摘要：白介素-8(IL-8)是一种趋化活性物质,与其他细胞因子一样,IL-8具有多效性功能,是炎症性疾病的重要介质,它在抗感染、免疫反应调节以及抗肿瘤方面有重要作用[1,2].炎症反应的主要特征之一是中性粒细胞在炎性损伤部位的聚集.感染、创伤、局部缺血以及癌症等病理条件也可观察到大量中性粒细胞的聚集、浸润.中性粒细胞的这种定向迁移对免疫调节、炎症反应等宿主防御机能起关键作用.对IL-8的深入研究将对炎症疾病、感染的发生发展、肿瘤免疫以及所有以中性粒细胞、淋巴细胞浸润为特征的疾病的认识具有推动作用,同时为设计新的抗炎症、抗感染甚至抗肿瘤药物提供依据.

摘要：目的构建人巨细胞病毒(HCMV)gB基因,并对pET28a/gB重组质粒进行诱导表达,鉴定表达的目的蛋白。方法根据Genebank中HCMV核苷酸序列设计引物,并在引物的5′、3′端分别加入BamHⅠ、EcoRⅠ限制性内切酶位点。特异性扩增gB编码基因片段,同时构建含HCMVgB编码基因的原核表达载体,对重组质粒进行诱导表达,用间接酶联免疫吸附测定(ELISA)法对纯化的Ni/gB融合蛋白的灵敏度和特异度等生物活性进行鉴定,灵敏度可达95%,特异度达96.7%。结果目的蛋白经诱导后表达于上清液中,经鉴定,目的蛋白保留了天然蛋白原有的生物活性。结论 Ni/gB融合蛋白的获得,为研制以重组蛋白代替传统全病毒作为检测抗原的新型HCMV特异性免疫学检测试剂盒奠定了基础。

摘要：目的用聚合酶链式反应(PCR)扩增人巨细胞病毒UL32、UL44截短基因,构建pET-32a-UL32-UL44表达载体,转化宿菌大肠杆菌BL21(DE3)进行表达,对目的蛋白进行纯化、标记HRP,用于检测IgM抗体。方法根据Gene-bank中HCMV的pp150、pp52蛋白序列,利用Protean计算机软件分析其亲疏水性和抗原性,选取适合的区段,根据其对应的UL32、UL44基因核苷酸序列设计合成引物,PCR扩增目的基因序列,经测序证明无误之后,克隆pET-32a-UL32-UL44重组质粒,将重组质粒导入大肠杆菌BL21(DE3)菌株,进行诱导表达,纯化目的蛋白,标记HRP,用ELISA捕获法对目的蛋白-HRP标记物的灵敏性和特异性等指标进行评价。结果成功构建pET-32a-UL32-UL44重组质粒,导入在BL21(DE3)菌株中,经诱导后目的蛋白表达于上清中,经纯化、标记HRP,标记物用于ELISA捕获法能够准确、特异地检测HCMV血清标本,80份血清检测结果显示其灵敏度可达92.5%,特异性达97.5%。结论 HCMV基因工程重组蛋白具有较好的免疫活性,为研制以基因工程重组抗原代替传统全病毒抗原的HCMV检测试剂盒打下了基础。