摘要：以大肠杆菌O157:H7的VT2基因序列设计特异性引物,利用Midori Green新型核酸荧光染料,建立鸡肉中大肠杆菌O157:H7实时荧光定量环介导等温扩增(Rti-LAMP)检测方法。纯培养大肠杆菌O157:H7检测灵敏度达3.5 CFU/反应,需时45 min。模拟大肠杆菌O157:H7污染鸡肉样品,经37℃增菌4 h,用Whirl-pak无菌袋过滤离心得沉淀,提取样品DNA模板用于Rti-LAMP反应,检测大肠杆菌O157:H7灵敏度达140 CFU/g,整个检测流程约7 h。采用蒙脱石封闭的活性炭前处理污染鸡肉样品,不经增菌过程,结果表明:该Rti-LAMP检测方法灵敏度达12 CFU/g,整个检测耗时约4.5 h。市购鸡肉样品51份,以大肠杆菌国标检测法为对照,研究基于Rti-LAMP联合增菌或封闭活性炭预处理而不经增菌的两种方法,对比检测临床鸡肉样品大肠杆菌O157:H7污染率。结果:国标法和增菌的Rti-LAMP两种方法均检测到同一鸡肉样品为大肠杆菌O157:H7阳性,经封闭活性炭预处理而未经增菌的Rti-LAMP则检测到8份鸡肉样品大肠杆菌O157:H7阳性。研究表明,封闭活性炭预处理的Rti-LAMP检测方法较国标法更灵敏、快速、简便、特异地检测鸡肉中大肠杆菌O157:H7污染。

摘要：为了开发利用青钱柳多糖(CPP)资源,本文探究了超声波结合复合酶处理提取CPP的工艺条件并对其结构进行了初步分析。首先通过单因素实验获得各因素的最佳范围,利用Plackett-Burman试验设计筛选影响CPP得率的关键因素,再采用Box-Behnken设计对提取工艺进行优化。最后,采用紫外、红外光谱以及气相色谱对CPP结构进行初步分析。结果表明,关键因素为酶解pH、复合酶添加量、酶解时间和超声功率。最佳工艺参数为酶解pH值6.11,复合酶添加量4.81%,酶解时间1.685 h,超声功率96.9 W,料液比1∶20,超声时间30min,CPP得率为7.18%。CPP具有多糖典型的羟基和醛基结构,且单糖组成为鼠李糖∶阿拉伯糖∶甘露糖∶葡萄糖∶半乳糖=1.00∶7.03∶2.06∶2.11∶5.25∶12.06。

摘要：根据沙门氏菌inv A基因序列设计特异性引物,利用Midori Green新型核酸荧光染料,建立了沙门氏菌实时荧光定量环介导等温扩增检测方法。结果表明,检测过程仅需45 min,灵敏度达6 CFU/管,而且细菌数量对数值(lg(CFU/管))与扩增荧光指数增加时间(Tp值)具有良好正相关线性关系,R2为0.985 1。通过模拟沙门氏菌人工污染25 g鸡肉样品,经37℃保温4 h,提取样品制备DNA模板用于实时荧光定量环介导等温扩增检测,结果表明灵敏度达450 CFU/g,共需时约7 h。随机从市场购买冷冻鸡肉样品21份,采用国标沙门氏菌检测方法和鸡肉样品实时荧光定量环介导等温扩增检测进行对比检测,结果两种方法均检测出同一份样品为沙门氏菌阳性,其余20份样品均为沙门氏菌阴性,表明本研究建立的鸡肉沙门氏菌实时荧光定量环介导等温扩增检测,其灵敏性和准确性与国标检测方法相当,但检测时间可缩短至7 h。

摘要：研究以沙门氏菌的invA基因序列设计特异性引物,结合蒙脱石封闭的活性炭(BCAC)吸附、叠氮溴化乙锭(EMA)前处理牛奶样品,建立了一种基于实时荧光环介导等温扩增法(Rti-LAMP)非预增菌快速检测牛奶中低浓度活沙门氏菌的方法。以每份25 mL牛奶样品,人工模拟不同浓度沙门氏菌污染,用4.0 g蒙脱石封闭的活性炭吸附处理样品,然后对回收精制的细菌样品用4.0μg/mL EMA终浓度作用处理,提取细菌样品DNA用于RtiLAMP扩增检测,该方法检测灵敏度为1×10^1CFU/mL活沙门氏菌,整个检测过程约5 h。以沙门氏菌国标检测法为参照,采用BCAC-EMA-Rti-LAMP检测生鲜牛奶样品27份,结果显示:2种方法均检测到同一份沙门氏菌阳性牛奶样品,而BCAC-EMA-Rti-LAMP另检测到3份牛奶样品沙门氏菌阳性。研究表明,建立的BCAC-EMARti-LAMP检测方法较国标检测法更灵敏、快速,可用于牛奶沙门氏菌污染的快速检测。

摘要：【目的】随着人民物质生活水平的不断提高,对食品质量要求也愈来愈高,食品安全现如今已经成为影响人类生命健康财产安全的重大公共卫生问题。食源性致病菌是引起食品安全中毒事件的主要原因,而副溶血弧菌主要污染海产品从而引起急性肠胃炎。因此,快速有效地检测筛查污染的海产品,是有效防控副溶血弧菌食源性疾病暴发的必要条件。【方法】研究以副溶血弧菌特异性tlh基因设计合成引物,以Midori Green为核酸荧光染料,构建了一种副溶血弧菌实时荧光环介导等温扩增(Rti-LAMP)检测技术,并联合蒙脱石封闭的活性炭(BCAC)、叠氮溴化乙锭(EMA)对样品前处理,建立了一种非预增菌快速检测鱼肉污染活的副溶血弧菌方法。【结果】Rti-LAMP检测纯培养副溶血弧菌灵敏度达1 CFU/反应,1 h以内完成。模拟污染1 g鱼肉样品,经4 g BCAC吸附和6μg/mL EMA终浓度处理细菌样品,提取细菌DNA用于Rti-LAMP扩增反应,最低检出限为6 CFU/g活的副溶血弧菌,整个检测过程需约5 h。对市售33份新鲜海鱼样品检测,BCAC-EMARti-LAMP检测出3份阳性样品,BCAC-Rti-LAMP为6份阳性样品,而相应国标检测法为2份阳性样品。【结论】研究表明,BCAC-EMA-Rti-LAMP可以有效检测区分样品中活的副溶血弧菌污染,较国标检测法更快速、灵敏,有望作为鱼肉副溶血弧菌污染的一种快速筛查检测方法。

摘要：【目的】建立Cr、Ni和Co 3种重金属元素含量测定的石墨炉原子吸收光谱法,并利用建立的方法测定8种江西名茶中相应的3种重金属元素的含量,同时进行比较分析。【方法】首先通过正交试验设计优选各元素测定的仪器最佳工作条件,在最佳仪器工作条件下建立各元素的标准曲线,同时考察建立方法的检出限、精密度;然后优化前处理条件,在优选的前处理条件下,测定样品加标回收率,考察建立方法的准确度;最后利用建立的方法测定8种江西名茶中3种元素的含量并对其进行比较分析。【结果】建立的各元素原子吸收光谱法在相应浓度区间内线性关系良好,相关系数为0.9946~0.9993,精密度RSD值为3.93%~8.06%,检出限为0.88~5.625μg/mL,回收率为70.02%~93.50%,均符合要求。3种元素测定结果表明各元素在8种茶叶中的含量存在一定的差异显著性,各元素含量在不同茶叶中的由大到小排序基本为Ni、Cr和Co,Ni元素含量最高的是婺源毛尖;Cr元素含量最高的是庐山云雾;Co元素含量最高的是井冈翠绿。【结论】建立的茶叶中3种重金属元素含量的石墨炉原子吸收光谱法操作简便,干扰较少,灵敏度高,对其他各种茶叶中相应元素含量的测定均适用,测得的8种江西名茶中Cr、Ni和Co 3种重金属元素含量均较低,符合食用要求。

摘要：金银花籽油特性研究可提高金银花资源的开发利用,采用响应面分析法优化金银花籽油的超声提取工艺并分析其脂肪酸组成。结合单因素和Box-benhnken中心组合方法设计的试验优化液料比、提取时间和提取功率等提取条件,使用气-质联仪分析提取油的脂肪酸组成。结果显示,模拟得到的二次多项式回归方程拟合性好,金银花籽油提取的最佳工艺是:以丙酮为提取溶剂,液料比30 m L/g,提取时间41 min,超声功率165 W,此条件下,金银花籽油提取率可达10.76%,提取油品质较好,不饱和脂肪酸总量多达85.81%,以亚油酸、油酸为主。

摘要：研究超声波提取黄金茶多糖工艺及体外抗氧化活性。采用L9(34)正交试验、方差分析和多重比较法对超声波提取黄金茶多糖进行试验和结果分析;对黄金茶多糖提取的单因素(超声功率、超声时间、料液比、超声温度)进行优化,通过测定黄金茶多糖清除自由基能力和还原能力来评价其抗氧化活性。黄金茶多糖优化提取工艺为超声功率165 W,超声时间40 min,料液比1∶40,超声温度65℃;黄金茶多糖最高得率可达11.23%。黄金茶多糖对DPPH、·OH、超氧阴离子自由基清除能力和还原能力低于Vc,差异极显著(P<0.01);0.2 mg/m L多糖和VC对ABTS+自由基清除能力,二者差异极显著(P<0.01);黄金茶多糖对·OH、ABTS+自由基的半抑制浓度(IC50)分别为1.713 mg/m L、0.553 mg/m L。黄金茶中多糖的含量较高,在一定浓度范围内,多糖浓度越高,其抗氧化活性越强。

摘要：为研究热水处理技术在柑橘类水果采后保鲜中的应用可行性。试验以江西省赣南脐橙为试材,设计2因素(温度和时间)5水平均匀试验,分别考查热水处理后赣南脐橙贮藏品质相关指标(呼吸速率、可溶性固形物含量和硬度)和贮藏发霉情况,并研究了热水处理对赣南脐橙青、绿霉病原菌(意大利青霉和指状青霉)孢子的致死作用机制。综合分析,得出赣南脐橙热水处理较优条件为:50℃,5 min。该条件处理后的赣南脐橙呼吸速率最低,为42.89 mg CO_2/(kg·h)。25℃温箱保藏20 d,该处理组赣南脐橙均未发病,优于对照组。加赣南脐橙皮到病原菌孢子悬液中进行热水处理,病原菌孢子死亡率检测及Hoechst 33342/PI荧光双染色结果显示,赣南脐橙皮成分与热对病原菌有协同抑杀作用,病原菌孢子细胞膜受到损伤。50℃,5 min热水处理应用于赣南脐橙采后保鲜具有可行性。