摘要：背景:芳香族聚酯生物降解性很差,不能单独作为降解材料使用,南昌大学材料科学与工程学院通过对苯二甲酰氯、双酚A、己二醇和低聚乳酸通过熔融共缩聚和酯交换的方法合成出一种新型生物可降解材料——芳香/脂肪共聚酯,已申请专利。目的:观察芳香/脂肪共聚酯生物材料与大鼠骨髓间充质干细胞的相容性。设计、时间及地点:细胞-材料学体外实验,于2006-04/2007-04在南昌大学第一附属医院泌外研究所完成。材料:健康雄性SD大鼠5只,由江西中医学院实验动物中心提供。生物可降解聚酯材料为本项目小组正在研制的一种新的脂肪族/芳香族共聚脂。方法:通过溶液浇铸法将可降解聚酯(聚对苯二甲酸双酚A酯-co-对苯二甲酸己二酯-co-乳酸)材料制备成共聚酯生物膜,同法制备聚氯乙烯生物膜。将共聚酯生物膜消毒后浸于细胞培养基中,收集材料浸提液,过滤灭菌保存,同法制备聚氯乙烯浸提液。取第三四代大鼠骨髓间充质干细胞,以2×107L-1密度接种于96孔板中,以1.3×105个/孔接种于含上述制备的无菌共聚脂生物膜的24孔板内。分为3组:①阴性对照组,单纯加入DMEM培养基。②实验组,在加入DMEM培养基的基础上,分别加入12.5%,25%,50%,100%的材料浸提液。③阳性对照组,在加入DMEM培养基的基础上,加入聚氯乙烯浸提液。主要观察指标:通过中性红摄取法、碱性品红染色法、MTT还原检测法,对材料毒性进行评价,电镜观察细胞在生物膜上的生长情况。结果:培养1,3,5,7d后,阳性对照组细胞活力及代谢能力有不同程度的下降(11%～16%);实验组与阳性对照组吸光度值比较差异有显著性意义(P0.05)。电镜扫描及吖啶橙/溴化乙啶染色结果显示,接种第1天骨髓间充质干细胞即可附着在共聚酯生物膜表面呈梭形生长,随时间的延长细胞逐渐增多,表现出良好的附着性,凋亡及坏死率较低。结论:初步证明芳香/脂肪共聚酯生物材料对细胞生长无毒性作用,且具有较好的细胞相容性,基本符合生物材料的应用要求。

摘要：目的探讨胸段食管癌放疗中容积旋转调强(VMAT)和静态调强(IMRT)对计划靶区(PTV)及危及器官受照剂量的影响。方法选取食管癌患者30例,每例患者分别设计360度双弧VMAT和5野固定角度IMRT两种不同的放疗计划,用剂量体积直方图测算PTV受照剂量、适形指数(CI)、剂量不均匀指数(HI),心肺受照剂量用Vx表示(接受X Gy照射的体积占整个器官照射体积的百分比),记录脊髓受照最大剂量(Dmax)、平均剂量(Dmean)、最小剂量(Dmin)。结果 VMAT与IMRT的CI比较差异有统计学意义(P0.05)。心脏受照剂量二者在V_(10)、V_(15)、V_(20)、V_(30)、V_(40)、V50比较差异有统计学意义(P均0.05),但DminVMAT明显优于IMRT(P<0.05)。结论在胸段食管癌放疗中,VMAT和IMRT的PTV照射剂量差异不大,对心肺、脊髓等重要危及器官的照射剂量VMAT少于IMRT。

摘要：背景：有实验表明60Coγ射线灭菌处理的胶原膜会促使胶原分子产生交联,影响其稳定性。目的：通过测定冻干辐照处理后猪腹膜胶原酶酶解时间,了解冻干辐照猪腹膜在体外的稳定性。设计、时间及单位：动物实验观察,于2007-07/2008-06在南昌大学烧伤研究所、南昌大学-新三思公司联合力学实验室、江西中医学院中药固体制剂国家工程研究中心与江西天兆科技发展公司完成。材料：选用健康活体猪6只,无菌条件下取新鲜猪腹膜。60Coγ射线辐照装置为江西天兆科技发展公司生产。方法：新鲜猪腹膜按照处理方式分成4组,新鲜组：将新鲜猪腹膜放入含有庆大霉素1×105U/L的生理盐水中清洗修剪平整后,再放入保护液中浸泡约15min,最后放入0-4℃冰箱中保存、备用。冻干组：将新鲜猪腹膜放入EMDE＋10%甘油中的猪腹膜浸泡15min后,取出放入-78℃的冰箱中,使其形成冰晶,再放入真空冷冻干燥机内冻干6h,取出室温保存、备用。辐照组：在冻干组基础上将猪腹膜放入剂量为25kGy的60Coγ辐照装置内,动态辐照72h后取出,放入0-4℃冰箱中保存、备用。冻干＋辐照组：在辐照组基础上将猪腹膜放入剂量为25kGy的60Coγ辐照装置内,动态辐照72h后取出室温保存、备用。主要观察指标：同时取直径为5mm各组猪腹膜圆片用胶原酶Ⅰ型酶解,计算各片材料完全酶解时间。结果：4组猪腹膜胶原酶酶解时间：（9.6±1.2）,（6.1±1.6）,（29.2±3.0）,（23.5±2.6）mins。辐照组和冻干＋辐照组猪腹膜酶解时间比新鲜组和冻干组明显延长（P〈0.05）,但新鲜组和冻干组之间比较及辐照组和冻干＋辐照组之间比较,猪硬脑膜酶解时间无明显差别（P〉0.05）。结论：经60Coγ射线照射后的猪腹膜抗酶解能力增强;辐照均能增加猪腹膜的稳定性,冻干对猪腹膜的稳定性无明显影响。

摘要：背景:抗氧化剂法及细胞因子法是体外诱导脐血间充质干细胞定向分化为神经元的2种方法,怎样选择既可广泛保护神经,又具有较强抗氧化作用的诱导剂?通过广泛筛选,应用中药干预脐血间充质干细胞的体外纯化、扩增并向神经元细胞分化。目的:观察中药单体黄芩苷对人脐血间充质干细胞体外纯化、扩增及向神经元样细胞诱导分化的作用。设计,时间,地点:随机对照,细胞学体外观察,于2005-02/06在南昌大学第一附属医院神经内科实验室完成。材料:年龄为23～35岁的健康孕妇足月顺产儿的脐带血10份;黄芩苷,纯度>95%,由中南大学湘雅医学院药剂科提供;抗氧化添加剂β-巯基乙醇为SABC公司产品。方法:采集胎儿脐带血,肝素抗凝,分离出脐血单个核细胞,调整细胞浓度为1×109L-1,以含体积分数为20%胎牛血清、谷氨酰胺、B27、粒巨噬细胞集落刺激因子、干细胞因子的DMEM液体培养基进行纯化和扩增。按照抗氧化添加剂的不同分为4组:黄芩苷组加入黄芩苷;空白对照组不添加抗氧化剂;β-巯基乙醇组添加β-巯基乙醇;共培养组添加黄芩苷、β-巯基乙醇。连续培养4周。主要观察指标:①脐血冷冻保存后7,14,21,28dCD34及CD29阳性细胞的表达。②细胞形态学观察。③流式细胞仪检测间充质干细胞表面标志。④免疫细胞化学染色观察间充质干细胞扩增培养4周后神经细胞特异性烯醇化酶、神经微管相关蛋白2和胶质纤维酸性蛋白阳性细胞的表达。结果:①与冻存前相比,冻存后7,14,21,28d脐血单个核细胞锥虫蓝拒染率均明显降低(P<0.05)。②细胞形态学观察:脐血单个核细胞培养第2～3天开始贴壁生长,2周左右达高峰,3周后细胞生长达80%～90%融合,此时脐血原始间充质干细胞呈较均一的长梭形。4周后,黄芩苷组原来呈梭形的胞体一部分发生收缩,细胞边缘出现细的突起;一部分胞体逐渐近似圆形、锥形、三角形,伪足有多个细长突起。β-巯基乙醇组、共培养组有少量细胞存在脱落、死亡现象,且随着培养时间延长呈逐渐增加的趋势。③培养4周后,空白对照组以CD45阳性细胞为主;其余3组均以CD29和CD83阳性细胞为主,其中共培养组最多,黄芩苷组次之,β-巯基乙醇组最少,组间两两比较差异具有显著性意义(P<0.01);各组贴壁生长细胞中均未见CD34阳性细胞。④扩增培养4周后与黄芩苷组比较,空白对照组、β-巯基乙醇组神经细胞特异性烯醇化酶及神经微管相关蛋白2阳性细胞表达率均显著降低(P<0.01)。各组胶质纤维酸性蛋白阳性细胞表达率均低于1%。结论:100μmol/L黄芩苷可促进脐血间充质干细胞体外扩增,且随抗氧化作用时间的延长效果显著增强,同时在一定程度上还能够诱导其向神经元样细胞方向分化。

摘要：目的探讨躯体形式障碍(SD)患者述情障碍及焦虑、抑郁的情绪特征,并探讨述情障碍与负性情绪的相关性。方法选取2015年9月—2016年3月在南昌大学第一附属医院心身医学科门诊首次就诊的SD患者60例为研究组,在本科室门诊就诊患者的家属、本院其他科室就诊的患者中选取符合纳入排除标准的60例为对照组。采用自行设计的调查表收集基本情况;采用多伦多述情障碍量表(TAS-20)、汉密尔顿焦虑量表(HAMA)、汉密尔顿抑郁量表(HAMD)分别评估受试者述情障碍、焦虑及抑郁的严重程度;采用Pearson相关分析探讨SD患者述情障碍与负性情绪的相关性。结果两组情感辨别不能、情感描述不能、外向型思维评分及TAS-20总分比较,差异有统计学意义(P<0.05)。两组躯体性焦虑(HAMA-SOM)、精神性焦虑(HAMA-PSY)评分及HAMA总分比较,差异有统计学意义(P<0.05)。两组焦虑/躯体化、体质量、认知障碍、迟缓、睡眠障碍评分及HAMD总分比较,差异有统计学意义(P<0.05)。SD患者情感辨别不能、情感描述不能、外向型思维评分及TAS-20总分与HAMA-SOM、HAMA-PSY评分及HAMA总分呈线性正相关(P<0.05);SD患者情感辨别不能、情感描述不能、外向型思维评分及TAS-20总分与焦虑/躯体化、体质量、认知障碍、迟缓、睡眠障碍评分及总分呈线性正相关(P<0.05)。结论 SD患者存在明显的述情障碍并伴随一定程度的焦虑、抑郁症状,且述情障碍与焦虑、抑郁情绪呈正相关。

摘要：背景:近年来人们发现了一种脂肪来源的基质干细胞,将其移植到发生梗死的动物心肌中可以改善心功能,其机制除分化为心肌、内皮细胞外,对宿主心肌细胞有无直接作用尚需进一步研究。目的:观察缺氧预处理脂肪基质干细胞对心肌细胞凋亡的影响并探讨其机制。设计、时间和地点:完全随机区组设计的细胞分子学实验,于2007-12/2008-06在南昌大学第一附属医院高血压病研究所完成。材料:胶原酶I、红细胞裂解液购自Invitrogen公司(美国),Dulbecco改良Eagle培养基、胎牛血清,胰蛋白酶购自GIBCO公司(美国)。方法:选用雌性SD大鼠10只,取大鼠脂肪组织用胶原蛋白酶Ⅰ消化后培养获得脂肪基质干细胞,流式细胞术鉴定其表型。乳鼠5只用于培养乳鼠心肌细胞。根据培养环境分为4组,分别应用DMEM、常规培养脂肪基质干细胞上清、缺氧培养脂肪基质干细胞上清和渥曼青霉素进行培养,应用DMEM组为对照组。4组细胞均在缺氧条件下(O2、CO2、N2体积分数分别为0.02,0.05,0.93)培养3d。主要观察指标:AnexinⅤ/PI双染色法测定心肌细胞的凋亡率,Western blotting法测定心肌细胞蛋白激酶、磷酸化蛋白激酶蛋白表达。结果:培养获得的脂肪基质干细胞,表型为CD44+CD90+CD31-CD45-。对照组心肌细胞凋亡率明显高于常规脂肪基质干细胞组和缺氧脂肪基质干细胞组(P0.05)。缺氧脂肪基质干细胞组磷酸化蛋白激酶/蛋白激酶比值明显高于对照组和常规脂肪基质干细胞组(P0.05)。结论:缺氧预处理脂肪基质干细胞能提高对心肌细胞凋亡的保护,其机制可能和脂肪基质干细胞分泌细胞因子激活PI3-K/蛋白激酶信号通路有关。

摘要：背景:理想的硬脑膜替代材料要求其自身具有一定的韧性与弹性。目的:通过对经冻干辐照处理后猪硬脑膜胶原酶Ⅰ型酶解时间、最大负荷及抗张强度进行测定,验证经冻干、辐照处理过的猪硬脑膜是否符合硬脑膜移植对生物力学的要求。设计、时间及地点:对比分析实验,于2007-07/2008-06在南昌大学烧伤研究所、南昌大学-新三思公司联合力学实验室、江西中医学院中药固体制剂国家工程研究中心与江西天兆科技发展公司完成。材料:选用健康活体猪6只,无菌条件下取新鲜猪硬脑膜。方法:猪硬脑膜经过冲洗、预冻、冻干、60Coγ射线照射等处理,按照处理方式分成新鲜猪硬脑膜组、冻干猪硬脑膜组、辐照猪硬脑膜组及冻干+辐照猪硬脑膜组。主要观察指标:取5mm各组猪硬脑膜圆片用胶原酶Ⅰ型酶解计算其完全酶解时间;用EMT彩屏电子拉力试验机分别测出各组替代材料的最大负荷、抗张强度。结果:新鲜猪硬脑膜组、冻干猪硬脑膜组、辐照猪硬脑膜组及冻干+辐照猪硬脑膜组硬脑膜胶原酶酶解时间分别为(8.3±2.5),(7.6±1.8),(23.6±5.7)与(21.1±5.3)min,最大负荷和抗张强度分别为(79.93±4.36),(70.50±5.97),(96.97±4.84)N和(93.59±4.61),(7.98±0.44),(7.05±0.60),(9.70±0.48)和(9.40±0.46)N/mm,与新鲜猪硬脑膜组和冻干猪硬脑膜组比较,辐照猪硬脑膜组和冻干+辐照猪硬脑膜组时间明显延长,差异有显著性意义(P0.05)。结论:经Coγ射线照射后的硬脑膜抗酶解能力、生物力学特性增强;辐照与冻干+辐照猪硬脑膜均能满足硬脑膜移植对其生60物力学方面的要求。

摘要：背景：目前同种异体角膜移植是角膜病的主要治疗手段，但该法存在免疫排斥反应、供体来源短缺、角膜内皮细胞慢性丧失功能等难以克服的缺点。目的：探讨人骨髓间充质干细胞在体外向角膜上皮细胞横向分化的可能性。设计、时间及地点：细胞学体外对比观察，于2004-06／2005-06在江西省人民医院中心实验室江西省干细胞重点实验室完成。材料：成人角膜缘上皮组织由江西省眼库提供，南志愿者捐献。经肝素抗凝的成人骨髓7份，来自汀西省人民医院骨髓穿刺室同期收治的需要行骨髓细胞学榆查的患者，均排除血液系统恶性疾病。方法：无菌条件下将人角膜缘上皮组织剪碎，胰蛋白酶消化，过滤离心，加入含20％FBS的DMEM／F12培养液，制作条件培养基，置于-20℃备刷。采用淋巴细胞分离液密度梯度法从人骨髓液中分离出单个核细胞层，贴蹙法培养扩增，取传至第5代的骨髓间充质干细胞，按2×10^4个/孔密度接种，待细胞完全贴壁后吸除培养液，设立5组：第1组为空白对照，仅加入含10％FBS的DMEM／F12培养基继续培养；其余4组在空白对照的基础上分别加入5，10，15μg/L表皮生长因子、10μg／L表皮生长因子＋50％条件培养基，每3d换液1次，培养30d。主要观察指标：通过细胞角蛋白抗体AE1、AE5免疫组织化学染色结果检测细胞横向诱导转化率。结果：AE1免疫组化染色后与空白对照组比较，5，10，15μg／L表皮生长因子组、10μg／L表皮生长因子＋50％条件培养基组的细胞显色率均明显升高（F=415．39，P〈0．01）；各诱导组间两两比较差异均有显著性意义（F=373．96，q=38．65，18．16，20．49，P〈0，01）：10μg／L表皮生长因子组与10μg／L表皮生长因子＋50％条件培养基组细胞显色率基本相似（t=-0．12，P〉0．05）。AE5免疫组化染色后，各组细胞的胞浆都能被DAB均匀淡染。结论：5～15μg/L表皮生长因子能诱导人骨髓间充质干细胞横向分化为角膜上皮细胞，且此浓度范围内的表皮生长因子诱导作用逐渐增强。用成人角膜缘干细胞培养液制成的50％条件培养基对诱导人骨髓间充质干细胞横向分化为角膜上皮细胞无明显促进作用。

摘要：背景:骨髓间充质干细胞是一种存在于骨髓内的非造血干细胞,因其具有自我更新能力及多向分化潜能,且分离培养方法成熟,在组织器官修复及再生方面显示出良好的应用前景,将为终末期肝病的治疗如生物人工肝及肝细胞移植提供新的细胞来源,但目前人骨髓间充质干细胞向肝系细胞诱导分化培养体系尚不成熟。目的:观察肝细胞生长因子和碱性成纤维细胞生长因子联合应用诱导人骨髓间充质干细胞在体外向肝系细胞分化的可能性。设计:开放性实验。单位:南昌大学第一附属医院传染科与泌尿外科研究所。材料:实验于2004-07/2005-03在南昌大学第一附属医院泌尿外科研究所完成。所用骨髓由成年健康志愿者提供(均对本实验知情同意)。DMEM/F12培养基(Gibco公司);表皮细胞生长因子,肝细胞生长因子,胰岛素,转铁蛋白,鼠抗人甲胎蛋白单克隆抗体,FITC-兔抗鼠IgG(Sig-ma公司);碱性成纤维细胞生长因子(Invitrogen公司);鼠抗人角蛋白18,19单克隆抗体(Chemicon公司);胎牛血清(杭州四季青)。方法:以骨髓腔穿刺方式抽取成年健康志愿者髂后上棘处骨髓10mL,采用密度梯度离心法分离和反复贴壁法纯化骨髓间充质干细胞。取培养至4～8代细胞,消化后以107L-1接种到放置20mm×20mm爬片的预先铺被有0.1%明胶的24孔板中,次日换液,改用无血清DMEM/F12培养基(含20μg/L的表皮细胞生长因子和10μg/L的碱性成纤维细胞生长因子)培养2d后,换成无血清DMEM/F12培养基(含20μg/L的肝细胞生长因子,10μg/L的碱性成纤维细胞生长因子,5mg/L的胰岛素,5mg/L的转铁蛋白)进行诱导分化,每3d换液1次,以未加入肝细胞生长因子和碱性成纤维细胞生长因子的骨髓间充质干细胞作为对照组。骨髓间充质干细胞诱导培养过程中,放射免疫荧光法测甲胎蛋白浓度。诱导当天及第7,14,21,28天,取诱导细胞爬片,细胞免疫荧光法检测肝细胞表面标志物甲胎蛋白、角蛋白18和角蛋白19的表达,并进行糖原染色检测诱导细胞的糖原合成情况。主要观察指标:①细胞形态学观察。②培养上清液中甲胎蛋白表达量的测定。③肝细胞表面标志检测结果。④诱导细胞的糖原合成情况。结果:①诱导第14天可观察到细胞变成短梭形和多角形,随培养时间的延长多角形细胞增多,并可形成肝细胞样的细胞集落。②诱导第14天培养上清液内可检测到甲胎蛋白的分泌,每孔浓度为0.1μg/L;第17天达高峰0.4μg/L;第21天下降至0.3μg/L。③诱导第14天甲胎蛋白、角蛋白18表达呈阳性,第28天角蛋白19表达呈阳性。④诱导第21天糖原染色呈阳性反应。结论:肝细胞生长因子和碱性成纤维细胞生长因子能够诱导人骨髓间充质干细胞在体外向肝细胞分化,表达肝细胞特异性表面标志,并具有合成糖原、分泌甲胎蛋白的功能。

摘要：HPV1摘6E要6、E7目原的癌:使基用因的HP特V异16性E6抑、E制7作siR用N,A为处探理讨表使达用HsPiRVN1A6阳治性疗宫的颈人癌宫的颈可鳞行癌性细提胞供株实Ca验Sk基i和础S。iH方a,法观:察分其别对设计并合成靶向于HPV16E6、E7的siRNA各3条,经脂质体包裹后转染两株细胞,分别采用RT-PCR和WesternBlot方s果iR:法N同A,通对组过照的对组靶转相基染比因前,表各后达E各水6、时平E7间则s无段iRN明两A显基均变因可化m引R。起N其A靶中及基蛋E因6白-表1的s达i表R水N达A平情和的况E显7的-著2检s性i测R下N,A验降对(证P靶R<0基N.0A因5i)作抑;而用制空的作脂特用质异较体性强组及。及时E6阴效-1性性si对。RN照结A和E7-2siRNA转染两株细胞后24h、48h、72h及96h均可观察到靶基因表达的显著性降低(P<0.05),而对相应的非靶基因无明显抑制作用。结论:不同序列的E6、E7siRNA,对靶基因的干扰效率不同;E6、E7siRNA分别作用于宫颈鳞癌细胞株,均引起了靶基因的特异、高效性的抑制,而对非靶基因的表达无明显变化,且抑制作用至少维持到转染后关9键6h词。为s进iR一NA步研E6究采E用7RHAPNV干16扰技宫术颈进癌行宫颈癌的生物治疗奠定了基础。