摘要：表面修饰是生物医学材料领域的核心技术之一,其根本目的就是要使生物材料表面具有更好的生物相容性。目前,人们已经开发出了多种生物材料表面修饰的方法。根据生物材料应用领域的不同以及面临问题的差异,其所采取的表面修饰方法也各有区别,或减少蛋白吸附和凝血,或控制细胞粘附、生长和分化,或改善材料的力学性能等。心血管生物材料领域的表面修饰技术主要针对提高材料的血液相容性和内皮细胞相容性等方面,进一步可以拓展到组织工程和再生医学方面。就心血管植入生物材料的研究现状、表面生物化修饰方法以及针对不同目的的表面改性技术进展进行了综述,以期能够为设计和开发新一代心血管植入医疗装置提供重要的参考。

摘要：目的观察神经再生素(NRF)影响海马神经元生长的机制。方法用胚胎17d的大鼠海马离体培养神经原,分用药组和对照组,培养6h加NRF(1μg/ml),检测神经元突起长度,提取细胞的总RNA并纯化,设计合成G蛋白偶联受体(GPCR)基因的引物,采用Taqman荧光探针,实时定量PCR,检测离体培养海马神经元用药组和对照组细胞GPCR基因表达量的变化。结果用药组的神经元突起生长较长,GPCR的基因表达量显著高于对照组(P<0·01)。结论NRF使海马神经元生长并增加GPCR基因的表达,GPCR可引起神经细胞生长的生物效应。

摘要：目的:制备用地高辛标记的神经生长因子低亲和力受体(p75)的RNA探针。研究p75在海马组织中的表达。方法:设计p75引物,构建p75/pGEM-T重组质粒,分别用ApaⅠ和SacⅠ进行酶切得到线性化DNA片段,以Sp6和T7聚合酶转录合成酶合成地高辛标记的(dig-)正反义RNA探针。运用点膜杂交的方法检验探针的敏感度,运用该探针,通过原位杂交分析p75在海马中的表达。结果:构建了p75/pGEM-T质粒,获得高效价的正、反义dig-p75RNA探针,应用该探针发现p75mRNA在海马中的表达。结论:成功制备了地高辛标记的p75RNA探针,为进一步研究p75在海马中发育和损伤过程中的表达打下基础。

摘要：制备用地高辛标记的神经生长因子(NGF)的RNA探针并用其研究NGF在海马组织中的表达。设计NGF引物,构建NGF/pGEMT重组质粒,分别用ApaⅠ和SacⅠ进行酶切得到线性化DNA片段,以Sp6和T7聚合酶转录合成酶合成地高辛标记的(dig)正、反义RNA探针。运用点膜杂交的方法检测探针的敏感度;运用该探针的原位杂交法分析NGF在海马中的表达。本研究成功地构建了NGF/pGEMT质粒,获得了正、反义digNGFRNA探针,并应用该探针在海马中观察到NGFmRNA的表达。本研究的结果为深入探讨NGF在海马发育和损伤过程中的表达奠定了基础。

摘要：介绍了一种用于神经元集群电信号探测的2×2微电极阵列芯片.该芯片集成了4个直径为20μm、中心间距为100μm的圆形微电极.4个电极点周围都布满地线作为参考电极,4个电极点与参考电极的间距分别为5,10,15和20μm.芯片版图设计及验证采用华大九天系统设计软件Zeni完成,并通过无锡CSMC公司的0.6μm DMDP CMOS标准工艺实现,芯片面积为0.28mm×0.40mm.对芯片进行了在晶圆电学测试,采用频率为10Hz～1MHz,幅度为50mV的正弦信号作为输入信号,分别测试4个电极点的阻抗特性.测试结果表明,在10kHz处4个电极点的等效阻抗模值在0.7～2.1MΩ之间,达到了细胞外电信号测量的要求.在芯片表面进行了L-929细胞和胎鼠海马神经元培养实验,结果表明芯片经过表面生物相容性修饰后可用于细胞外电信号测量.

摘要：目的:构建巢蛋白nestin启动子驱动的微管蛋白表达载体,并在斑马鱼及大鼠神经干细胞中正确表达,为实现神经干细胞/神经前体细胞中微管骨架的动态观察和研究提供工具。方法:设计引物扩增斑马鱼基因组DNA中nestin基因上游启动子-952 bp片段并克隆测序;通过PCR获得斑马鱼EGFP-α-Tubulin融合蛋白序列,构建pzNestin-EGFP-α-Tubulin重组表达质粒;通过显微注射将目的质粒导入斑马鱼胚胎并在共聚焦显微镜下观察并拍摄;采用电转法将目的质粒导入大鼠神经干细胞,在荧光显微镜下观察。结果:在荧光显微镜下均观察到斑马鱼胚胎和大鼠神经干细胞中的EGFP荧光蛋白信号。结论:成功构建了pzNestin-EGFP-α-Tubulin质粒,在斑马鱼胚胎和大鼠神经干细胞中均能表达。

摘要：背景:骨髓基质干细胞具有向神经组织细胞分化的多潜能特性。以往实验以化学试剂作为诱导剂加入细胞培养液中,在体外成功地诱导出神经组织细胞。目的:观察大鼠施万细胞和骨髓基质干细胞体外共培养后,骨髓基质干细胞能否被诱导向神经组织细胞分化。设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2006-09/2008-10在南通大学医学院组织学与胚胎学教研室及江苏省神经再生重点实验室完成。材料:SPF级新生1～3d龄SD大鼠用于制备施万细胞,SPF级成年雄性SD大鼠用于制备骨髓基质干细胞,动物均由南通大学实验动物中心提供。方法:将传2代培养的骨髓基质干细胞和施万细胞分别以1×105和1×106的密度接种于transwell双层6孔细胞培养板的皿底和板底,两种细胞间隔以PET膜,其膜孔径为0.4μm,于37℃、体积分数为5%的CO2培养箱中进行非接触性共培养14d。另外,将施万细胞培养上清作为条件培养基,培养骨髓基质干细胞14d。主要观察指标:光镜下观察共培养后骨髓基质干细胞的形态变化;MTT检测共培养前后骨髓基质干细胞的活性;免疫荧光染色鉴定共培养后骨髓基质干细胞S-100蛋白的表达,流式细胞仪测定S-100蛋白阳性率;免疫荧光染色检测条件培养基培养后骨髓基质干细胞S-100,P75,GFAP的表达。结果:共培养后的骨髓基质干细胞形态发生改变,原来宽大扁平的胞体开始收缩,细胞胞体呈梭形,部分细胞类似施万细胞呈线性排列。共培养前后及条件培养基培养后,骨髓基质干细胞的活力无明显差异(P>0.05)。共培养14d后,骨髓基质干细胞表达施万细胞表面标记S-100蛋白,阳性率达(22.54±2.36)%。条件培养基培养14d后,骨髓基质干细胞表达施万细胞表面标记S-100蛋白,P75,GFAP。结论:施万细胞分泌因子可以诱导部分骨髓基质干细胞向神经组织细胞分化,并表达施万细胞表面标记。

摘要：The module for function electrical stimulation （FES） of neurons is designed for the research of the neural function regeneration microelectronic system, which is an in-body embedded micro module. It is implemented by using discrete devices at first and characterized in vitro. The module is used to stimulate sciatic nerve and spinal cord of rats and rabbits for in-vivo real-time experiments of the neural function regeneration system. Based on the module, a four channel module for the FES of neurons is designed for 12 sites cuff electrode or 10 sites shaft electrode. Three animal experiments with total five rats and two rabbits were made. In the in-vivo experiment, the neural signals including spontaneous and imitated were regenerated by the module. The stimulating signal was used to drive sciatic nerve and spinal cord of rats and rabbits, successfully caused them twitch in different parts of their bodies, such as legs, tails, and fingers. This testifies that the neural function regeneration system can regenerate the neural signals.

摘要：背景:天然甲壳素溶解性差,不易加工处理。传统工艺制备的甲壳素存在较多致炎性杂质蛋白。目的:观察由高纯度壳聚糖乙酰化制备的甲壳素材料与许旺细胞的体外生物相容性。设计、时间及地点:对比观察实验,于2006-09/2007-10在南通大学医学院组织学与胚胎学教研室及江苏省神经再生重点实验室完成。材料:新生一两天的SPF级SD大鼠坐骨神经和臂丛神经用于培养许旺细胞,自制壳聚糖膜,脱乙酰度为92.5%。方法:将脱乙酰度92.5%的壳聚糖膜浸入5%的醋酐甲醇溶液中进行乙酰化反应后制备甲壳素膜。体外接种许旺细胞分别至壳聚糖膜和甲壳素膜上。主要观察指标:共培养6d后通过抗S-100蛋白免疫细胞化学的方法鉴定,并进行光镜、扫描电镜观察细胞形态。CCK-8试剂检测在壳聚糖膜浸出液、甲壳素膜浸出液、L-15培养基、有机锡浸出液中生长2,4,6d许旺细胞的细胞活力。结果:抗S-100蛋白免疫细胞化学的鉴定结果提示这类细胞为许旺细胞;光镜、扫描电镜观察均发现细胞能够在壳聚糖膜和甲壳素膜表面正常生长,细胞贴附牢固,外形饱满,大多数细胞呈长梭形,边缘清晰,细胞增殖情况良好。细胞活力检测的结果显示壳聚糖膜浸出液和甲壳素膜浸出液中生长的许旺细胞与L-15培养基中生长的细胞相比,细胞活力无明显差异(P>0.05)。有机锡浸出液中生长的许旺细胞活力均低于其他浸出液,差异有显著性意义(P<0.05)。结论:壳聚糖乙酰化制备的甲壳素材料与许旺细胞体外生物相容性良好。

摘要：分子生物学技术是生物医药相关专业研究生培养中的重要基础实验课程。结合近年来本课程团队的教学经验,探讨将传统的分子生物学实验课程重新设计,改革为研究生主导的研究性实验课程翻转课堂。即,依据研究生科研工作方式,促其在课前研读实验原理、试剂说明、选取和设置对照,利用在线平台充分开展讨论;在课堂上各实验小组进行操作、分析讨论实验结果,教师引导研究生的技术操作以达成实验教学目标、注重考查学生实验设计和结果分析能力;在课程结束后保留在线平台,实现长期学术交流。