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检索条件"机构=江苏省农业科学院农业部畜禽疫病诊断重点开放实验室"
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检测猪流行性腹泻病毒的R-PCR方法的建立
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《畜牧与兽医》2004年 第1期36卷 10-12页
作者:倪艳秀 何孔旺 俞正玉 郭蓉利 吕立新 陈兆霞江苏省农业科学院农业部畜禽疫病诊断重点开放实验室江苏南京210014 
根据猪流行性腹泻病毒 (PEDV)的N基因自行设计和合成了一对可扩增长度为 641bp目的片段的引物 ,成功地建立了检测的猪流行性腹泻病毒的RT PCR方法。对猪轮状病毒 (PRV)、猪传染性胃肠炎病毒 (TGEV)的RT PCR检测结果均呈阴性。对PEDV JS...
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猪传染性胸膜肺炎放线杆菌毒素I基因的克隆、序列分析及表达
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《中国预防兽医学报》2006年 第2期28卷 121-123页
作者:王芳 何孔旺 邱索平 彭小华 倪艳秀 张雪寒 郭容利 俞正玉江苏省农业科学院兽医研究所农业部畜禽疫病诊断重点开放实验室江苏南京210014 
参照猪传染性胸膜肺炎放线杆菌血清型Ⅰ菌株序列设计了一对特异性引物,用PCR方法扩增毒素Ⅰ基因,得到约920bp的片段,与参考序列的核苷酸同源性达99.3%,定向克隆到pET32a(+)中,转化BL21(DE3)
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猪传染性胸膜肺炎放线杆菌毒素Ⅲ基因克隆、序列分析及表达
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《扬州大学学报(农业与生命科学版)》2004年 第3期25卷 19-21页
作者:王芳 何孔旺江苏省农业科学院农业部畜禽疫病诊断重点开放实验室江苏南京210014 
参照已知猪传染性胸膜肺炎放线杆菌血清2型菌株毒素 (Apx A)序列设计1对特异性引物,经PCR扩增得到目的片段约1096bp,然后克隆入pMD18\|T载体中,经测序比较,与标准序列的核苷酸同源性达98.5%。从T-载体中切下目的片段后,定向克隆入pET32a...
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猪链球菌2型毒力因子分片段的克隆与表达
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《中国人兽共患病杂志》2004年 第11期20卷 943-946页
作者:徐淑菲 何孔旺 陆承平南京农业大学动物医学院南京210095 江苏省农业科学院农业部畜禽疫病诊断重点开放实验室 
根据猪链球菌2型(Streptococcussuistype2)胞外蛋白因子(extracellularfactorprotein,EF)的基因(epf)序列,设计合成一对引物,以猪链球菌2型江苏分离株SS2-H的基因组为模板,扩增epf基因1585-2547位序列,进行T/A克隆,转化入宿主菌DH5α中...
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流行性乙型脑炎病毒E基因的克隆、表达及初步应用
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《中国病毒学》2005年 第5期20卷 494-497页
作者:张雪寒 何孔旺 郭容利 倪艳秀 王芳 俞正玉江苏省农业科学院兽医研究所农业部畜禽疫病诊断重点开放实验室江苏南京210014 
参照GenBank中的日本乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)SA14-14株序列设计了一对特异性引物,用PCR方法从SA14-14扩增E基因全长,然后克隆到pMD18-T载体中,转化宿主菌DH5a,提取阳性克隆质粒进行双酶切鉴定,将目的片段定向克...
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猪源肠毒素性大肠杆菌菌毛基因多重PCR检测方法的建立
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《中国兽医学报》2006年 第2期26卷 162-164页
作者:华荣虹 张书霞 何孔旺南京农业大学动物医学院江苏南京210095 江苏省农业科学院农业部畜禽疫病诊断重点开放实验室江苏南京210014 
为了对猪源产肠毒素性大肠杆菌(ETEC)的4种主要菌毛(K 88、K 99、F 41和987p)进行快速检测和分型,建立了检测4种菌毛的多重PCR方法。首先设计合成4对4种菌毛特异性的引物,然后用4种菌毛参考ETEC菌株优化了多重PCR方法。该方法对K 88、K...
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4株猪链球菌2型分离株主要毒力因子(MRP、EF)的全基因序列分析
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江苏农业学报》2007年 第3期23卷 204-207页
作者:倪艳秀 段志涛 何孔旺 陆承平江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物畜禽疫病诊断重点开放实验室江苏南京210014 南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室江苏南京210095 
猪链球菌2型(SS2)是一种重要的人兽共患病病原菌,溶菌酶释放蛋白(MRP)和胞外因子(EF)是其重要的2种毒力因子。参照GenBank上已发表的MRP和EF基因序列,设计引物,对4株国内SS2分离株进行MRP和EF全基因序列测定并进行分析。结果...
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猪链球菌病双重PCR诊断方法的建立
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《中国兽医科学2007年 第8期37卷 700-704页
作者:马清霞 何孔旺 陆承平南京农业大学动物医学院 江苏省农业科学院兽医研究所农业部畜禽疫病诊断重点开放实验室江苏南京210014 
根据猪链球菌2型荚膜多糖和马链球菌兽疫亚种类M蛋白的保守区序列分别设计了2对简并引物,建立了一种能同时检测猪链球菌2型和马链球菌兽疫亚种的双重PCR方法。结果显示,该双重PCR能从100个细菌的混合纯培养物中扩增出2条目的片段。而且...
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猪链球菌2型及其毒力因子检测多重PCR的建立与应用
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《中国兽医学报》2006年 第1期26卷 28-31页
作者:马清霞 何孔旺 陆承平南京农业大学动物医学院江苏南京210095 江苏省农业科学院兽医所农业部畜禽疫病诊断重点开放实验室江苏南京210014 
根据相关文献设计并合成引物,建立了能同时检测猪链球菌2型(cps)及其重要毒力因子溶菌酶释放蛋白(mrp)和细胞外因子(epf)的多重PCR方法。目的片段的大小分别为885bp(mrp)、675bp(cps)和443bp(epf)。对参考菌株、人工攻毒病料和临床收集...
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鸡腺胃型传染性支气管炎病毒金坛分离株核蛋白基因分析及与标准强毒株同源性比较
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《中国兽医学报》2002年 第2期22卷 111-113页
作者:凌雯 钱建飞 李银 张则斌 潘杰彦 陈溥言江苏省农业科学院畜牧兽医研究所农业部畜禽疫病诊断重点开放实验室江苏南京210014 南京农业大学动物医学院江苏南京210095 
根据已发表的鸡传染性支气管炎病毒 (infectious bronchitis virus,IBV) Beau株、M41株的核苷酸序列 ,设计并合成 1对引物。应用该引物 ,通过 RT- PCR扩增出 IBV金坛分离株 (JT株 )的核蛋白基因 (N基因 ) ,片段大小为 82 8bp,与设计相...
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