显示,高重力组吸光度值显著低于对照组(P<0.01),联合组吸光度值显著高于对照组和高重力组(P<0.01)。FCM检测显示,高重力组凋亡率显著高于对照组(P<0.01),联合组凋亡率显著低于对照组和高重力组(P<0.01)。qRT-PCR检测结果显示,与对照组比较,高重力组Bax、Bcl2、Bax/Bcl2、P53的mRNA表达均显著上调(P<0.01或P<0.05),联合组除Bax/Bcl2 mRNA表达外均显著下调(P<0.05或P<0.01),且联合组Bax、Bcl2、Bax/Bcl2、P53的mRNA表达均显著低于高重力组(均P<0.01)。TEM下可见高重力组呈中晚期凋亡和变性坏死现象,而其他两组无明显变化。结论成骨细胞可响应高重力刺激信号并发生一系列变化;高重力(20G)不仅可抑制成骨细胞增殖,促进细胞凋亡,还可导致成骨细胞发生变性坏死,但适当浓度(10μg/L)的ICA可逆转高重力加载所导致的这种不利影响,对成骨细胞起相应的保护作用。

摘要：【目的】了解力学因素在骨组织重建过程中的作用,探讨高重力对成骨细胞(MC3T3-E1)增殖与凋亡的影响,为组织工程中研究高重力对骨组织重建的影响提供理论依据。【方法】将培养的MC3T3-E1细胞按高重力加载力不同分为对照组、5 G组、10 G组、15 G组、20 G组,实验组每次加载30 min连续加载3 d,对照组同步置于除G值外相同的环境中。【结果】MTT法检测显示,5 G组增殖显著增高,10 G组增殖无显著差异,15 G和20 G组增殖均显著降低。流式细胞术检测显示,5 G组凋亡率显著低于对照组,10 G、15 G、20 G组凋亡率都显著增高。凋亡相关指标:Bax基因,与对照组比较,5 G组表达显著下调,10 G、15 G组表达无显著差异,20 G组表达显著上调。Bcl2基因,与对照组比较,5 G组表达显著下调,10 G组表达显著上调,15 G、20 G组表达无显著差异。Bax/Bcl2基因表达比,与对照组比较,5 G组显著下调,10 G、15 G组无显著差异,20 G组显著上调。P53基因,与对照组比较,5 G组表达显著下调,10 G组无显著差异,15 G、20 G组表达都显著上调。【结论】成骨细胞对高重力刺激的响应可能存在一个"临界点","临界点"以下的高重力刺激可促进细胞增殖,抑制细胞凋亡;"临界点"以上的高重力刺激可抑制细胞增殖,并激活细胞凋亡。