摘要：目的研究衣原体基因转录调控过程中基因通用调节因子A(GrgA)与RNA聚合酶(RNAP)α亚基相互作用的关系,以提高GrgA和RNAP参与衣原体转录和调控机制的认识。方法本研究通过引物设计,采用聚合酶链反应(PCR),构建携带His或Strep蛋白标签的衣原体RNA聚合酶(c RNAP)α亚基和GrgA的各种融合蛋白表达载体,将表达载体转入Arctic Express表达菌株的化学感受态细胞菌株,通过异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导13℃低温表达相应蛋白,借助体外蛋白牵出试验(Pull-down技术)、聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)及蛋白质印迹法(WB)分析鉴定出GrgA与cRNAPα亚基两者间相互结合的较为详细的某一段氨基酸序列。结果cRNAPα亚基能与GrgA结合,GrgA与α△(277-377)有结合,与α△(1-259)无结合;α亚基与GrgA△(1-64)、GrgA△(65-112)、GrgA△(114-165)、GrgA△(166-206)、GrgA△(207-268)均有结合。结论GrgA能与cRNAPα亚基结合;cRNAPα亚基与GrgA的结合位点位于α亚基N末端的1-259位氨基酸序列;GrgA通过多个氨基酸序列位点与cRNAPα亚基结合;cRNAPα亚基的N末端可能同样参与了转录调控过程。

摘要：为了建立二重环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification, LAMP)检测体系快速检测鸭肉中沙门氏菌和金黄色葡萄球菌,本研究利用沙门菌invA基因和金黄色葡萄球菌SAR0395基因设计引物,以建立单重LAMP体系为基础,对引物浓度进行优化,建立二重LAMP检测体系,测定对单一菌株的特异性和灵敏度,并对两种细菌扩增产物的溶解曲线和溶解峰进行分析。结果显示,建立的单重LAMP体系分别能对沙门氏菌和金黄色葡萄球菌进行高效扩增,当沙门氏菌和金黄色葡萄球菌引物浓度比达到2.5:1时,建立的二重LAMP检测方法扩增效率最佳,建立的单重和二重LAMP检测方法对两种细菌具有较好特异性;二重LAMP对金黄色葡萄球菌和沙门氏菌的检测灵敏度分别为9.1×10^(1) CFU/m L和7.8×10^(1) CFU/mL,可根据扩增产物溶解曲线和溶解峰温度的不同,实现对两菌有效鉴别。与传统方法比较,二重LAMP对鸭肉类产品检测符合率为100%。结果表明,建立的二重LAMP检测方法灵敏度高、特异性强、可定性鉴定、检测周期短,可用于鸭肉中金黄色葡萄球菌和沙门氏菌的快速检测。

摘要：从公立医疗服务准公共产品特性和医疗服务的性质两个方面,强调了政府对公立医院补偿的必要性和合理性,并指出了政府补偿中存在财政补偿不足、缺乏补偿标准、监管不力等问题。同时,针对政府补偿现状提出了加大政府对公立医院的投入;设计科学合理的公立医院财政补偿制度;加强对公立医院财政投入资金的监管等政策建议。

摘要：目的:优选姜半夏最佳炮制工艺。方法:选择生姜用量、白矾用量、炮制时间3个因素,以姜半夏中有效成分总有机酸、炮制辅料生姜中6-姜醇的含量以及白矾残留量为考察指标,采用L9(34)正交试验设计,以多指标综合加权评分方法优选姜半夏炮制工艺,并与《中国药典》方法(生姜25 g,白矾12.5 g)比较及进行验证试验。结果:优选出姜半夏炮制工艺为每100 g净半夏加生姜25 g、白矾8 g,共炮制4 h;所得样品3次验证试验结果相似。结论:优选的炮制工艺与药典法比较确定了炮制时间,减少了白矾用量,既使姜半夏有效组分保持较高的含量,同时又降低了白矾残留量。

摘要：目的探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者用核苷类药物治疗不同时间段血清HBV P基因点突变的情况及临床意义。方法选取临床确诊CHB患者108例,并分别于接受拉米夫定(LAM)、阿德福韦酯(ADV)、恩替卡韦(ETV)、替比夫定(L-dT)及序贯联合治疗前、治疗2年、治疗4年时,采用套式PCR方法检测血清中HBV DNA,并检测血清中HBV P基因的变异情况。针对HBV P区目的位点设计引物,按照PyroMark ID遗传分析系统用单核苷酸多态性(SNP)模式进行PCR产物HBV P基因相关位点的焦磷酸测序。结果随着不同药物治疗时间的延长,血清中HBV DNA的含量均明显下降。108例患者治疗前均无HBV P基因变异;治疗2年时,有60例发生各种不同形式的单点或多点突变;治疗4年时,共有93例发生各种不同形式的单点或多点突变;3例采用序贯联合治疗的患者,≥2年全部发生突变。单用某种核苷类药物时,HBV P基因的变异情况随治疗时间的增加而明显增加;不同种类的药物之间,同样的治疗时间段内,HBV P基因变异情况未见明显差异。变异模式以经典突变M204V/I、L180M、A181V/T、N236T突变为主,存在少量V173L、S202G、T184G突变。结论 HBV P基因变异的发生与核苷类药物治疗及治疗时间密切相关。

摘要：目的建立三向连接构造(3WJ)组合引物介导的滚环扩增(PG-RCA)技术检测肠道病毒71型(EV71)的方法,并验证其检测效果。方法根据EV71的VP1基因保守区设计引物模板、引物以及环状探针前体,确立反应体系及反应条件,实时荧光PCR仪监测扩增结果。采用已建立的3WJ组合PG-RCA技术检测16例手足口病患儿咽拭子标本(EV71阳性12例、柯萨奇病毒A阳性2例、柯萨奇病毒B阳性2例)。结果已建立的3WJ组合PG-RCA技术能检测到amol级的EV71 RNA,说明方法建立成功。EV71阳性标本扩增曲线荧光强度均超过阈值;柯萨奇病毒A、B阳性标本扩增曲线荧光强度均低于阈值。结论成功建立3WJ组合PG-RCA技术检测EV71的方法,检测效果好。

摘要：布托啡诺是混合型阿片受体激动拮抗药,主要激动k受体,对u受体没有激动作用,对δ受体的活性很低,其镇痛效应强,镇静时间久,呼吸抑制和药物依赖发生率低,现已广泛应用于临床麻醉工作中。为了探讨布托啡诺在术后镇痛中的作用效果及特点,以及与芬太尼相比较在镇痛作用及副作用方面的区别,作者设计了一个对照试验采用随机双盲方法分别观察布托啡诺及芬太尼在腰椎间盘手术后静脉自控镇痛过程中的镇痛效果及不良反应。[第一段]

摘要：肝移植已成为治疗终末期肝病的一种新的治疗方法,对肝病终末期治疗已取得较好的疗效。进行肝移植手术,病员手术创伤大,病情复杂,常合并多脏器功能障碍,凝血功能差等,且机体免疫功能下降,并发症多,在整个治疗过程中护理极为重要。我院于2002年5月到2006年6月进行肝移植病例23例,其中男性19例,女性4例,均制订护理计划,减少并发症及不良反应,挽救患者的生命,提高了患者的生存宰,收到良好的效果。[第一段]

摘要：一、药品零差价政策分析2009年我国新“医改”方案提出取消药品加成，实行药品零差价，其根本目的是改革医院一贯以来的“以药养医”机制，缓解病人“看病难、看病贵”问题，但是成效不大。1．实行药品零差价政策具有一定的积极意义，但是不能完全消除医疗机构对药品利益的依赖。推行药品零差价政策，究其原因是目前药品加价政策的确存在很多弊端，药品加价政策的初衷是降低药品收入占业务收入的比重，减轻患者负担，但是实践证明，药品加价政策不但没有达到政策设计的初衷，反而带来一系列问题，这些问题不是完全可以通过实行药品零差价解决的。由于政策设计的缺陷，

摘要：党的十八大提出“广泛开展志愿服务”和“提高人民健康水平”的要求,笔者以南通市卫生计生委为例,系统梳理南通市卫生计生系统志愿服务工作的主要做法和成效,以对卫生计生系统更加深入开展志愿服务活动提供参考。